PCR法宫颈分泌物沙眼衣原体、解脲支原体检测在女性不孕症患者检查中的应用

安爱平

(南阳市中心医院 河南 南阳 473000)

PCR法宫颈分泌物沙眼衣原体、解脲支原体检测在女性不孕症患者检查中的应用

安爱平

(南阳市中心医院 河南 南阳 473000)

目的分析聚合酶链式反应(PCR)法宫颈分泌物沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)检测在女性不孕症患者检查中的意义。方法选取南阳市中心医院2016年8月至2017年7月妇产科门诊收治的62例不孕症患者作为观察组，另选取同期62例健康体检者作为对照组。采用PCR法检测对比两组CT、UU、CT+UU阳性率。结果观察组UU阳性率为74.19%(46/62)、CT阳性率为82.26%(51/62)、CT+UU阳性率为66.13%(41/62)，高于对照组的14.52%(9/62)、17.75%(11/62)、8.06%(5/62)，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论宫颈分泌物沙眼衣原体、解脲支原体感染与女性不孕症密切相关，临床应重视其检查，为不孕症诊治提供参考。

沙眼衣原体；解脲支原体；不孕症

近些年，不孕不育在全球范围内呈上升趋势，世界卫生组织调查数据显示，已婚夫妇中不孕不育人数占10%～15%，其中女性不孕占全部的25%～36%，目前不孕症已成为生殖领域研究的热点[1]。沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)是泌尿生殖系统感染常见病原体之一，其主要经性接触进行传播，可引发宫颈炎、阴道炎、输卵管炎等，是导致女性不孕重要因素[2-3]。同时妊娠期妇女一旦发生CT、UU感染，将会引发早产、流产等不良妊娠结局。为进一步深入研究女性不孕症与CT、UU关系，本研究选取南阳市中心医院收治的62例不孕症患者，另设对照组，分析PCR法宫颈分泌物CT、UU检测在女性不孕症患者中检查的意义。

1 资料与方法

1.1一般资料选取南阳市中心医院2016年8月至2017年7月妇产科门诊收治的62例不孕症患者作为观察组。患者临床上存在宫颈炎、阴道炎、输卵管炎等疾病相关症状，或其他原因引起的阴道分泌物增多，排除先天性生殖系统缺陷、排卵异常、内分泌障碍、子宫内膜异位症、男方精液异常等其他因素引起的不孕。患者年龄为26～39岁，平均(32.24±4.88)岁，不孕时间为2～6 a，平均(3.45±1.03)a。另选取同期62例健康体检者作为对照组，年龄为27～38岁，平均(31.77±4.23)岁，两组年龄等一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2标本采集用长棉棒擦拭宫颈表面黏液并丢弃，再用新棉棒插入宫颈深处转动数圈，采集宫颈黏膜柱状上皮细胞，停留10 s后取出，浸入无菌生理盐水试管中送检。

1.3仪器PCR法试剂盒由北京信科奥达科技有限公司提供，PCR扩增仪(上海乔跃电子有限公司，JY-DTC-3G)，紫外透射仪(无锡博弗瑞德生物科技有限公司，BD-BMM1)。

1.4检测方法严格按照试剂盒说明书进行操作，扩增程序如下：93 ℃环境下预变性3 min，之后按照93 ℃(45 s)、55 ℃(40 s)、72 ℃(50 s)重复循环35次，最后1次72 ℃延长至5 min，提取15 μl生成物实施琼脂糖电泳，在紫外透射仪下和阳性对照物在同一水平带则定为阳性。

1.5观察指标检测比较两组CT、UU及CT+UU阳性率。

2 结果

观察组UU阳性率为74.19%、CT阳性率为82.26%、CT+UU阳性率为66.13%，高于对照组的14.52%、17.75%、8.06%，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组UU、CT及两者联合检测阳性率比较[n(%)]

3 讨论

女性不孕症是孕龄期妇女常见疾病。据统计，近些年我国女性不孕症有逐年增加趋势，其主要由输卵管阻塞、生殖系统感染、排卵异常、遗传、内分泌紊乱等原因造成，其中生殖器感染造成的不孕患者所占比例高达50%左右[4]。CT、UU等微生物入侵引起生殖系统炎症在所有病原菌中占首位，由此引发的不孕症受到临床广泛关注[5]。

CT经性行为进行传播，可发生泌尿生殖道感染，损伤子宫颈管黏膜组织，导致子宫颈管黏液栓屏障保护作用减弱或消失，CT感染继而上行引发子宫炎及输卵管炎，使输卵管阻塞，从而影响受精卵着床导致不孕。另外CT与宿主细胞受体结合后，其代谢产物具有一定细胞毒性，可诱导机体产生特异性体液及细胞免疫，引发超敏反应及免疫病理性损伤，进而造成不孕。韩燕媚等[6]研究指出，女性不孕患者中，宫颈分泌物CT感染阳性率高达15%～30%。此外支原体是细胞生物属中能独立生存最小的微生物，其种类繁杂多样，其中UU主要寄生于泌尿生殖道，黏附性极强，其能分解脲酶生成碱性NH4，从而破坏机体生殖系统天然屏障，改变酸性环境，引发感染。多数感染者早期无自觉症状，随着病情加重，出现尿频、尿急、白带增多、子宫颈水肿、充血、糜烂等症状，可使生殖道发生粘连、阻塞，进而引发不孕。当孕妇感染时，可上行进入胎膜、羊水，引发胎儿感染。由此可知CT、UU均为不孕的潜在致病因素。本研究对有宫颈炎、阴道炎、输卵管炎等不孕患者采用PCR法进行CT、UU检测，结果显示，UU阳性率、CT阳性率、CT+UU阳性率均高于健康体检者(P<0.05)，提示在女性不孕症患者中，可将UU、CT检测作为病因诊断项目之一，以为临床治疗提供参考。此外PCR法属于一种酶促化学反应，可在试管内将待检测的目的基因在短时间内迅速扩增至数十万倍至上千万倍，从而降低分析难度，提高基因诊断敏感度。

综上，宫颈分泌物UU、CT感染与女性不孕症密切相关，临床应重视其检查，为不孕症诊治提供参考。

[1] 李会平,霍新年.不孕不育夫妇生殖道解脲支原体、沙眼衣原体感染及抗精子抗体、抗子宫内膜抗体关系探讨[J].中国优生与遗传杂志,2014,22(1):108-109.

[2] 李素芳,徐宏仙,黎世贵.沙眼衣原体与解脲支原体感染与女性不孕症相关性分析[J].中国性科学,2016,25(11):105-107.

[3] 丁楠,王芳,简启亮,等.解脲支原体、沙眼衣原体感染与女性不孕症相关性的meta分析[J].中国计划生育学杂志,2014,22(12):803-807.

[4] 赵晓萍.不孕症患者宫颈分泌物和盆腔液中解脲支原体与沙眼衣原体的检测及其意义[J].中国医师进修杂志,2014,37(9):52-53.

[5] 郭宏亮,刘惠谨,黄荣芳.女性下生殖道感染与不孕症的相关性[J].昆明医科大学学报,2015,36(6):138-140.

[6] 韩燕媚,康岚,史春,等.不孕妇女解脲脲原体、沙眼衣原体感染水平分析[J].中国地方病防治杂志,2017,32(2):184-186.

R 711.6

10.3969/j.issn.1004-437X.2017.22.037

2017-09-23)