兽药多残留样品前处理技术研究情况

张凤凤

（陕西省西安市未央区动物疾病预防中心 710016）

现代畜牧业和水产养殖业几乎都离不开兽药，因为合理使用兽药能够减少动物的发病率和死亡率，促进动物生长从而提高经济效益。但也有一些养殖户为了追求更高的经济效益，肆意滥用、超量使用兽药，造成兽药在动物体能残留过量，给消费者带来危害。因此，兽药残留分析方法显得尤为重要，当前兽药残留分析方法包含样品前处理和测定方法两部分。本文将介绍兽药多残留样品前处理技术，对现阶段已有动物样本前处理技术进行研究和推广，针对不同样本具有的特点对样本前处理技术进行选择，以期能实现检测数据的准确性。

1 沉淀蛋白技术

沉淀蛋白技术作为一种动物样品前处理的方法，其作用机理是通过对蛋白质进行沉淀，释放动物样品中的存在的药物成分，然后对动物样品中存在的药物成分进行监测，获得准确的数据，评估动物样品中的药物残留情况。通过对蛋白质的沉淀去除可有效的防止提取过程中的发泡情况，这不仅可以降低样品发生乳化几率，同时还可以有效的保护仪器，延长仪器使用时间。作为兽药残留浓度监测的第一步，动物身体部位的不同也会导致同一种兽药的残留含量不同。如在取动物内脏后首先清除组织残留的血液，然后加入适量生理盐水，研磨以后离心，沉淀后吸取适量上清液进行检测。通常情况下使用有机溶剂对获得的蛋白质进行溶解，但如果存在水溶性蛋白质可以用酸类使蛋白质沉淀，过滤获得蛋白。在所有有机溶剂中，乙腈是最好的一种溶剂，使用乙腈可有效的提高组分分离度，获得较好的分离峰。如果使用高氯酸进行分离，则沉淀蛋白最好不要直接使用色谱柱进行分析，应在调整合适酸碱度的情况下用渗透膜进行过滤。这样的操作可以避免因酸液的酸性太强损坏色谱柱。与其他样品前处理技术相比，蛋白沉淀技术操作相对方便，但存在准确度和灵敏度较低的缺点。

2 液-液提取技术

液-液提取技术作为兽药残留检测过程中对样品进行前处理较为多用的一种技术在现阶段也得到大范围的推广。这种技术主要包括液相萃取技术、多次提取技术及离子对提取技术。液相萃取技术同传统萃取技术相似，是通过对与样品不相同的溶解度选择，利用待测组分在不同溶剂中溶解度不同，对待测组分进行提取。对于现阶段，大部分兽药主要属于脂溶性兽药，在对生物样品进行前处理过程中，其他物质大多数属于水溶性的。因此，可以利用液相萃取技术对杂质进行分离，实现待测组分的纯化。如对可能含有较高兽药残留的样本，如动物血液、皮毛、肌肉等进行处理。在进行实际操作过程中，检验人员可以根据相似相容原则，选取合适的溶剂如乙醚、乙醇等进行，在进行溶剂选择时要注意选取的溶剂纯度要达到分析纯以上，这样可以降低溶剂中存在的水分对分离造成的影响。此外，选取的溶剂在熔沸点、挥发性等特性方面也有较高的要求，这有利于降低对紫外检测造成的影响。同时，为了保证实验过程中的安全性，选取的溶剂应具有较高的化学稳定性。可以根据待测组分的极性对溶剂进行选择，但在所有有机溶剂中尽量避免使用氯仿作为溶剂。不过液-液提取技术也存在一定的缺陷，就是需要较长的操作时间，且消除基质干扰得到的效果并不明显，还需要用到较多的有机溶剂，而这些有机溶剂对人体和环境是有害的。

3 固相萃取技术

固相萃取技术是现阶段应用最为广泛的生物样品处理技术，相对于液-液提取技术更为常用。其在原理上同高效液相色谱、气相色谱的原理基本一致，同样是通过相似相容原理对待测物质进行提取。经过几十年的发展，固相萃取技术已较为成熟。现阶段固相萃取技术主要通过4步完成对待测物质的萃取工作。首先，选择合适的固相萃取柱，其口径等都需要满足实验要求。然后进行萃取柱的填装，填料粒度等同样需要进行选择，接着将样品通过萃取柱，实现对测量样本的分离工作。虽然固相萃取技术具有较好的优点，但由于其不能使用高压进行萃取，因此消耗时间较多。如果基质比较复杂的情况下，则会存在低回收率且容易造成填料堵塞等问题。

4 总结

通过对当前使用最多的几种动物样品前处理技术分析可以发现，不同动物样本具有不同的特点。要实现通过这些样本的检测获得较为准确兽药残留量检测必须选择合适的样品前处理技术。因此，必须加强对现有样品前处理技术的学习，同时注意对新的处理技术进行研发。如此才能通过先进的、准确的兽药多残留样品前处理技术获得动物产品的兽药残留情况，从而服务于动物产品的市场准入，使食品安全问题得到有效解决，使消费者身体健康得到进一步的保障。