LysM Cre Cb b/ Cbl小鼠模型的建立和免疫表型分析

谭晨声，杨燚，张进平

(苏州大学 生物医学研究院，江苏 苏州 215123)

谭晨声，杨燚，张进平

(苏州大学 生物医学研究院，江苏 苏州 215123)

1 材料和方法

1.1 实验材料

1.1.2 染色试剂 Giemsa染色液购自珠海贝索生物技术有限公司；天狼星红染色液(Direct Red)购自Fluke公司；HE染色液购自广州市秀威贸易有限公司。

1.2 实验方法

1.2.2 制片和染色 取35 d左右小鼠的肺脏，按常规方法固定、脱水、石蜡包埋、制备切片，分别进行HE染色和天狼星红染色。肺灌洗液用甩片机甩片，然后用Giemsa染色液染色。用Nikon Eclipse 90i全自动显微镜观察并拍照。

1.2.4 流式细胞仪检测 取35 d左右小鼠肺灌洗液、脾脏细胞、骨髓、外周血等，用相应荧光抗体染色20 min，部分细胞用CD16/32抗体封闭后再染相应流式抗体。然后用PBS洗完后，用FACS CantoII分析各亚群细胞的变化。

1.3 统计学处理

实验数据用均数±标准差表示。两组间比较采用t检验分析。P<0．05为差异具有统计学意义。

2 结 果

A.小鼠35 d死亡时，dKO小鼠明显体积变小；B.小鼠生存率统计；C.小鼠35 d时体重

A.Mice died about the 35th day, dKO mice showed significantly smaller size; B.The statistics of Mice survival rate; C.Mice weight at 35 days

图4Lysozyme2在不同免疫细胞中的表达

Fig4Lysozyme2expressionindifferentimmunecells

3 讨 论

图5FACS检测cDC在不同组织中的比例检测(aP<0.01)

Fig5TheproportionofcDCindifferenttissuesbyFACS(aP<0.01)

图6CD11b+Gr1+细胞在骨髓和脾脏中比例检测(aP<0.05，bP<0.01)

Fig6TheproportionofCD11b+Gr1+cellsinbonemarrowandspleen(aP<0.05，bP<0.01)

图7脾脏和肺灌洗液中Mφ细胞检测(aP<0.05，bP<0.01，cP<0.0001)

Fig7TheproportionofMφinspleenandLunglavagefluidbyFACSanalysis(aP<0.05，bP<0.01，cP<0.0001)

[4] DACCORD C,MAHER T M.Recent advances in understanding idiopathic pulmonary fibrosis [J].F1000Research,2016,5.

(InstitutesofBiologyandMedicalSciences,SoochowUniversity,Suzhou,215123，China)

国家自然科学基金面上项目(31270939，81471526，81771667)；组织器官区域免疫特性与疾病重大研究计划培育项目(91442110)；江苏省自然科学基金面上项目(BK2012617)；江苏省高校自然科学研究重大项目(13KJA310004)；江苏省自然科学基金青年项目(BK20170349)

谭晨声(1992-)，女,山东济宁人，在读免疫学专业硕士研究生，研究方向：淋巴细胞发育和分化。Email:739290738@qq.com

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孙茂民)