雪菊总黄酮对小鼠体重及记忆再现障碍的影响

秦 乐 陈新梅 邢佰颖 岳志敏

(山东中医药大学药学院，山东 济南 250355)

雪菊，菊科植物两色金鸡菊，具有清热解毒、活血化疲、和胃健脾之功效。现代药理研究表明，雪菊具有降血糖、降血压、降血脂、抗氧化、去除体内垃圾等多种功效[1]。其主要含有黄酮类物质、人体必需矿物质元素、氨基酸及蛋白质类，也含有丰富的芳香族化合物，有机酸、多糖等[2]。其中，雪菊总黄酮含量高，具有显著的抗病毒、抗氧化能力[3]，且从植物中提取得到的天然黄酮类化合物可有效对抗记忆力衰退[4]，为探讨雪菊总黄酮对新陈代谢以及记忆力的影响，本实验采用称量法和小鼠跳台实验法研究其对体重、小鼠记忆再现及行为能力的影响程度，对人们的日常饮食与体重控制有一定指导意义，可为雪菊总黄酮在此方面的开发利用提供科学依据。

1 材 料

1.1 动物

SPF级雄性昆明种小鼠，体重28～32g。由山东鲁抗医药股份有限公司质检中心实验动物室提供。动物合格证编SCXK(鲁)20160007。

1.2 仪器

XZC-5A 型小鼠跳台仪(山东省医学科学院设备站提供)；恒温不锈钢水浴锅(上海树立仪器仪表有限公司)；JM-A3002电子天平(诸暨市超泽衡器设备有限公司)。

1.3 试药

雪菊(新疆润元本草有限公司，批号：20160910)；95%乙醇(天津市富宇精细化工有限公司，分析纯，批号: 20150725);氯化钠(国药集团化学试剂有限公司，分析纯，批号：20160902)。

2 方法与结果

2.1 雪菊总黄酮的提取

精密称取研碎后过60目网筛的雪菊粉末4.00 g，按料液比1∶10加入40 mL纯水，于90 ℃下热浸20 min后过滤。如此重复2次，合并2次浸出液得到11.14 mg/mL高剂量雪菊总黄酮[5]。后稀释2次，各稀释1倍，得5.57 mg/mL中剂量和2.78 mg/mL低剂量雪菊总黄酮。

2.2 动物分组及给药

健康昆仑种小鼠40只，随机分为4组，即空白组，低、中、高剂量雪菊总黄酮组，每组10只。除空白组外，其余各组分别灌胃(0.1 mL/10 g)给予低、中、高剂量雪菊总黄酮，空白组灌胃给予等量生理盐水，每天2次，连续给药30天。

2.3 小鼠体重的测定

各组小鼠自由取食及饮用水，分别在灌胃前，灌胃后10、20、30 d称重记录体重。并观察每组小鼠排泄情况及健康状况。

由表1可知，灌胃前，各组小鼠体重无差异，且4组小鼠在实验过程中体重均增加，且不同剂量雪菊总黄酮组的小鼠体重增长较空白组均有不同程度的减缓，剂量越大，体重增长越慢。与空白组相比，灌胃后20 d中、高浓度雪菊总黄酮组小鼠的体重统计学差异显著；灌胃后30 d高剂量组体重统计学差异极为显著，表明高浓度雪菊总黄酮能明显控制小鼠体重增长。

表1 不同浓度雪菊总黄酮给药天数对小鼠体重的影响Table 1 Effects for days of different concentration total flavonoids from coreopsis tinctoria on weight of mice

注：与空白组比较，***P<0.001，**P<0.01，*P<0.05。

2.4 跳台实验

第30 d给药1 h后，跳台训练5 min(36 V，1 mA，Alternating Current交流电)。训练后24 h，试验前30 min，空白组灌胃40%乙醇10 mL·kg-1，低、中、高剂量雪菊总黄酮组等量灌胃末次给药，进行重复跳台测试，记录小鼠5 min内受到电击的总次数，定义为跳台错误次数。

表2 不同浓度雪菊总黄酮对40%乙醇致记忆再现障碍小鼠跳台实验错误次数Table 2 effects of different concentration total flavonoids from coreopsis tinctoriaon memory emersion disorders caused by 40% ethanol of mice

注：与空白组比较，***P<0.001。

由表2可知，与空白组相比，不同剂量雪菊总黄酮组的小鼠跳台错误次数均减少，浓度越大，跳台错误次数越少，且中、高剂量组有极显著差异，表明中、高剂量雪菊总黄酮能显著降低乙醇引起的记忆再现障碍模型小鼠跳台错误次数，提高其记忆再现能力。

