速测仪在蔬菜农药残留检测中的应用

赵有绩

（青岛莱西市店埠镇农业与科技服务中心，山东莱西266607）

目前，我国的农产品农药残留污染问题普遍存在，已成为影响水果和蔬菜安全的主要危害因素。对市场蔬菜农药残留进行检测，有利于控制蔬菜的安全性，确保人们能够吃到安全放心的蔬菜。一般而言，蔬菜农药残留常规检测方法需要较长的时间，而运用农药残留快速检测技术则可以在较短时间内得到检测结果。这就为加强农业生产中蔬菜农药残留的检测，对蔬菜的安全性监管，保障人民群众的饮食安全，推动农业生产绿色高效发展具有重要意义。可见，要全面保证上市蔬菜的安全就必需要通过快速检测方法，检测、分析蔬菜中的农药残留情况，对蔬菜的安全性进行监管，本文阐述了速测仪法的检测原理、检测步骤及使用时的注意事项。

1 速测仪原理及使用方法

1.1 检测原理

农药残留速测仪是根据国标GB/T 5009.199-2003采用酶抑制原理和光电比色法原理研制而成的一种快速检测仪器，是通过乙酰胆碱酶受到抑制的程度，判断蔬菜中有机磷、氨基甲酸酯类农药的残留情况。蔬菜中常见的有机磷、氨基甲酸酯类农药对昆虫的中枢起到一定的抑制作用，当昆虫的神经系统中存在乙酰胆碱酶时，其活性会受到这两类农药的影响，从而使乙酰胆碱不能正常的传导，导致昆虫中毒死亡。所以，当蔬菜中不含有这些类别的农药时，乙酰胆碱酶的活性不会受到抑制。在试验过程中添加的底物会被乙酰胆碱酶水解得到相应的产物，与显色剂反应显现出特定的颜色。当蔬菜中含有这些类别的农药时，底物就不会被水解，不会产生显色反应。然后，利用分光光度计，在412 nm处对吸光值随时间的变化值进行测定，可以得到相应的抑制率，从而判断出蔬菜中的农药残留情况。当抑制率低于50%时，说明蔬菜中的农药残留含量超标，当抑制率低于50%时，说明蔬菜中农药残留含量在标准范围内。

1.2 检测步骤

首先，做好检测前的准备工作。先提取缓冲溶液，用1000 mL蒸馏水将每个小袋中的缓冲溶液进行溶解。准备乙酰胆碱酶，用10 mL的缓冲溶液溶解将乙酰胆碱酶溶解，并储存在0～5℃的环境中。准备碘化乙酰硫代胆碱作为底物，利用10 mL的蒸馏水将其溶解，在相同的温度下储存。准备二硝基苯甲酸作为显色剂，用10 mL的缓冲溶液将其溶解，同样储存在0～5℃的环境中。

其次，处理空白样。取一个平底的小试管，在其中加入50 μL的酶、3 mL的缓冲溶液和50 μL的显色剂。在常温下放置15 min后，再向试管中加入50 μL底物，然后将试管中的溶液倒入比色皿中，再放进仪器比色池中，按下“空白”键，经过3 min，可以测得空白吸光度值。

再次，处理样品。选取2～2.5 kg的蔬菜，将其分成3份，分别用于备案、复检、检测。选取表面比较干净的2 g叶菜、4 g非叶菜，以及1片果菜。然后，将所选择的蔬菜，切成小丁，放在小玻璃瓶中，向其中加入20 mL缓冲溶液，连续震荡1～2 min后，将上清液倒入大试管中，放置3～5 min。向平底小试管中加入 50 μL 的酶、50 μL 的显色剂和3 mL的样本提取液，在常温环境下放置15 min。向待测的平底小试管中加入50 μL底物，分别倒进比色皿中，再将其放入仪器比色池中，按下“样品”键。等待3 min，可测得样品吸光度值和样品抑制率。

