APP下载

超高效液相色谱-串联质谱法测定水中痕量硝基多环芳烃

2017-12-19薛洪海汪雨薇高斯屿

关键词:离子源硝基芳烃

薛洪海,汪雨薇,,王 颖,陈 希,温 学,高斯屿,纪 宁

(1.吉林建筑大学松辽流域水环境教育部重点实验室,吉林 长春 130118; 2.北京中领工程设计咨询有限公司,北京 100035; 3.吉林省领地房地产开发有限公司,吉林 长春 130117)

超高效液相色谱-串联质谱法测定水中痕量硝基多环芳烃

薛洪海1,汪雨薇1,2,王 颖1,陈 希3,温 学1,高斯屿1,纪 宁2

(1.吉林建筑大学松辽流域水环境教育部重点实验室,吉林 长春 130118; 2.北京中领工程设计咨询有限公司,北京 100035; 3.吉林省领地房地产开发有限公司,吉林 长春 130117)

采用带有大气压化学电离离子源的超高效液相色谱-串联质谱仪,研究了水中2种典型硝基多环芳烃——1-硝基芘和1,8-二硝基芘的定量分析条件.结果表明,在多反应监测模式下,可直接分析水中痕量1-硝基芘和1,8-二硝基芘.其线性范围分别为0.72~12 μg/L和0.48~48 μg/L,相关系数分别为0.999 0和0.999 2,回收率分别为97.67%~104.44%和93.33%~103.13%,方法检出限分别为0.21 μg/L和0.15 μg/L,定量限分别为0.72 μg/L和0.26 μg/L.

1-硝基芘;1,8-二硝基芘;超高效液相色谱-串联质谱法

0 引言

硝基多环芳烃(nitro-polycyclic aromatic hydrocarbons,NPAHs)是一类具有直接致突变和致癌活性的多环芳烃(polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs)衍生物,[1]其致癌性和致突变性是PAHs的几十甚至数万倍.关于PAHs分析方法的报道较多,如液相色谱法、气相色谱法、气质联用(GC-MS)、液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)等,[2-5]而对NPAHs进行定量分析的研究较少.1-硝基芘(1-nitropyrene,1-NP)是一类结构最简单的NPAHs,也是汽车尾气中含量最高的一类NPAHs[6];1,8-二硝基芘(1,8-dinitropyrene,1,8-DNP)是目前报道的致突变活性最高的一类化合物[7].尽管1-NP和1,8-DNP在水中溶解度较低,仅为12 μg/L和54 μg/L,但有研究者已在雨水、河流中检测到这两种NPAHs.[8-9]

目前,关于大气及大气颗粒物中NPAHs检测方法的报道较多,而对水中NPAHs分析方法的研究相对较少[10].尽管早在1994年,徐晓白院士[11]就利用带有电子捕获检测器的气相色谱仪(GC-ECD)在城市地表水样中检测到多种NPAHs,然而该方法需要复杂的富集及处理过程.最近,关于NPAHs检测方法的研究主要集中于GC-MS法[12]以及高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)[13].鉴于NPAHs的低挥发性和热不稳定性,容易在进样口分解,因此并不适于GC-MS分析.[8]HPLC-FLD法需要先将NPAHs衍生化为氨基多环芳烃(amino-PAH,APAH),然后再测定具有荧光性的APAH,[14]从而间接获得NPAHs的浓度.但APAH性质不稳定,需要在生成后立即进行测试,且这一衍生化反应易受干扰.此外,上述两种方法检测NPAHs的灵敏度均不高.后来,研究者开发了带有化学发光检测器的高效液相色谱法(HPLC-CL)来分析NPAHs,[15]虽然灵敏度可提高100 倍,但仍然需要衍生化前处理,步骤繁琐.Straube等[16]采用带有不同离子源的LC-MS/MS分析了大鼠血浆中的DNP,结果发现电喷雾电离源中,DNP不能有效雾化,而大气压化学电离源(APCI)和大气压光化学电离源对DNP的检测效果均较好.近年来,有研究者利用LC-MS/MS分析了大气颗粒物和水中的1-NP,[17-21]获得了较高的灵敏度;对于水样来说,采用LC-MS/MS避免了繁杂的前处理过程,可以直接进样分析,因此,可以预见,LC-MS/MS适于用作水中NPAHs的分析,然而目前关于这方面的研究很少.王莉丽等[5]利用带有APCI离子源的LC-MS/MS分析了城市污水中的6种PAHs,在正离子、MRM监测模式下获得了较好的分离效果和较高的灵敏度.

