景德镇市3例人感染H7N9禽流感外环境监测数据分析

涂智杰，胡芹

本流感网络实验室从2016年12月29日到2017年1月9日共发现3例人感染H7N9病例，3位感染者都为男性，分别为63岁，53岁和3岁。根据流行病学调查，发现三位感染者均有活禽暴露史。为了防止更多人感染H7N9病例的出现，对三位感染者的外环境进行采样，送至实验室检测并进行数据分析，实验数据报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料 根据《人感染H7N9禽流感疫情防控方案》（第3版）[1]对病例可能暴露的禽类饲养或交易等场所，采集禽类粪便、笼具涂拭标本等环境标本共37例，涉及7个活禽交易菜市场的29例标本，4个家庭散养的8例标本。

1.2 方法 由人感染H7N9禽流感的患者所在地的区疾控专业人员进行外环境标本采集。采集外环境标本的病毒管购置友康恒业生物科技（北京）有限公司。采集外环境标本时用随管配备的医用棉拭子涂抹笼具表面、粪便、宰杀或摆放肉案板表面及其他（如饲料盒或宰杀盆）和收集禽类饮水。采样后立即将棉签放入装有3ml保存液的采样管中，保存在4℃条件下24h内送至景德镇市疾病预防控制中心国家流感网络实验室检测。仪器为ABI7300实时荧光PCR仪；RNA提取采用江苏硕世生物科技有限公司全自动核酸提取仪 （SSNP-2000A）提取；核酸检测采用甲型流感通用、禽流感H5亚型、H7亚型和H9亚型4种单通道病毒核酸检测试剂盒（江苏硕世生物科技有限公司），具体聚合酶链反应体系、反应参数及实验操作参照试剂盒说明书。

2 结果

2.1 活禽交易市场检测结果 共采集7个活禽交易市场的29例环境标本，检测阳性数27例。涵盖5种标本类型，其中笼具表面标本9例，阳性数8例分别为H5+H7亚型混合型1例、H7+H9亚型混合型4例、H5+H7+H9亚型三种混合型3例；粪便标本9例，阳性数9例分别为H5亚型1例、H7亚型1例、H5+H7亚型混合型2例、H7+H9亚型混合型3例、H5+H7+H9亚型三种混合型2例；禽类饮水标本2例，阳性数2例分别为H5+H7亚型混合型1例、H5+H7+H9三种混合型1例；宰杀案板表面标本4例，阳性数3例分别为H5+H7+H9亚型三种混合型3例；其他（饲料盒/宰杀水）标本5例，阳性数5例分别为H5亚型1例、H7亚型1例、H5+H7亚型混合型1例、H5+H7+H9亚型三种混合型2例。见表1、图1。

2.2 家庭散养禽类检测结果 共采集4个家庭散养禽类标本共8例，阳性数6例。涵盖3种标本类型，其中笼具表面标本2例，阳性数1例为H7+H9亚型混合型；粪便标本4例，阳性数3例分别为H7亚型1例、H7+H9亚型混合型1例和1例未分型；其他（饲料盒）标本2例，阳性数2例分别为H7亚型1例、H9亚型1例。见表2、图2。

表1 活禽交易市场采集标本检测情况

表2 家庭散养禽类采集标本检测情况

图1 活禽交易市场采集样品检测情况

3 讨论

此次外环境标本采集共有37例，其中只有4例标本检测结果为阴性，分别为2例为笼具、1例鸟粪（庭院内）和1例宰杀盆标本。分析此4例标本检测结果阴性，可能与采集位置有关，并不能完全排除4例标本不含有禽流感病毒。7个活禽交易市场的标本共采集29例标本，其中27例甲型阳性，而H7亚型阳性就占了25例，呈现出单独H7亚型或是H5+H7混合型和H5+H7+H9混合型出现，具有较高的流感基因重配风险；2例单独H5亚型标本。提示7个活禽交易市场是感染H7N9的高危因素，需要休市或是或关闭活禽市场。4个家庭散养禽类标本共采集8例，其中6例甲型阳性，而H7亚型阳性就占了4例，呈现单独H7亚型或是H7+H9混合型出现，具有流感基因重配风险；1例H9亚型和一份未分型。提示家庭散养禽类也是感染H7N9的高危因素，建议对散养禽类进行扑杀，降低感染风险。

图2 家庭散养禽类采集标本检测情况

本实验室检出的人感染H7N9禽流感病例与文献中报道的情况一致，确诊病例以男性病例和中老年病例为主[2]。目前人感染H7N9禽流感主要通过禽类接触引起，相关资料不支持存在人与人之间接触传播，主要以散发为主[3-11]。H7N9感染人群具有特别的型别、年龄分布流行病学特征。然而H7N9禽流感病毒在禽类动物尤其是家禽中无明显致病性，而且此次检测的家禽携带多种亚型禽流感病毒，病毒内部的高频率基因突变，以及抗药性毒株的出现等[12-15]，表明该禽病毒进一步扩散引发人间大流行的风险很大。因此，常年监测活禽交易市场和家庭散养禽类携带禽流感病毒相关数据，建立可靠的风险评估和预防控制措施很有必要。