最后，分析检测结果，检测结果用抑制率来表示的。

2 注意事项

2.1 检查检测仪器

在对样品进行检测前，要仔细的检查仪器，检查内容如下：第一，仪器的光源是否正常；第二，在仪器中是否有遗留的样品比色皿存在；第三，仪器是否能正常工作。在使用仪器的时候，要先开机预热10 min，预热直接按下空白键或者样品键，过3 min后观察结果，然后再进行空白对照检测和样本检测。

2.2 试剂的保存和使用

在试验过程中，酶试剂是最重要的，酶的活性影响测试结果决定着试验是否能成功。为确保检测的准确性，必须要做好试剂的保存工作。所以，显色剂、酶试剂等，都要放置在0～5℃的环境中。配置好的酶液、底物等，要在1周内用完，显色剂要在1个月内用完，溶液的反复解冻次数不能超过2次，缓冲溶液可在常温下保存。检测室的温度最好控制在20～30℃，经过改进后的酶，不需要放在37～38℃的保温箱中培养，室温培养即可。在22℃时，需要培养20 min，25℃以上时需要培养15 min。当室温低于20℃时，就需要将其放在37～38℃的保温箱中培养。

2.3 取样的正确性

在取样时，要将抽样工具和需要的容器清洁干净，不能存在异味，否则会污染样品，将样品准备好等待检测。选择均匀、可食用、具有代表性的部位取样。在选取果菜类样品时，要利用取样器或者小刀，沿着果菜的表面，取1 cm厚的样本。菠菜、甘蓝等蔬菜的叶绿素含量比较高，在提取样本时，可将整株蔬菜进行浸提，以免样本受到色素的干扰。茄子在切开后容易氧化，浸提时可直接用整个茄子或者切下一大块，以免样本被干扰。韭菜、香菜等蔬菜产生次生代谢产物，会产生假阳性。所以，在提取这些类型的蔬菜样本时，也需要整株浸提。

3 实例

取大白菜、青菜等大叶蔬菜8～10片叶子，将每片叶子从中对分，一半弃掉，一半从中拦腰截断，取每片叶子的部分制样。取豌豆尖这一小叶蔬菜，整株作为取样单元，总共取100～150 g制样。同时，取萝卜、茄子、葱头等各100～150 g制样。将每份样品叶都贴上标签和编号，每瓶取2 g，放入500 mL的三角瓶中，制取浸提液。利用酶液和显色液对其进行检测。检测结果的抑制率如果低于50%，说明农产品中的蔬菜残留不超标；如果抑制率超过50%，说明农产品中的农药残留量超标。当抑制率超过40%时，应进行2次以上的重复检测，保证重复检测的重现性不低于80%。

4 小结

在蔬菜农药残留快速检测中，要先准备好检测所需的各种试剂和容器，准备好检测仪。选好样品，再用乙酰胆碱酶对其进行检测，通过检测仪器获取检测结果。

速测仪法在蔬菜农药残留检测中的应用，简单方便，只需30 min左右的时间就能完成，能够弥补传统检测仪器分析方法的不足，实现对市场上的蔬菜、农场中的蔬菜农药残留情况进行快速检测，分析出蔬菜中的农药残留量，使人们能够食用到安全、放心的蔬菜。

速测仪法在检测过程中同时也存在一定缺点，还需要进一步对其进行改进。例如，酶试剂容易失去活性，一旦其活性不存在，就会影响检测过程反应的稳定性，使检测结果出现很大的误差，从而降低其重复性检测效果。此检测方法的实际应用过程中，确认率通常只能达到60%～70%。并且，在检测过程中还存在盲区，只能对两类农药进行检测，一类是有机磷，一类是氨基甲酸酯，无法检测出有机氯类农药、菊酯类农药和其他类农药。此外，速测仪法也不适合对葱、蒜、番茄、胡萝卜等14类农产品进行检测，因为这些农产品容易出现假阳性。速测仪对检测人员的要求比较高，这些人员必须要经过专业的培训，才能对检测过程中出现的问题进行专业的判断和处理，否则很容易得出错误的检测结果。