武汉市部分新生儿耳聋基因与听力联合筛查结果分析*

姚聪 胡艳玲 周爱芬 张斌

我国新生儿耳聋的发病率约为1‰，5岁以下听力障碍儿童的发病率达到2.7%[1]。传统听力筛查对迟发型、有药物性耳聋潜在危险的患儿检出率较低，使部分患儿可能错过言语发育的关键时期而导致因聋致哑。随着新生儿听力筛查工作的开展，以及耳聋基因诊断技术的进步，遗传因素致听力损失的检出率显著提高[2]。第5届国际新生儿听力筛查会议特别指出要将耳聋病因学研究应用于新生儿普遍听力筛查工作，并提出了“超越新生儿听力筛查”的理念。因此，早期发现并重视遗传因素在致聋因素中所起的重要作用显得尤为关键[3]。自2007起在王秋菊等[4]倡导下，我国开始试点开展新生儿听力与耳聋基因联合筛查，近年来对武汉市117 930例新生儿进行了听力与耳聋基因联合筛查，现分析报告如下。

1 资料与方法

1.1研究对象 以2014年6～12月以及2015年6～11月在武汉市内92家助产机构出生的117 930例新生儿为研究对象，其中男59 484例，女58 446例，天龄2～15天。经知情同意后，由出生医院采集新生儿信息并制作合格足跟血片，经武汉市妇幼保健院核实相关信息后，由武汉市卫计委公开招标某检测公司进行统一耳聋基因检测。

1.2听力筛查及诊断 采用两阶段筛查模式，所有新生儿均在出生医院应用筛查型耳声发射仪进行畸变产物耳声发射(DPOAE)常规听力筛查，初筛未通过者在生后42天可至其居住地所在区级妇幼保健院，采用DPOAE结合AABR进行听力复筛，复筛未通过者在出生后3个月内转诊至武汉市妇幼保健院进行免费听力学评估和诊断。

1.3耳聋基因筛查 所有新生儿在出生后3天内采集4个8 mm足底血斑样本制作血片，送耳聋基因检测实验室统一检测。重点分析中国人群常见的3个聋病基因的4个位点：GJB2 (235delC)、SLC26A4 (919-2A>G)和线粒体DNA 12SrRNA(1555A>G、1494C>T)。采用中生北控所提供的四项耳聋基因检测试剂盒，应用实时荧光定量PCR法进行检测。所有筛查阳性病例以及随机抽取的5%耳聋基因突变阴性病例均经试剂盒进行复查质控，同时对所有复诊的基因突变阳性患者进行一代测序复核以验证筛查准确性。

1.4统计学方法 应用SPSS17.0统计软件，对不同耳聋基因突变类型患儿的听力筛查结果进行χ2检验。

2 结果

2.1听力筛查及诊断结果 117 930例新生儿中，5 663例未通过新生儿听力初筛，未通过率4.80%(5 663/117 930)，4 877例进行了听力复筛(86.12%，4 877/5 663)，复筛未通过358例，复筛未通过率7.33%(358/4 887)，344例患儿在3月龄时进行了听力学诊断，最终确诊206例新生儿听力损失(1.75‰，206/117 930)，其中单耳听力损失53例(极重度17例，重度9例，中度及以下27例)；双耳听力损失153例(极重度26例，重度8例，中度及以下119例)，6例经CT检查确诊为双侧大前庭水管综合征。

2.2耳聋基因筛查结果 117 930名新生儿中，共检出耳聋基因突变者3 541例(3.00%)，各基因突变位点分布见表1。检出复合杂合突变34例，其中，GJB2 235delC杂合突变合并SLC26A4 919-2A>G 杂合突变29例，GJB2 235delC杂合突变合并12SrRNA1494C>T突变3例，GJB2 235delC杂合突变合并12SrRNA1555A>G突变1例，SLC26A4 919-2A>G 杂合突变合并12SrRNA1555A>G突变1例。

表1 3 541例新生儿常见耳聋基因突变位点类型及例数分布(例,%)

2.3耳聋基因与听力联合筛查结果 117 930例新生儿中，114 389例通过基因筛查，其中109 036例(92.46%，10 936/117 930)通过了基因与听力联合筛查，5 353例(4.54%，5 353/117 930)基因筛查通过而听力筛查未通过；在3 541例未通过基因筛查新生儿中，3 231例(2.74%，3 231/117 930)听力筛查通过而基因筛查未通过，310例(0.26%，310/117 930)听力筛查与基因筛查均未通过。耳聋基因突变患儿的听力筛查未通过率(8.75%,310/3 541)显著高于耳聋基因筛查通过新生儿(4.68%,5 353/114 389)(χ2=124.76，P<0.001)。GJB2 235delC突变新生儿的听力筛查未通过率为10.99%(242/2 203)，SLC26A4 919-2A>G突变新生儿的听力筛查未通过率为5.21%(59/1 132)，12SrRNA1555A>G突变新生儿听力筛查未通过率为4.37%(9/26)，19例12SrRNA1494C>T纯合突变新生儿全部通过了听力筛查(表2)。

