猪流行性腹泻病毒疫苗的研究进展

2018-01-23姜威辽宁省北票市章吉营动物卫生监督所

中国畜牧业 2018年3期

文│姜威（辽宁省北票市章吉营动物卫生监督所）

猪流行性腹泻（PED），主要是由流行性腹泻病毒造成的。具有居高不下的发病率，为接触性传染疾病。引发该病的病毒为猪流行性腹泻病毒（PEDV），具有起病急骤，传染迅速的特点，主要的临床症状包括脱水、腹泻、呕吐等，容易导致较高的病死率，尤其是尚在哺乳期的仔猪，其患病率可达到100%，7日龄以下的仔猪的病死率高达80%～100%。

有相关研究表明，猪流行性腹泻病的暴发到目前为止仍然非常严重，不仅给养殖户带来了巨大的损失，还对养猪业的健康发展造成了重创。为了改善这一状况，近年来，对PEDV的基因组织结构、流行性病学、检测方法等进行探讨已经成为兽医临床上的主要研究热点。

一、猪流行性腹泻病毒的基因组织结构

PEDV的基因组织为RNA（单股正链感染性），属于一种传染性极强的单股正链RNA的病毒（含包膜），在基因组织的5'端和3'端不仅存在非编码的区域，还有Poly（A）尾巴，而其他基因组所包含的开放性阅读框至少有7个，结构蛋白的编码则有4种，分别包括E（小膜蛋白）、N（核衣壳蛋白）、S（纤突蛋白）、M（膜糖蛋白）以及非结构蛋白3个。其中，基因组的排列一般为5'-复制酶-S-ORF3-M-N-3'。

另外，PEDV内的DNA聚合酶主要是由ORF（2个）组成的，且于5'端和2～3的区域对基因组进行覆盖。基因组的结构蛋白主要是N蛋白、S蛋白、M蛋白、E蛋白，它们分子量的大小分别为20～30kDa、150～220kDa、58kDa、7kDa。

二、猪流行性腹泻病的流行病学

有相关研究报道，2013年，台湾暴发了大规模的PED，并在2周内导致大量的仔猪发生感染并死亡，经济损失十分严重；2014年，墨西哥、加拿大以及美国等美洲地区的各大城市都陆续爆发了PED，给人们带来了严重的财产损失。Lin等兽医临床研究人员对毒株进行了分析与研究，结果发现美国流行的毒株和台湾的18个毒株同属于一个进化分支。截至2014年，在美国的30多个州都开始大面积地暴发PED，重创了8200多个养猪场，并造成了不可挽回的损失。

在该病发生9个月后，加拿大那安大略省圭尔夫大学动物卫生实验室首次发现并确诊了PED病例：研究人员采用RT-PCR方法对PEDV N基因进行扩增并与S基因进行比较，结果显示，美国和加拿大毒株具有较高的同源性，为99.8%。之后，研究人员又在猪饲料的血浆蛋白粉（添加剂）中检测到了大量的PEDV，从而怀疑血浆蛋白粉是引发PED的主要原因。为了证实这一猜想，研究人员针对该病毒展开了动物试验，结果表明，3周龄的仔猪都受到了感染，但未表现出显著的症状，因此无法证明加拿大毒株是否和猪饲料中的血浆蛋白粉有联系，故不排除是否由于其他原因导致了加拿大PED的发生流行。

三、猪流行性腹泻病的检测技术及疫苗

由于猪传染性胃肠炎（TGE）的体征症状、流行病学和猪流行性腹泻病的十分相似，因此在诊断时，必须根据实验室的临床检测技术进行诊断，以提高确诊率。其中，较为常见的检测技术包括了胶体金检测技术（GICA）、荧光定量PCR、ELISA方法以及RT-PCR法等。

荧光定量PCR检测技术主要是将荧光基团添加至PCR的反应体系中，并借助荧光信号对PCR的整个变化过程进行实时的监控，最后利用标准曲线定量分析未知模板。该技术不仅有效避免了传统技术无准确定量、PCR容易发生感染、后续的处理步骤繁杂等的不足，还有效增强了灵敏度和特异性，再加上检测速度较快，操作简单、重复性较好、定量标准等优点，使得PCR技术被广泛应用于PEDV的临床诊断中，并取得了显著的检测效果。当前，市场上用于猪流行性腹泻病的疫苗分别是灭活菌及弱毒菌。而国内一般是在CV777的基础上采取PEDV灭活苗进行治疗，防治效果十分明显。