包虫病诊断与预防疫苗研究发展

2018-01-18赵霞

中国畜禽种业 2018年11期

赵霞

（青海省河南县托叶玛乡农牧业技术服务站 811599）

1 包虫病的诊断技术

包虫病主要发生在我国西部地区，是影响放牧区农牧人畜的主要疾病，严重阻碍了当地畜牧业的发展。包虫病在感染初期很难被诊断，一旦发现并采取治疗时，就已经进入患病后期。包虫病的中间宿主主要是牛羊等动物，对这些中间宿主进行免疫诊断时，可以采取酶联免疫吸附实验，将囊液和粗提原头节蛋白作为抗原进行检测，其中粗提原头节蛋白对检测的特异性很强，较为敏感。抗原B是由包虫幼虫原头节和包囊合成和分泌的一种高丰富蛋白。这种蛋白免疫原性很强，对包虫病的识别能力很强，大多数患病者都能被识别，可以有效对疾病宿主的免疫应答反应进行调节。棘球蚴病抗原B在对棘球蚴病进行差异表达的不同发育阶段中，具有十个以上的单一基因。根据对不同国家采集到的病理材料进行对比，发现其在棘球蚴病幼虫以及成虫阶段的每一个基因几乎都是完全一致的，对比其DNA序列可以看到，棘球蚴病的发育阶段是高度保守区。但棘球蚴病抗原B具有显著的多态性和变异性，对差异PCR的结果进行分析表明，这些基因对于棘球蚴病不同阶段的表达是不一样的，存在一定差异，其中抗原B3可以表达棘球蚴病的所有生活阶段。免疫PCR是检测抗原的一种系统，通过PCR可以将已知DNA片段进行扩增，灾后采取常规的检测方式对PCR产物进行检测，通常在抗原抗体的复合物上进行DNA片段的标记。PCR检测法比传统的酶联免疫吸附试验和酶免疫法具有更高的灵敏度。Im-muno-PCR对于一抗和二抗的识别具有极高的灵敏度，多应用于对微量抗原的检测，对包虫病的诊断过程中也可对此技术进行借鉴[1]，能有效提升特异性及灵敏程度。

2 包虫病预防疫苗研究进展

2.1 中间宿主疫苗

中间宿主疫苗有六钩蚴抗原疫苗及重组蛋白EG95疫苗。六钩蚴是一种虫卵，由细粒棘球绦虫成虫产生，由于六钩蚴表面具有特殊的蛋白，能与特异性抗体进行结合，因此，采用六钩蚴的分泌物或者天然抗原可有效保护羊的棘球蚴病感染问题，其免疫程度高达99%。重组蛋白EG95包含6个转录成分，目前已经有研究者对重组EG95蛋白成功克隆和表达。虽然棘球蚴成虫等虫体在各个阶段具有不同的基因组表达，但重组EG95蛋白能在这些阶段中全部表达，说明重组EG95具有很高的生物活性。在中间宿主羊的体内，重组EG95蛋白能引起免疫应答，对包虫病进行有效的抵抗，并且此种蛋白在中间宿主羊的体内还能有效抑制棘球蚴虫体的发育。通过新西兰及澳大利亚进行的实验数据表明，选用重组EG95蛋白对羊进行免疫保护，可以大大提升羊抗包虫病的能力，起保护率高于96%，并且在实验一年后再对羊体内的抗体进行检测，其保护率依旧在86%以上，说明重组EG95对感染棘球蚴病具有很高的免疫保护作用。

2.2 终末宿主疫苗

在实际生活中，包虫病的中间宿主要显著多于终末宿主，比如在同一牧场中，羊数量是犬类的几十倍甚至上百倍，而且通过对犬类感染棘球蚴病的实验结果来看，年龄低的犬类比年龄高的犬类身体中棘球蚴成虫数量要多，表明犬类具有抵抗棘球蚴病的能力，因此，对终末宿主进行免疫，控制包虫病的病情。

目前主要有虫体粗抗原疫苗、重组蛋白疫苗等。早期棘球绦虫的疫苗主要是利用天然的虫体蛋白作为抗原，采用棘球蚴的原头节及其他虫体蛋白对犬类进行免疫处理，发现这些蛋白能有效减少犬类体内的棘球蚴虫体数量，并且具有抑制虫体生长的作用。另外采用动感冻干的原头节或灭活原头节对犬类进行免疫，也可以有效抑制犬类体内虫体的生长，减少棘球蚴虫体的数量。通过PCR技术从棘球蚴虫体中分离出表达序列，并获得重组蛋白，将这种蛋白对犬类进行免疫也能抑制虫体的生长，并且还能影响到虫卵及胚胎的发育情况，具有很高的保护率。由于包虫病的流行范围较广，想要彻底解决包虫病的传播问题还比较艰难[2]，采取终末宿主免疫的方式，能控制棘球蚴虫卵的产生，从而控制包虫病的流行。