3 讨论

已有的流行病学研究表明，60%耳聋致病因素与遗传相关，其余40%为环境或未知因素[5]。针对中国人群的流行病学调查发现，GJB2、SLC26A4、线粒体DNA 12SrRNA基因突变是导致中国人耳聋最高发的基因，约占30%以上，且均存在高发热点突变[6]。GJB2的235delC位点是中国耳聋人群最为常见的突变，在我国耳聋群体中，GJB2基因突变所占比例可达12.88%，而235delC为该基因最常见的突变形式，约占70%以上[7]。SLC26A4基因突变与大前庭水管综合征密切相关，97.85%的大前庭水管综合征患者存在该突变，中国人群中该基因突变可占耳聋病因的13.73%[8]。线粒体DNA 12SrRNA作为与氨基糖苷类药物性聋密切相关的基因突变，最常见的突变形式为1555A>G突变[9]。本研究结果显示3 541例(3.00%)新生儿存在耳聋基因突变，其中GJB2 235delC(1.86%)、SLC26A4 919-2A>G(0.95%)为本地区热点突变，各位点突变率与既往研究报道相一致[10]。

表2 各耳聋基因不同突变类型患者听力筛查通过与未通过例数分布(例)

新生儿听力与耳聋基因联合筛查可弥补传统听力筛查对迟发型、有药物性聋潜在危险患儿不能早期发现的不足，并提供遗传学信息以利于高危患儿的诊治与随访，联合筛查对聋儿及致聋基因突变携带者的检出率显著高于单纯听力筛查[11]。本研究显示18例致病性耳聋基因纯合突变患儿中，6例通过了听力筛查，对此类患儿进行咨询、指导与定期听力监测，可以有效避免听力损失风险的扩大。对于已出现听力损失的纯合突变患儿，在明确致病原因的情况下，将有利于临床进一步诊断，为人工耳蜗植入等干预提供参考。同时本研究发现206例线粒体DNA 12SrRNA基因突变，这部分新生儿对氨基糖苷类药物极其敏感，若不作基因筛查，此类患儿将面临药物性聋的风险。另外，本研究中，部分基因突变携带者出现了听力损失，说明当前基于有限基因位点的耳聋基因筛查有局限性，应进一步扩大筛查的基因位点以明确诊断，部分携带致病性突变的患儿虽暂未出现听力损失，仍需继续监测与追踪随访。

先天性聋在新生儿期的发病率约为1‰～1.86‰，随着优生优育以及二胎政策带来的遗传咨询需求增加，在新生儿中开展耳聋基因筛查非常必要。截至2017年3月，已有103个非综合症型耳聋基因以及51个综合征型耳聋基因被定位克隆(http://hereditaryhearingloss.org/lastupdate:March13th,2017)，因此，针对新生儿群体的大规模耳聋基因筛查的基因及位点的选取，需要综合考虑卫生经济学和操作的可行性。本研究发现家长对耳聋基因筛查有较大需求，特别是听力筛查未通过或者有耳聋家族史的家庭，希望能够发现病因、咨询和规避后续风险，指导治疗及制定婚育计划等；同时，也有部分家长不理解基因筛查结果，多集中于听力筛查通过而存在基因突变的家庭，其认为筛查方法不准确，或认为遗传无法改变，因而拒绝复查。因此，新生儿听力筛查结果的解释、咨询和随访工作必须由耳鼻喉科、遗传学及伦理学等多方面的专业团队共同承担，争取家长最大程度的理解与配合。需强调的是，要充分利用耳聋基因筛查所提供的遗传信息，也要正确对待基因筛查的局限性；基因与听力联合筛查的核心仍在于对筛查结果的正确解读及听力随访。

1 王智楠，李隽，胡艳玲，等.湖北地区新生儿听力与基因筛查模式的转变与发展[J].中国医学文摘耳鼻咽喉科学,2015，30：208.

2 Mahboubi H,Dwabe S,Fradkin M, et al.Genetics of hearing loss:where are we standing now[J]？European Archives of Oto-Rhino-Laryngology, 2012, 269:1733.

3 杨琨，黄治物.新生儿听力筛查与遗传学的相关性[J].听力学及言语疾病杂志，2007，15：4.

4 Wang QJ,Zhao YL,Rao SQ,et al.Newborn hearing concurrent gene screening can improve care for hearing loss:a study on 14913 Chinese newborns[J]. International Journal of Pediatric Otorhinolaryngology,2011,75:535.

5 Cohen M, PhillipsⅢ JA. Genetic approach to evaluation of hearing loss[J]. Otolaryngol Clin North Am, 2012, 45:25.

6 韩冰,李倩,纵亮,等. 新生儿听力及基因联合筛查临床实践及筛查模式研究[J].中华耳科学杂志，2013，11：380.

7 周怡，刘海红，郝津生，等.15 343例新生儿耳聋基因普遍性筛查结果分析[J].中国听力语言康复科学杂志，2014，12：109.

8 Han SJ,Yang XY,Xhou Y,et al.Deafness gene mutations in newborns in Beijing[J]. Actc Oto-Laryngologica,2016,136:475.

9 Yin A, Liu C, Zhang Y, et al. The carrier rate and mutation spectrum of genes associated with hearing loss in South China hearing female population of childbearing age[J]. BMC Med Genet,2013,14:57.

10 Zhang J, Wang P, Han B, et al. Newborn hearing concurrent genetic screening for hearing impairment a clinical practice in 58 397 neonates in Tianjin, China[J]. Int J Pediatr Otorhinolaryngol, 2013,77:1929.

11 李倩，王秋菊.新生儿聋病易感基因筛查的研究进展[J].听力学及言语疾病杂志， 2015，23：91.