本文利用LC-MS/MS法定量分析了水中痕量NPAHs,优化了质谱和色谱分析条件,通过线性范围、检出限和定量限、回收率和精密度等指标评价了方法的可行性.此外,采集实际水样,分析了其中NPAHs的浓度.本方法具有较好的分离能力、较快的分析速度和较高的灵敏度.

1 实验方法

1.1 主要仪器与装置

Ekspert Ultra LC 110 XL超高效液相色谱仪,美国Eksigent公司产品,配有两元四相梯度泵、自动进样器和柱温箱;3200 Q Trap串联质谱仪,美国AB Sciex公司产品,配有APCI离子源及Analyst 1.6数据采集和处理系统.175L液氮罐,浙江普阳深冷装备有限公司产品;超纯水机,上海摩勒科学仪器有限公司产品.

1.2 主要材料与试剂

1-NP,纯度99%,美国Sigma公司产品;1,8-DNP,纯度98%,美国Aldrich公司产品;甲醇,色谱纯,美国Tedia公司产品;纯净水,杭州娃哈哈集团有限公司产品.

1.3 样品制备

标准溶液的制备:分别准确称取0.002 4 g 1-NP和0.004 8 g 1,8-DNP标准品,用甲醇溶解并定容至1 L,配制成2.4 mg/L 1-NP和4.8 mg/L 1,8-DNP的储备液.使用前,用水稀释成所需溶液.为避免1-NP和1,8-DNP发生光解,采用棕色容量瓶和铝箔包裹,于4℃冰箱中密封保存.

1.4 实验条件

1.4.1 色谱条件

色谱柱:Agilent Zorbax RRHD SB-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm);柱温40 ℃;进样量20 μL;甲醇和水作为流动相,流速为200 μL/min.

1.4.2 质谱条件

APCI离子源;负离子扫描模式;多重反应监测模式(MRM);离子源温度500 ℃;电流-3.0 nA;气帘气(curtain gas)压力172 kPa;喷雾气(GS1)压力310 kPa;辅助加热气(GS2)压力207 kPa;碰撞气(CAD)压力为中等.

1.5 实际样品采集方法

2016年1月在吉林省长春市生态广场环岛内(N43°49′,E125°22′)采集实际积雪样品;2016年6月在吉林省长春市南湖大桥下(N43°50′,E125°18′)采集湖水样品.雪样品需在室温融化,随后将融雪水和湖水经0.45 μm滤膜过滤,当天测试其中1-NP和1,8-DNP的质量浓度.

2 结果与讨论

2.1 质谱条件的优化

在进行化合物优化——母离子扫描(MS)时,本方法对仪器进行了改进,在LC出口和APCI源进口之间加一个三通和注射泵,由注射泵引入2.4 mg/L的1-NP或4.8 mg/L的1,8-DNP的甲醇-水溶液(V(甲醇)/V(水)=50∶50),由LC提供的1.0 mL/min甲醇-水(V(甲醇)/V(水)=95∶5)作为流动相.在负离子电离模式下,分别在m/z为100~280和100~320范围进行1-NP和1,8-DNP的母离子扫描,在一级全扫描质谱中得到母离子的质量数.随后,进行产物离子扫描(product ion scan),不断增加碰撞能,最终获得多对离子对,将最强的离子对确定为定量离子对.同时,对去簇电压和碰撞能量进行优化,具体质谱参数见表1.

