不同病理类型及分级胶质瘤细胞IDH1基因突变临床探究

王 川，高 峰，董 军，王继超，杨小朋⋆

（1.石河子大学医学院，新疆 石河子 832000；2.新疆维吾尔自治区人民医院神经外科，新疆 乌鲁木齐 830000）

胶质瘤是一种颅内常见恶性肿瘤，通常将源自神经上皮的肿瘤统称为胶质瘤。胶质瘤大多呈广泛浸润性生长，边界不明显，难以对其进行彻底清除，具有较高的致死率和致残率，且术后容易复发。随着科学技术的不断进步，对胶质瘤的认识也更加深入，有研究报道，胶质瘤的异柠檬酸脱氢酶1（IDH1）基因存在突变的情况，且IDH1基因突变与胶质瘤形成和进展均具有较大关系，通过对胶质瘤IDH1基因突变情况进行分析，有助于及早发现和诊治胶质瘤，具有非常重要的临床意义[1]。因此，本文对不同病理类型和分级的胶质瘤细胞IDH1基因突变情况进行如下分析：

1 资料与方法

1.1 一般资料

于2016年1月～2017年5月我院收治的胶质瘤患者中选取75例，将其作为本次研究对象，所有患者均符合胶质瘤诊断标准，且术前均未实施化疗、放疗等治疗，排除合并其他部位肿瘤患者。其中男性患者43例，女性患者32例；年龄为21～68岁，平均年龄（41.5±6.3）岁。毛细胞型星形细胞瘤4例，WHO分级I级；弥漫型星形细胞瘤11例，WHO分级Ⅱ级；间变性星形细胞瘤13例，WHO分级Ⅲ级；原发性和继发性多形性胶质母细胞瘤分别为10例和14例，WHO分级Ⅳ级；少突星形细胞瘤5例，少突胶质瘤2例，均为WHO Ⅱ级；间变性少突星形细胞瘤7例，WHO Ⅲ级；6例节细胞胶质瘤，WHO分级Ⅱ级；3例室管膜瘤，WHO Ⅱ级。

1.2 方法

胶质瘤IDH1基因突变应用免疫组化Elivision二步法进行检测，用中性甲醛对胶质瘤标本进行固定，并用石蜡包埋，完成上述处理后进进行薄层切片。对切片实施常规脱蜡、柠檬酸液修复，并利用微波炉高温高压进行抗原修复，然后滴入过氧化物酶液进行阻断。于室温条件下，孵育5分钟并漂洗，然后滴入鼠抗人mIDH1R32H型单克隆抗体，室温孵育半小时后，实施PBS冲洗并加入辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠二抗，孵育半小时后再PBS冲洗，并将显色试剂滴加到切片上，孵育5分钟后用自来水进行冲洗使显色中止，然后应用苏木精复染，实施脱水、封片等处理后，用显微镜对标本进行观察。用缓冲液替代一抗孵育作为阴性对照。

1.3 结果评价

有两名病理医生采用双盲法对标本进行观察，以细胞胞质中存在褐色或棕黄色颗粒作为阳性判断标准，于光镜下随机观察高倍视野8个，并记录4个高倍视野的染色阳性百分率，如果阳性细胞达到10%以上，则判断为IDH1突变阳性。

1.4 统计学处理

2 结 果

2.1 各类胶质瘤细胞的IDH1基因突变情况

经统计发现，75例胶质瘤患者中有33例检出IDH1基因突变，总突变率为44.0%（33/75）。从WHO分级来看，IDH1基因突变以WHO Ⅱ级～Ⅲ级为主。见表1。

2.2 胶质瘤细胞IDH1基因突变与年龄关系

弥漫型星形细胞瘤、继发性多形性胶质母细胞瘤、间变性星形细胞瘤、少突星形细胞瘤和间变性少突星形细胞瘤的突变型年龄与野生型比较，均显著较低，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表1 胶质瘤细胞IDH1基因突变结果分析

表2 突变型和野生型胶质瘤患者年龄比较（±s）

表2 突变型和野生型胶质瘤患者年龄比较（±s）

病理类型 突变型 野生型 t P毛细胞型星形细胞瘤（0/4） — 21.9±4.1 — —弥漫型星形细胞瘤（6/5） 30.9±3.1 41.4±3.8 5.057 0.001*间变性星形细胞瘤（9/4） 31.4±3.5 52.3±5.4 8.469 0.000*原发性多形性胶质母细胞瘤（1/9） 54.2±4.7 55.8±4.9 0.309 0.765继发性多形性胶质母细胞瘤（7/7） 32.6±5.1 49.8±6.2 5.668 0.000*少突星形细胞瘤（4/1） 28.7±2.9 46.2±4.1 5.397 0.013*少突胶质瘤（1/2） 31.1±3.8 31.5±3.9 0.084 0.947间变性少突星形细胞瘤（5/2） 32.5±3.6 45.9±4.7 4.165 0.009*节细胞胶质瘤（0/6） — 35.8±6.2 — —室管膜瘤（0/3） — 37.5±4.8 — —

3 讨 论

胶质瘤在临床具有较高发病率，占颅脑肿瘤的40%-50%，且近年来胶质瘤发病率具有逐年上升趋势。大部分胶质瘤，尤其是高分级的胶质瘤，无明显边界，可成广泛浸润性生长，难以彻底治愈。人类IDH1是由IDH1基因编码翻译而成的蛋白酶，能够催化异柠檬酸氧化脱羧转变为α-酮戊二酸，在细胞能量代谢中发挥着重要作用。随着研究的不断深入，越来越多的研究证实，IDH1基因突变与胶质瘤的发生、发展有着重要关系[2]。

为了解不同病理类型和分级胶质瘤患者的IDH1基因突变情况，本文选取了75例患者进行研究，结果显示有33例检出IDH1基因突变，总突变率为44.0%，说明IDH1基因突变在胶质瘤患者中较为常见。其中少突星形细胞瘤的突变率达到了80.0%，间变性星形细胞瘤和间变性少突星形细胞瘤突变率也达到了69.2%和71.4%，弥漫型星形细胞瘤突变率为54.6%，与临床真实数据基本一致[3]，说明IDH1基因突变在这些病理类型胶质瘤发生、发展过程中发挥了重要作用。本文研究结果显示，IDH1基因突变主要为WHO Ⅱ级和Ⅲ级，基因突变型患者的年龄与野生型比较显著较小，与相关研究成果一致[4]，说明分级为Ⅱ级和Ⅲ级的胶质瘤更容易出现IDH1基因突变，胶质瘤IDH1基因突变与年龄有相关性，年龄越小发生IDH1基因突变的风险越大。

总而言之，胶质瘤患者中IDH1基因突变较为常见，尤其是WHO分级为Ⅱ级～Ⅲ级、年龄较小的患者，IDH1基因突变在其病情发生发展中均具有重要作用。

[1] 王继超.胶质瘤IDH1基因突变与胶质瘤干细胞相关基因表达的相关性研究[J].中华神经医学杂志,2012,11(4):372-375.

[2] 王国良.不同病理类型和级别胶质瘤细胞IDH1基因突变情况分析[J].中国微侵袭神经外科杂志,2014,19(8):364-367.

[3] 杨燕武.IDH1基因突变对胶质瘤诊断及预后意义[J].中国现代神经疾病杂志,2012,12(6):712-718.

[4] 汤俊佳.人脑幕上WHOⅡ级胶质瘤IDH1基因突变与临床病理特征的关系[J].四川大学学报(医学版),2013,44(1):60-63.