10种化合物对胡椒瘟病菌的抑菌活性测定

苟亚峰+高圣风++孙世伟++桑利伟++王政++孟倩倩++刘爱勤

摘 要 以胡椒瘟病菌（Phytophthora capsici）为供试病原菌，用生长速率法测试了10种化合物对其离体抑菌活性。结果表明，当供试浓度为2 000 mg/L时，腈菌唑、戊唑醇、三环唑和嘧霉胺的抑菌活性均达到了60%以上，其中腈菌唑和三环唑抑菌活性最高，抑菌率分别达到了85.16%和100%，对胡椒瘟病菌菌丝生长具有明显的抑制作用，该两种化合物值得进一步研究开发。

关键词 化合物 ；胡椒瘟病菌 ；抑菌活性

中图分类号 S482.2 文献标识码 A Doi：10.12008/j.issn.1009-2196.2017.11.010

Antifungal Activity of Phytophthora Capsici of 10 Compounds

GOU Yafeng GAO Shengfeng SUN Shiwei WANG Zheng LIU Aiqin*

（Research Institute of Spice and Beverage Crops，CATAS，Wanning，Hainan 571533）

Abstract The antifungal activity of 10 compounds were tested by growth rate method with Phytophthora capsici. The results showed that when the concentration were 2000 mg/L， Myclobutanil， Tebuconazole，Tricyclazole and Pyrimethanil antifungal activity were more than 60%， Myclobutanil and Tricyclazole had high inhibitory rate to 85.16% and 100%，respectively. These two compounds had obvious inhibition to the growth of Phytophthora capsici mycelia. It was worth to have further research.

Keywords compound ； Phytophthora capsici ； antifungal activity

胡椒瘟病又称疫霉根腐病、速枯病、速死病，是一种气候依赖性病害，是世界胡椒种植区最重要的胡椒病害。在海南它是由辣椒疫霉（Phytophthora capsici）引起的最为严重的一种土传病害，以主蔓基部受害最大，常引起整株胡椒萎蔫和死亡[1-3]。在高温多雨季节，特别是台风雨后或连续降雨，该病发生流行严重，给我国胡椒生产造成了严重损失。国内农业生产上药剂防治还主要以波尔多液、三乙膦酸铝或硫酸铜溶液等为主，由于这些药剂防治药效慢、处理时间长，长期使用不但容易引起抗药性，而且对胡椒园的生态环境、胡椒的品质等方面带来不利影响[4]。

随着农业病虫害综合防控技术以及人们对食品质量安全意识的不断提高，传统化学农药毒性大、残留量高，长期使用会对环境和人类健康造成严重威胁，破坏生态平衡。因此，应用生物防治、物理防治和筛选高效、低毒、低残留农药等绿色防控技术对病虫害进行综合防控的需求越来越紧迫[5-6]。为此，本研究以胡椒瘟病菌为供试病原菌，测试了10种化合物的抑菌活性，以期筛选出抑菌活性较好的化合物，为低毒、高效的杀菌剂研發提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 供试化合物

供试10种化合物，均购于市场。见表1。

1.1.2 供试菌种

胡椒瘟病菌（Phytophthora capsici），由中国热带农业科学院香料饮料研究所病虫害防控研究室提供。

1.2 方法

采用含毒介质法中的生长速率法测定供试化合物对胡椒瘟病菌菌丝生长的抑制作用[7]。具体操作步骤为：（1）称取0.2 g不同化合物，先用1 mL丙酮溶解，再用无菌蒸馏水定容至100 mL，制成浓度为2 000 mg/L的母液；（2）用无菌蒸馏水采用倍半稀释法制成浓度为1 000 mg/L的供试浓度；（3） 将培养基融化并冷却至50℃左右，把定量3 mL不同浓度的化合物分别与定量27 mL/瓶的PDA培养基混合，摇匀后分装于3个直径为9 cm的培养皿中，待其凝固后，取菌落直径为5 mm、培养7d的胡椒瘟病菌的外层菌块放置于培养皿中，以加入等体积丙酮灭菌水的PDA培养平板为对照，每个处理做3个重复；（4）接种后，在人工气候培养箱（25～28℃）下培养72 h后采用十字交叉法分别测量菌落大小，求其平均值，分别计算出各种化合物每种浓度的抑制率。

2 结果与分析

2.1 供试10种化合物对胡椒瘟病菌菌丝生长抑菌率测定

在浓度为2 000和1 000 mg/L时，10种化合物对胡椒瘟病菌抑菌率测定结果见表2。

从表2中可以看出，10种化合物在供试浓度为1 000 mg/L时，腈菌唑和三环唑的抑菌率均达到了60%以上，分别为61.42%和66.37%；供试浓度为2 000 mg/L时，腈菌唑、戊唑醇、三环唑和嘧霉胺的抑菌率均达到了60%以上，其中腈菌唑和三环唑的抑菌率较高，分别达到了85.16%和100%，具有较高的开发利用前景。