表1 1-NP和1,8-DNP的质谱参数

2.2 色谱条件的优化

由于1-NP和1,8-DNP的极性较差,尝试了较高体积比的甲醇进行了系列洗脱实验,结果见表2.由表2可见,无论对于1-NP还是1,8-DNP,当V(甲醇)/V(水)=95∶5时,保留时间最短;当V(甲醇)/V(水)=90∶10时,仪器响应值最高,但与V(甲醇)/V(水)=95∶5时响应值相差不多.为节省分析测试时间,选择V(甲醇)/V(水)=95∶5的甲醇-水溶液作为流动相.

在上述优化的质谱和色谱条件下分析1-NP和1,8-DNP,所得色谱图如图1所示.由图1可见,在选定的实验条件下,1-NP和1,8-DNP均具有良好的色谱峰.通过对同一样品重复测定发现,1-NP和1,8-DNP保留时间的重复性均较好,相对标准偏差(RSD)分别为0.19%和0.39%(n=6).1-NP和1,8-DNP的结构及其二级质谱图如图2所示.

表2 1-NP和1,8-DNP的色谱参数

图1 1-NP(a)和1,8-DNP(b)的多反应监测扫描模式色谱图

图2 1-NP(a)和1,8-DNP(b)的二级质谱图及其结构式

2.3 方法评价

2.3.1 线性范围、检出限和定量限

在上述优化实验条件下进行方法评价.分别配制0.72,1.2,3,6,9,12 μg/L的1-NP水溶液和0.48,3.6,12,24,36,48 μg/L的1,8-DNP水溶液,进LC-MS/MS分析,对不同浓度目标物的峰面积进行线性回归,结果表明,1-NP和1,8-DNP分别在0.72~12 μg/L和0.48~48 μg/L的浓度范围内具有的良好线性关系,相关系数(R2)分别为0.999 0和0.999 2.以3倍信噪比(S/N)为方法检出限(LOD),10倍S/N为定量限(LOQ),得到1-NP和1,8-DNP的检出限和定量限,结果见表3.Barreto等[22]采用APCI-LC-MS/MS方法检测柴油机油烟中的1-NP,检出限为0.2 μg/L,与本文相当.Straube等[16]采用APCI-LC-MS/MS方法检测大鼠血浆中的1,8-DNP,检出限为5 μg/L(S/N值=5),劣于本论文.

表3 1-NP和1,8-DNP的线性方程、相关系数、检出限、定量限

2.3.2 回收率和精密度

在不同质量浓度的1-NP和1,8-DNP标准品中分别添加0.5和1倍的加标量,进行回收率测定,结果见表4.由表4可见,在3~6 μg/L范围内,1-NP的回收率为97.67%~104.44%;在2.4~24 μg/L范围内,1,8-DNP的回收率为93.33%~103.13%.相对标准偏差均小于5%,结果令人满意.

表4 1-NP和1,8-DNP的回收率和精密度(n=3)

2.3.3 1-NP和1,8-DNP的同时分析

图3 1-NP和1,8-DNP的多反应监测扫描模式色谱图

将1-NP和1,8-DNP的分析方法进行合并(Merge,MRM),利用合并后的方法,测定混合标准品中1-NP和1,8-DNP的浓度,结果见图3.由图3可见,本方法可有效分离出混合组份中的1-NP和1,8-DNP,且色谱峰良好.

应用本方法对长春市生态广场积雪以及南湖水样中的1-NP和1,8-DNP浓度进行了同时分析,结果表明,两个采样点融雪水和湖水中1-NP和1,8-DNP的浓度均低于检出限(LOD).

4 结论

本文以APCI为离子源,在MRM模式下,通过对质谱和色谱条件的优化,成功建立了水中2种代表性NPAHs化合物1-NP和1,8-DNP的LC-MS/MS分析方法.与已报道方法相比,本方法不需样品前处理过程,且具有较好的分离能力、较快的分析速度和较高的灵敏度等诸多优点,适用于水环境中痕量NPAHs的分离分析.

