59例急性白血病免疫分型分析

陈 瑶

（无锡市第二人民医院检验科，江苏 无锡 214002）

传统白血病分型都是以形态学为依据的，随着免疫学和流式细胞术的发展，对急性白血病患者进行免疫分型可以辨别白血病细胞的来源和所处阶段[1]。本研究采用流式细胞术对我院59例急性白血病患者的骨髓标本进行免疫分型，现将研究结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料

2014年1月至2017年7月在我院住院的59例急性白血病患者，年龄3～91岁，其中成人56例（男30例，女26例），儿童3例（男1例，女2例）。所有患者均按照FAB分型标准进行形态学分类。所有白血病患者均抽取肝素抗凝骨髓1～2 mL。

1.2 方法

取试管加入抗凝骨髓100 μL、三色荧光直接标记的抗体及同型对照各20 μL，室温避光孵育20 min，再加入溶血剂1 mL混匀，避光放置10 min后加入PBS洗涤，以1500 rpm/min离心5 min后弃去上清液。

1.3 流式细胞术分析

贝克曼FC500-MC2型流式细胞仪检测，采用CD45/SSC设门法，488 nm激发光源。CD34≥10%为阳性，CD7≥30%为阳性，其他标志物≥20%为阳性。

2 结 果

2.1 59例急性白血病患者免疫分型结果

40例AML患者阳性表达率为CD13＞CD33＞CD64＞CD117＞CD14，均表达1种及以上髓系抗原。40例中有10例（25.0%）伴淋系抗原表达，最常见为CD7和CD19。在15例ALL患者中有3例（20.0%）伴髓系抗原表达，常见为CD13和CD33。1例HAL患者均表达髓系、T系和B系抗原。见表1。

表1 59例急性白血病患者免疫分型结果

续表

2.2 淋系各相关抗原的敏感性与特异性分析结果，见表2

表2 淋系抗原的敏感性与特异性分析结果

3 讨 论

目前，对于急性髓细胞白血病的主要诊断方法为骨髓细胞形态学和细胞化学染色技术，这也是对该病进行诊断的基础。而在大量的实践研究中得出，对于未分化的白血病及一些形态学不典型的白血病在诊断时仍具有一定的局限性，存在一定的缺陷。单克隆技术在医学领域逐渐发展并得到了广泛的应用，免疫学分型在急性白血病的诊断中逐渐普遍应用[2-3]，大大提高了疾病诊断准确率，具有一定的客观性及重复性。有相关的调查研究结果显示[4-5]，细胞过氧化物酶染色在3%以下的急性髓细胞白血病细胞形态学诊断与免疫细胞化学诊断符合率仅在53%左右。该类白血病细胞表现出的细胞形态十分复杂[6]，因此，需要采用免疫分型才能进行确诊，从而提高诊断准确率，对于疾病的及时有效治疗有积极意义[7-8]。

利用单克隆抗体检测白血病细胞表面不同时相出现抗原的表达情况即为流式细胞术免疫分型，用以了解被测细胞的来源及分化程度，从而对白血病进行分类。

本研究发现40例AML患者最常见的抗原表达是CD13（87.5%）、CD33（70.0%）。CD13可表达于髓系祖细胞及成熟粒细胞上，而作为髓前体细胞标记的CD33在粒细胞和单核细胞中有较高表达。本研究显示在40例AML中，CD117除在M0中100%表达，M1、M2中部分表达外，其它各亚型均无表达，说明CD117是干/祖髓细胞的标志，可作为判断M0的指标之一。同时CD117在ALL中不表达，提示CD117是髓系比较特异性的标记，与文献报道一致[9]。

在40例AML患者中有6例表达淋系抗原CD7（占15.0%），与国外文献报道CD7与髓系有15%的交叉反应一致，并指出CD7表达阳性多见于M2和M5，表达率越高，对化疗越不敏感，预后越差。

ALL是一组高度异质性的疾病，流式细胞术免疫分型可以根据白血病细胞的特征性抗原将ALL分为B-ALL、T-ALL及其各种亚型。本实验15例ALL中，11例（73.3%）为B-ALL，4例（26.7%）为T-ALL，B-ALL占大多数，同已有报道一致[10]。

11例B-ALL中CD19和CD10阳性率高，分别为81.8%和54.5%，因此对于B-ALL来说，CD19和CD10最具有诊断价值。

本研究还收集了一例罕见的急性混合性白血病，回顾该病例，发现形态学检查主观意识强，灵敏度低，容易误诊。因此当遇到形态学难以鉴别的细胞时，只有靠免疫分型来确诊。

现已公认M0、M6、M7可通过免疫分型确诊，而M1-M5 缺乏特异性单抗，其诊断仍需结合形态学、遗传学和分子生物学来综合考虑，对于这一点我们要高度重视。

随着对白细胞分化抗原研究的日益深入和免疫学单克隆抗体技术的不断发展，利用流式细胞术免疫分型可以全面、客观、精准地对急性白血病进行分型、诊断，并对临床治疗和预后分析具有重要意义。

[1] 师钟睿,朱 杰.急性白血病免疫分型的临床应用[J].中华血液学杂志,2008,17(8):6-8.

[2] 杜秀敏,陈英剑,胡成进.59例急性白血病形态学分型与免疫分型结果对比分析[J].国际检验医学杂志,2012,33(17):2162-2163.

[3] 严 红,赵海军,潘 明.59例成人急性白血病流式细胞仪免疫表型结果分析[J].临床医药实践,2013,22(5):363-365.

[4] 杨川艺,倪 萍,涂文瑞.流式细胞术在我院急性白血病免疫分型中的应用[J].标记免疫分析与临床,2013,20(6):414-417.

[5] 程 松,郭婧澜,魏 兰,赵 华.急性淋巴细胞白血病24例形态学与免疫学分型分析[J].临床合理用药杂志,2014,7(5):19-20.

[6] 栗 莉.急性淋巴细胞白血病形态学与免疫学分型的相关研究[J].中国保健营养,2016,26(24):60-60.

[7] 杨 涛,熊 峰.急性淋巴细胞白血病MICM分型分析[J].卫生职业教育,2012,30(4):155-156.

[8] 李珊凤,易汉杰,金明威,等.多参数流式细胞术检测91例急性白血病免疫表型分析[J].现代实用医学,2014,26(7):907-908.

[9] 黄正刚,陈启文,吴星恒,等.67例儿童急性白血病流式细胞术免疫分型的研究[J].实用临床医学,2008,9(5):87-90.

[10] 王 莹,孙立荣.儿童急性白血病免疫分型及其临床意义[J].齐鲁医学杂志,2008,23(3):210-212.