忧遁草的化学成分研究

冷 鹏，黄蓉丽，宋小平*，韩长日，郑彩娟

(1. 海南师范大学 热带药用植物化学教育部重点实验室，海南海口 570203；2. 海南科技职业学院，海南海口571126)

忧遁草是爵床科鳄嘴花属植物，又名沙巴蛇草.在我国民间和东南亚地区多用于治疗蛇虫叮咬.在我国主要产于广东、广西、云南等地，忧遁草全株无毒，蛋白质含量较高，是一种理想的蔬菜[1].现代药理活性研究表明,忧遁草石油醚及乙酸乙酯提取物对疱疹及带状疱疹病毒均有良好的疗效[2].忧遁草化学成分种类丰富，结构类型包括三萜类、黄酮类、含硫化合物、植物甾醇类、脱镁叶绿素类、脑苷类、氨基酸、微量元素、生物碱以及多种小分子化合物等[3].为寻找忧遁草中的活性化学成分，笔者对忧遁草95%乙醇提取物的化学成分展开研究，分离得到 9 个化合物，并通过核磁共振谱图和与文献数据对照确定为：黑麦草内酯 (1)，异黑麦草内酯 (2)， 3-羟基-9甲氧基紫檀烷 (3)，蚱蜢酮 (4)， (-) evofolin B (5)， 3-羟基-1-(4-羟基-3, 5-二甲氧基苯) -1-丙酮(6)， 吲唑 (7)，吲哚-3-甲醛 (8)，entadamide A (9)(图 1).其中化合物 3 - 6，9为首次从忧遁草中分离得到.

图1 化合物 1-9 结构

1 仪器与材料

1.1 仪器

核磁共振仪 (Bruker AV-400MHz，瑞士Bruker公司)；HPLC液相色谱 (安捷伦公司，USA)；AOTOPOL V型旋光仪 (鲁道夫公司，USA).

1.2 试剂

LH-20葡聚糖凝胶 (Amersham Biosciences公司)；C-18反相硅胶 (Merck公司)；柱色谱硅胶 (100-200目，200-300目，青岛海洋化工厂)；薄层析色谱硅胶 (GF254，青岛海洋化工厂)；所有有机溶剂来自广东西陇化学试剂厂.

1.3 材料

忧遁草新鲜枝叶共65 kg，于2016年4月采集自海南省五指山忧遁草种植区.

2 提取与分离

干忧遁草 (17.5 Kg)，用95%的乙醇 (60 L)渗透提取，浓缩后用水 (5 L)分散，分别使用石油醚 (60 ～ 90 ℃)，乙酸乙酯萃取获得石油醚浸膏 (137 g)，乙酸乙酯浸膏 (29 g).取乙酸乙酯浸膏采用石油醚与乙酸乙酯(100∶0-0∶100)及乙酸乙酯与甲醇 (100∶0-80∶20)梯度洗脱得5个组分 (Fr.1 - Fr.5).经TLC检测后对 Fr.2 进行反复硅胶层析和半制备HPLC分离[4]获得化合物 1 (25 mg)、化合物2 (9 mg)、化合物3 (24 mg)、化合物4 (19 mg)、化合物5 (14 mg)、化合物 6 (12 mg), 对 Fr.5 分离获得化合物 10 (4.2 mg). 对石油醚浸膏用石油醚与乙酸乙酯(100∶0 - 00∶100)及乙酸乙酯与甲醇 (100∶0-80∶20)梯度洗脱得 5 个组分 (Fr.1 - Fr.5).将 Fr.3采用100～200目硅胶洗脱和C-18反相柱反复洗脱并用半制备 HPLC 分离，化合物 7 (27 mg), 化合物 8 (11 mg)，化合物 9 (19 mg).

3 化合物结构鉴定

化合物 1：淡黄色油状物，分子式为C11H16O3，溶于丙酮.1H-NMR (400 MHz, CD3COCD3):δ5.63 (1H, s, H-7), 4.24 (1H, m, H-3), 4.13 (1H, br s, 3-OH), 2.34 (1H, dt,J= 2.0, 12.0 Hz,H-4b), 1.96 (1H, dt,J= 2.0, 12.0 Hz, H-2b), 1.65 (3H, s, H-11), 1.64 (1H, dd,J= 4.0, 12.0 Hz, H-4a), 1.49 (1H, dd,J= 4.0, 14.0 Hz, H-2a), 1.47 (3H, s, H-10), 1.21 (3H, s, H-9).13C-NMR (100Hz, CD3COCD3):δ36.6 (C-1), 47.9 (C-2), 66.8 (C-3), 46.4 (C-4), 87.0 (C-5), 183.4 (C-6), 113.3 (C-7), 171.6 (C-8), 30.5 (C-9), 26.9 (C-10), 27.5 (C-11). 以上数据与文献[5]数据报道一致，鉴定为黑麦草内酯.