[1] WANG W,JING L,ZHAN J,et al.Nitrated polycyclic aromatic hydrocarbon pollution during the Shanghai World Expo 2010[J].Atmospheric Environment,2014,89:242-248.

[2] 陶敬奇,王超英,李碧芳,等.固相微萃取-高效液相色谱联用分析环境水样中的痕量多环芳烃[J].色谱,2003,21(6):599-602.

[3] 罗世霞,朱淮武,张笑一.固相微萃取-气相色谱法联用分析饮用水源水中的 16 种多环芳烃[J].农业环境科学学报,2008,27(1):395-400.

[4] 李庆玲,徐晓琴,黎先春,等.固相微萃取-气相色谱-质谱联用测定海水和沉积物间隙水中的痕量多环芳烃[J].中国科学:B辑,2006,36(3):202-210.

[5] 王莉丽.城市污水中多环芳烃的测定方法及其去除特性研究[D].西安:西安建筑科技大学,2012.

[6] ARCE R,PINO E F,VALLE C,et al.Photophysics and photochemistry of 1-nitropyrene[J].Journal of Physical Chemistry A,2008,112(41):10294-10304.

[7] 占洁,杨颜,柳杜鹃,等.大气中硝基多环芳烃的研究进展[J].中国科学:地球科学,2012 (1):1-9.

[8] MURAHASHI T,ITO M,KIZU R,et al.Determination of nitroarenes in precipitation collected in Kanazawa,Japan[J].Water Research,2001,35(14):3367-3372.

[9] OHE T,NUKAYA H.Genotoxic activity of 1-nitropyrene in water from the Yodo River,Japan[J].The Science of the Total Environment,1996,181(1):7-12.

[10] PERRINI G,TOMASELLO M,LIBRANDO V,et al.Nitrated polycyclic aromatic hydrocarbons in the environment:formation,occurrences and analysis[J].Annali Di Chimica,2005,95(7/8):567-577.

[11] 马明生,徐晓白,康致泉,等.城市水样中首次检出痕量硝基多环芳烃(NO2-PAH)[J].环境化学,1994(6):543-549.

[12] 郭丽,惠亚梅,郑明辉,等.气相色谱-质谱联用测定土壤及底泥样品中的多环芳烃和硝基多环芳烃[J].环境化学,2007,26(2):192-196.

[13] SCHAUER C,NIESSNER R,POSCHLU.Analysis of nitrated polycyclic aromatic hydrocarbons by liquid chromatography with fluorescence and mass spectrometry detection:air particulate matter,soot,and reaction product studies[J].Analytical and Bioanalytical Chemistry,2004,378(3):725-736.

[14] DELHOMME O,HERCKES P,MILLET M.Determination of nitro-polycyclic aromatic hydrocarbons in atmospheric aerosols using HPLC fluorescence with a post-column derivatisation technique[J].Analytical and Bioanalytical Chemistry,2007,389(6):1953-1959.

[15] HAYAKAWA K.Environmental behaviors and toxicities of polycyclic aromatic hydrocarbons and nitropolycyclic aromatic hydrocarbons[J].Chemical & Pharmaceutical Bulletin,2016,64(2):83-94.

[16] STRAUBE E A,DEKANT W,VOLKELW.Comparison of electrospray ionization,atmospheric pressure chemical ionization,and atmospheric pressure photoionization for the analysis of dinitropyrene and aminonitropyrene LC-MS/MS[J].Journal of the American Society for Mass Spectrometry,2004,15(12):1853-1862.

[17] MILLER-SCHULZE J P,PAULSEN M,TORIBA A.Analysis of 1-nitropyrene in air particulate matter standard reference materials by using two-dimensional high performance liquid chromatography with online reduction and tandem mass spectrometry detection[J].Journal of Chromatography A,2007,1167(2):154-160.