3 结果与讨论

通过测量小鼠在灌胃前，灌胃后10、20、30 d的体重，发现不同浓度的雪菊总黄酮对小鼠体重增长有不同程度的减缓作用，且浓度越高，体重增长减缓程度越大。灌胃20 d后，中、高剂量雪菊总黄酮组与空白组的体重相比有显著差异；灌胃30 d后高剂量组与空白组小鼠体重差异极为显著，表明高浓度雪菊总黄酮可明显控制小鼠体重增长。雪菊总黄酮中的儿茶素[6]能显著抑制脂肪细胞的增殖、分化，有抑制细胞内的脂质积累的功效，同时通过刺激机体热生成、降低机体对食物营养成分的吸收等作用而减少机体的能量摄入和存储[7]，从而减缓小鼠的体重增长。且观察各组小鼠排泄情况可发现，高剂量雪菊总黄酮组小鼠的排泄量较空白组明显增多，说明雪菊能加快肠道蠕动，排除小鼠体内垃圾，清理毒素，其原因可能与雪菊总黄酮的抗氧化能力与促进新陈代谢[8]有关。综上，推测雪菊总黄酮具有一定的促消化、排毒，减少脂肪堆积的功效，临床上可用于润肠通便，排毒养颜以及减肥等日常保健。

小鼠跳台行为实验法检测不同浓度雪菊总黄酮对40%乙醇所致小鼠记忆再现障碍的结果表明，与空白组相比不同浓度的雪菊总黄酮对小鼠记忆再现障碍有改善作用，且中、高剂量组能显著减少跳台错误次数，表明中、高浓度雪菊总黄酮对具有中枢抑制作用的低浓度乙醇造成的记忆再现缺损有显著的对抗作用，提示雪菊总黄酮可能改善了乙醇引起的细胞毒性反应，修复了细胞因乙醇摄入导致的磷脂和脂肪酸代谢紊乱及氧化代谢产物的增加造成的损伤[9]。其机制可能与总黄酮清除自由基，抗脂质过氧化等作用有关[10]。雪菊总黄酮在小鼠学习记忆方面的积极作用在临床上对老年痴呆等病症的防治具有潜在优势和良好的应用前景[11]。

本试验结果表明，雪菊总黄酮具有抑制小鼠体重增重和提高小鼠记忆再现能力的功效。可为进一步探讨雪菊总黄酮对动物体重及智力发育的影响，开发利用以雪菊总黄酮为原材料的功能性药品和食品提供借鉴参考。

[1] 方煊,李雅丽,陈新梅. 雪菊黄酮对脂肪变肝细胞的降脂效果[J]. 温州医科大学报,2016,46(10):720～723.

[2] 张媛，木合布力·阿不力孜，李志远.金鸡菊属药用植物研究进展[J].中国中药杂志，2013, 38(16): 2 633～2 638.

[3] 段章好,陈新梅. 抗乙肝病毒中药活性成分研究进展[J]. 辽宁中医药大学学报,2016, 18(11):112～115.

[4] 王丽娟,张彦青,王勇,等. 酸枣仁黄酮对记忆障碍小鼠学习记忆能力的影响[J]. 中国中医药信息杂志,2014,2(5)1:53～55，60.

[5] 徐斌,王丹,葛红娟,等. 昆仑雪菊黄酮提取物体外抗氧化活性试验[J]. 中国兽医杂志,2015, 51(12):103～106.

[6] 袁辉,赵建勇,杨文菊. 新疆不同产地雪菊UPLC指纹图谱的建立及其成分测定[J]. 中草药,2015, 46(8):1 223～1 226.

[7] 叶小燕,黄建安,刘仲华. 茶叶减肥作用及其机理研究进展[J]. 食品科学,2012,33(3):308～312.

[8] 谢伟,杨永亮,梁莉,等. 银杏黄酮对骨骼肌抗疲劳能力的影响[J]. 中国临床康复,2006,10(36):98～100.

[9] 景波,吕程,于建,等. 荨麻总黄酮对记忆障碍模型小鼠学习记忆能力的影响[J]. 华西药学杂志,2016,31(3):239～242.

[10] 李利平,王全胜,武变瑛,等. 高纯度银杏黄酮对衰老小鼠学习记忆功能的影响[J]. 中国临床康复,2005,9(44):97～99.

[11] 陈新梅. 抗老年痴呆药物研究进展[J]. 中国民族民间医药,2011,3:30.