化合物 2：淡黄色油状物，分子式为C11H16O3，溶于氯仿.1H-NMR (400 MHz, CDCl3):δ5.63 (1H, s, H-7), 4.13 (1H, tt,J= 12.0, 4.0Hz, H-3), 2.34 (1H, dt,J= 2.0, 12.0Hz, H-4b), 1.96 (1H, dt,J= 2.0, 12.0Hz, H-2b), 1.65 (3H, s, H-11), 1.64 (1H, dd,J= 4.0, 12.0Hz, H-4a), 1.49 (1H, dd,J= 4.0, 14.0, H-2a), 1.47 (3H, s, H-10), 1.21 (3H, s, H-9).13C-NMR (100Hz, CDCl3):δ36.6 (C-1), 47.9 (C-2), 66.8 (C-3), 46.4 (C-4), 87.0 (C-5), 183.4 (C-6), 113.3 (C-7), 171.6 (C-8), 30.5 (C-9), 26.9 (C-10), 27.5 (C-11). 以上数据与文献[6]报道一致，鉴定为异黑麦草内酯.

化合物 3：白色针状晶体，分子式为C16H14O4，溶于丙酮.1H-NMR (400 MHz, CD3COCD3): δ 7.32 (1H, d,J= 8.0Hz, H-1), 7.21 (1H, d,J= 8.0Hz, H-7), 6.55 (1H, dd,J= 2.0, 8.0Hz, H-2), 6.43 (1H, dd,J= 2.0, 8.0Hz, H-8), 6.36 (1H, d,J= 2.0Hz, H-10), 6.35 (1H, d,J= 2.0Hz, H-4), 5.51 (1H, d,J= 6.0Hz, H-11a), 4.26 (1H, dd,J= 8.0, 16.0 Hz, H-6a), 3.74 (3H, s, -OMe), 3.60 (2H, m, H-6). 13C-NMR (100Hz, CD3COCD3):δ133.0 (C-1), 110.5 (C-2), 159.7 (C-3), 103.9 (C-4), 157.7 (C-4a), 67.1 (C-6), 40.4 (C-6a), 120.4 (C-6b), 125.8 (C-7), 97.2 (C-8), 162.1 (C-9), 106.9 (C-10), 161.8 (C-10a), 79.4 (C-11a), 112.8 (C-11b), 55.7 (-OMe). 以上数据与文献[7]报道一致，鉴定为3-羟基-9-甲氧基紫檀烷.

化合物 4：白色粉末，分子式为C13H20O3，溶于甲醇.1H-NMR (400 MHz, CD3OD):δ5.86 (1H, s, H-8), 4.24 (1H, m, H-3), 2.22 (12H, s, -OMe), 2.04 (1H, s, H-4a), 1.95 (1H, ddd,J= 12.0, 4.0, 2.0Hz, H-2a), 1.41 (1H, s, H-2b), 1.31 (1H, m, H-4b).13C-NMR (100Hz, CD3OD):δ36.9 (C-1), 49.8 (C-2), 64.4 (C-3), 49.7 (C-4), 72.4 (C-5), 119.9 (C-6), 200.9 (C-7), 101.1 (C-8), 211.5 (C-9), 32.2 (C-10), 26.5 (C-11), 29.3 (C-12), 30.7 (C-13). 以上数据与文献[8]报道一致，鉴定为蚱蜢酮.