2.2 腈菌唑和三环唑对胡椒瘟病菌病斑扩展的抑制作用

分别称取一定量腈菌唑和三环唑两种化合物，先用丙酮溶解，再用无菌蒸馏水定容制成浓度为1 600 mg/L的供试浓度，采用“1.2”的方法，接种后在人工气候培养箱（25～28℃）下培养，4 d后采用十字交叉法分别测量菌落（含菌饼直径）大小，测定结果见图1。endprint

从图1可看出，三环唑和腈菌唑处理的含毒培养基中胡椒瘟病菌菌落明显比对照菌落要小，可见三环唑和腈菌唑对胡椒瘟病菌病斑扩展具有明显的抑制作用。进一步测定三环唑和腈菌唑在供试浓度为1 600 mg/L时对胡椒瘟病菌菌丝生长的抑制作用，结果见表3。

从表3可看出，在供试浓度为1 600 mg/L时，三环唑和腈菌对胡椒瘟病菌菌丝生长的抑制率均达到了70%以上，分别为84.11%和71.32%，可见三环唑的抑菌效果比腈菌唑好，有望进一步开发利用。

3 讨论

从供试的10种化合物对胡椒瘟病菌菌丝生长抑制活性测定结果可以看出，三环唑和腈菌唑在供试浓度为2 000 mg/L时，对胡椒瘟病菌菌丝生长抑制率分别达到了100%和85.16%，较其他化合物抑菌活性较高。三环唑是一种具有较强的内吸性的保护性杀菌剂，中等毒性，主要是抑制附着孢黑色素的形成，从而抑制孢子萌发和附着孢形成，阻止病菌侵人和减少稻瘟病菌孢子的产生。有研究报道，75%三环唑可湿性粉剂对防治水稻穗期叶瘟有一定的防治效果，对水稻稻瘟病有很好的防效，对作物安全[8-9]。腈菌唑是一类具保护和治疗活性的内吸性三唑类杀菌剂，低毒，主要对病原菌的麦角甾醇的生物合成起抑制作用，对子囊菌、担子菌均具有较好的防治效果。因此，这两种化合物具有进一步研究开发的价值。

目前我国农药创新研究开发能力十分薄弱，农药工业中存在量大质次、品种老化、污染严重等问题。因此，研发环境相容性好、安全高效的农药是该领域发展的必然方向。在筛选低毒、高效杀菌剂时要结合离体和活体实验结果共同评价供试药剂的活性，但本研究仅限于室内离体条件下测定了供试药剂对病原菌菌丝生长的抑制活性，存在一定局限性。因此，为进一步明确三环唑和腈菌唑对胡椒瘟病菌的抑菌活性，应结合测定该药剂对胡椒瘟病菌孢子萌发抑制作用以及对活体胡椒上胡椒瘟病的防治效果等多种方法，为全面筛选出防治胡椒瘟病的高效杀菌剂提供支撑。

参考文献

[1] 桑利伟，刘爱勤，谭乐和，等. 海南省胡椒瘟病病原鉴定及发生规律[J]. 植物保護，2011，37（6）：168-171.

[2] 崔昌华，郑服丛，贺春萍，等. 海南胡椒主要真菌病害调查与病原鉴定[J]. 安徽农业科学，2011，39（6）：3 355-3 358.

[3] 刘进平，郑成木，郑服丛. 胡椒瘟病与辣椒疫霉[J]. 热带农业科学，2001（5）：57-61.

[4] 邢谷杨. 胡椒无公害生产及其主要病虫害防治[J]. 广西热带农业，2004（6）：34-35.

[5] 唐春艳，张海旺，张国珍. 10种杀菌剂对板栗疫病菌的抑制作用[J]. 植物保护，2008，34（2）：144-147.

[6] 杨共强，宋玉立，何文兰. 6种杀菌剂对小麦白粉病的防治效果[J]. 植物保护，2008，34（1）：146-147.

[7] 关天舒，赵奎华，刘长远，等. 不同杀菌剂对辣椒疫病菌室内抑菌活性测定[C]. 中国植物病理学会学术年会论文集，2010

[8] 刘祥菊. 75%三环唑可湿性粉剂防治水稻穗期稻瘟病药效试验[J]. 吉林农业（C版），2011（9）：68-69.

[9] 张金花，赫百令，韩润亭，等. 75%三环唑可湿性粉剂防治水稻稻瘟病药效评价[J]. 吉林农业科学，2010，35（4）：41-42.endprint