[18] COCHRAN R E,SMOLIAKOVA I P,KUBATOVA A.Detection of nitrated and oxygenated polycyclic aromatic hydrocarbons using atmospheric pressure chemical ionization high resolution mass spectrometry[J].International Journal of Mass Spectrometry,2016,397:6-17.

[19] LIEN G W,CHEN C Y,WU C F.Analysis of polycyclic aromatic hydrocarbons by liquid chromatography/tandem mass spectrometry using atmospheric pressure chemical ionization or electrospray ionization with tropylium post-column derivatization[J].Rapid Communications in Mass Spectrometry,2007,21(22):3694-3700.

[20] TORIBA A,KITAOKA H,DILLS R L,et al.Identification and quantification of 1-nitropyrene metabolites in human urine as a proposed biomarker for exposure to diesel exhaust[J].Chemical Research in Toxicology,2007,20(7):999-1007.

[21] HUTZLER C,LUCH A,FILSER J G.Analysis of carcinogenic polycyclic aromatic hydrocarbons in complex enviromental mixtures by LC-APPI-MS/MS[J].Analytica Chimica Acta,2011,702(2):218-224.

[22] BARRETO R P,ALBUQUERQUE F C,NETTOA D P.Optimization of an improved analytical method for the determination of 1-nitropyrene in milligram diesel soot samples by high-performance liquid chromatography-mass spectrometry[J].Journal of Chromatography A,2007,1163(1/2):219-227.

DeterminationoftraceNitro-PAHsinwaterbyultraperformanceliquidchromatography-tandemmassspectrometry

XUE Hong-hai1,WANG Yu-wei1,2,WANG Ying1,CHEN Xi3,WEN Xue1,GAO Si-yu1,JI Ning1

(1.Key Laboratory of Songliao Aquatic Environment,Ministry of Education,Jilin Jianzhu University,Changchun 130118,China; 2.Beijing Zhongling Engineering Design & Consulting Co.Ltd,Beijing 100035,China; 3.Jilin Leading Real Estate Exploitation Ltd,Changchun 130117,China)

Using ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry equipped with atmospheric pressure chemical ionization ion source,this work established the quantitative analysis methods of two typical nitro polycyclic aromatic hydrocarbons,that is,1-nitropyrene and 1,8-dinitropyrene.The results showed that both 1-nitropyrene and 1,8-dinitropyrene could be determined directly under multiple reaction monitoring mode.Both 1-nitropyrene and 1,8-dinitropyrene displayed excellent linearity in the concentration range of 0.72~12 μg/L and 0.48~48 μg/L,the correlation coefficients of the calibration curve were 0.999 0 and 0.999 2.The average rates were in the rang of 97.67%~104.44% and 93.33%~103.13%.In addition,the limits of detection of 1-nitropyrene and 1,8-dinitropyrene were 0.21 μg/L and 0.15 μg/L,and the limit of quantitation were 0.72 and 0.26 μg/L respectively.

1-nitropyrene;1,8-dinitropyrene;ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS)

1000-1832(2017)04-0134-06

10.16163/j.cnki.22-1123/n.2017.04.025

2017-04-22

国家自然科学基金资助项目(41403101).

薛洪海(1984—),女,博士,副教授,主要从事环境化学研究;通讯作者:王颖(1978—),女,博士,副研究员、主要从事环境生态学研究.

X 132学科代码610·1015

A

(责任编辑:方林)

猜你喜欢

离子源硝基芳烃
硝基胍烘干设备及工艺研究
关于重芳烃轻质化与分离的若干思考
单电极介质阻挡放电离子源的消电子技术研究
高塔硝基肥,科技下乡助农丰收
九硝基三联苯炸药的合成及表征
轮胎填充油中8种多环芳烃的检测
高芳烃环保橡胶填充油量产
环保型橡胶填充油中芳烃及多环芳烃组成研究
Changes in feed intake,nutrient digestion,plasma metabolites,and oxidative stress parameters in dairy cows with subacute ruminal acidosis and its regulation with pelleted beet pulp
高频离子源形成的HD+离子束中H3+比例实测研究