化合物 5：淡黄色粉末，分子式为C17H18O6，溶于甲醇.1H-NMR (400 MHz, CD3OD):δ7.61 (1H, dd,J= 8.0, 2.0Hz, H-4′), 7.56 (1H, d,J= 2.0Hz, H-6″), 6.89 (1H, d,J= 2.0Hz, H-2′), 6.77 (1H, d,J= 8.0Hz, H-3′), 6.75 (1H, dd,J= 8.0, 2.0Hz, H-6′), 6.73 (1H, d,J= 8.0Hz, H-5′), 4.61 (1H, dd,J= 8.0, 6.0Hz, H-2), 4.24 (1H, dd,J= 10.0, 8.0Hz, Hb-1), 3.86 (3H, s, 5″-OMe), 3.82 (3H, s, 3′-OMe), 3.70 (1H, dd,J= 10.0, 6.0Hz, Ha-1). 13C-NMR (100Hz, CD3OD):δ65.5 (C-1), 56.4 (C-2), 199.7 (C-3), 129.9 (C-1′), 112.8 (C-2′), 149.3 (C-3′), 147.0 (C-4′), 116.6 (C-5′), 122.2 (C-6′), 130.4 (C-1″), 153.1 (C-2″), 115.7 (C-3″), 125.1 (C-4″), 148.9 (C-5″), 112.6 (C-6″), 56.4 (3′-OMe), 56.3 (5′-OMe) . 以上数据与文献[9]报道一致，鉴定为(-)evofolin B.

化合物 6：无色油状物，分子式为C11H14O5，溶于甲醇.1H-NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.32 (2H, s, H-2, 6), 3.93 (2H, t,J= 6.0Hz, H-9), 3.90 (6H, s, -OMe), 3.19 (2H, t,J= 6.0Hz, H-8).13C-NMR (100Hz, CD3OD):δ107.2 (C-2, 6), 149.0 (C-3, 5), 199.7 (C-7), 58.9 (C-8), 41.6 (C-9), 56.8 (-OMe). 以上数据与文献[10]报道一致，鉴定为3-羟基-1-(4-羟基-3, 5-二甲氧基苯)-1-丙酮.

化合物7：白色粉末，分子式为C7H6N2，溶于氯仿.1H-NMR (400 MHz, CDCl3):δ8.08 (1H, dd,J= 2.0, 6.0 Hz, H-4), 7.93 (1H, s, H-3), 7.43 (1H, dd,J= 2.0, 6.0Hz, H-7), 7.19 (1H, m, H-6), 7.16 (1H, m, H-5). 13C-NMR (100Hz, CDCl3):δ133.2 (C-3), 122.2 (C-4), 122.0 (C-5), 127.6 (C-6), 112.8 (C-7), 138.1 (C-8), 123.4 (C-9). 以上数据与文献[11]报道一致，鉴定为吲唑.

化合物 8：白色粉末，分子式为C9H7NO，溶于氯仿.1H-NMR (400 MHz, CDCl3):δ10.02 (1H, s, H-9), 8.22 (1H, d,J= 8.0Hz, H-4), 8.20 (1H, d,J= 8.0Hz, H-7), 7.54 (1H, d,J= 2.0Hz, H-1), 7.25 (1H, t,J= 8.0Hz, H-6), 7.20 (1H, t,J= 8.0, H-5). 13C-NMR (100Hz, CDCl3): δ 137.1 (C-1), 119.1 (C-2), 124.6 (C-3), 122.2 (C-4), 123.6 (C-5), 124.6 (C-6), 112.0 (C-7), 137.1 (C-8), 185.5 (C-9). 以上数据与文献[12]报道一致，鉴定为吲哚-3-甲醛.

化合物 9：白色晶体，分子式为C6H11NO2S，溶于甲醇.1H-NMR (400 MHz, CD3OD):δ7.56 (1H, d,J= 16.0Hz, H-6), 5.85 (1H, d,J= 16.0Hz, H-5), 3.62 (2H, t,J= 6.0Hz, H-1), 3.38 (2H, m, H-2), 2.35 (3H, s, S-CH3).13C-NMR (100Hz, CD3OD):δ61.7 (C-1), 42.9 (C-2), 167.6 (C-4), 116.6 (C-5), 143.6 (C-6), 14.3 (S-CH3). 以上数据与文献报道一致[13]鉴定化合物为 entadamide A.

4 结论

对忧遁草的石油醚和乙酸乙酯浸膏进行了化学成分研究，从中分离得到 9 个化合物，分别鉴定为黑麦草内酯 (1)，异黑麦草内酯 (2)，3-羟基-9甲氧基紫檀烷 (3)，蚱蜢酮 (4)，(-)evofolin B (5)，3-羟基-1-(4-羟基-3, 5-二甲氧基苯)-1-丙酮 (6)，吲唑 (7)，吲哚-3-甲醛 (8)，entadamide A (9).其中化合物 3-6，9 为首次从忧遁草中分离得到.

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