乌司他丁联合胸腺肽对脓毒血症患者血清炎症因子、黏附因子及免疫细胞亚群的影响

韩林，熊滨

(广西壮族自治区人民医院，南宁530021)

乌司他丁联合胸腺肽对脓毒血症患者血清炎症因子、黏附因子及免疫细胞亚群的影响

韩林，熊滨

(广西壮族自治区人民医院，南宁530021)

目的探讨乌司他丁联合胸腺肽对脓毒血症患者血清炎症因子、黏附因子及免疫细胞亚群的影响。方法选择脓毒血症患者178例，根据治疗方法不同分为对照组58例、乌司他丁组60例、联合组60例，患者早期均给予广谱抗生素，容量复苏，小剂量激素，纠正水电解质紊乱，连续性血液净化治疗，乌司他丁组将乌司他丁300 000 U加入5%的葡萄糖溶液100 mL中静点，3次/d，治疗5 d。联合组在此基础上皮下注射胸腺肽，1.6 mg/次，2次/d，均连续5 d。观察三组治疗前后血清C反应蛋白(CRP)、降钙素(PCT)、肾上腺髓质前体(Pro-ADM)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-10、血栓调节蛋白(sTM)、血管性假血友病因子(vWF)、内皮素1(ET-1)水平变化及免疫细胞亚群CD4+、CD3+、CD8+、CD4+/CD8+变化。结果治疗后，三组血清CRP、PCT、Pro-ADM、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10、sTM、vWF、ET-1较治疗前均降低(P均lt;0.05)，CD4+、CD4+/CD8+、CD3+较治疗前均升高(P均lt;0.05)，尤以联合组为著，三组比较，P均lt;0.05。对照组及乌司他丁组CD8+虽较治疗前下降，但差异无统计学意义；联合组CD8+较治疗前下降(Plt;0.05)。结论乌司他丁联合胸腺肽治疗脓毒血症患者，可降低患者血清IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-10、Pro-ADM、sTM、vWF、ET-1水平，并调节CD4+、CD4+/CD8+、CD3+等免疫细胞亚群。

脓毒血症；乌司他丁；胸腺肽；肾上腺髓质前体；白细胞介素；免疫细胞亚群

脓毒血症[1]被定义为一类由感染或创伤导致微生物入侵，引起的全身性剧烈炎症综合反应，感染范围可波及全身，常引起重要组织器官功能损害，并由此出现一系列继发性的病理过程[2]，在发达国家，每70万脓毒血症患者中死亡21万人，病死率高达30%～70%[3]，我国ICU患者中脓毒血症发生率高达40%，平均病死率35%～75%，与发达国家流行病学结果一致[4]。针对脓毒血症，早期治疗是逆转疾病发展的关键[5]。乌司他丁具有调节炎症细胞因子，清除氧自由基作用，临床用于辅助治疗脓毒血症。胸腺肽为由胸腺组织分泌的一类多肽物质，具有调节免疫系统活性作用，通过诱导T 细胞分化来促进细胞因子的生成并完成B 细胞的免疫应答[6]。已有报道显示两者联合用于脓毒血症患者可显著降低病死率，而具体通过作用于哪些环节尚不明确[6]。2015年6月～2016年12月，我们观察了乌司他丁联合胸腺肽对脓毒血症患者血清炎症因子、黏附因子及免疫细胞亚群的影响。

1 资料与方法

1.1 临床资料 2015年6月～2016年12月于ICU住院的脓毒血症患者178例，根据治疗方法不同将其分为对照组58例，男32例、女26例，年龄(63.35±5.55)岁。APACHEⅡ评分(19.11±3.06)分。脓毒血症35例，重度脓毒血症16例，脓毒性休克7例。乌司他丁组60例，男34例、女26例，年龄(62.86±5.43)岁。APACHEⅡ评分(18.98±2.98)分。脓毒血症37例，重度脓毒血症16例，脓毒性休克7例。联合组60例，男35例、女25例，年龄(63.09±5.28)岁。APACHEⅡ评分(19.03±2.79)分。脓毒血症36例，重度脓毒血症17例，脓毒性休克7例。三组年龄、性别、APACHEⅡ评分、疾病严重程度分级等资料无统计学差异(P均gt;0.05)。纳入标准：按照美国胸科医师学会、危重病医学会共同制定的脓毒血症诊断标准[7]。排除标准：不符合诊断标准者；对本研究所用药物过敏者；合并恶性肿瘤、血液系统疾病或原发免疫系统疾病，合并急性传染性疾病。本研究经医院伦理委员会批准，患者本人或家属签署知情同意书。

1.2 治疗方法 所有患者早期给予广谱抗生素治疗，行体液培养选择敏感抗生素，根据患者不同基础情况于入院6 h内给予容量复苏，保持中心静脉压≥8 mmHg，监测血氧饱和度，保证吸氧，休克患者可行机械通气，静脉给予小剂量激素治疗，监测患者血糖情况，出现应激性高血糖给予胰岛素皮下注射，保持血糖lt;10 mol/L，同时纠正水电解质紊乱，维持酸碱平衡[8]。均给予连续性血液净化治疗：采用床旁血滤机(贝朗持续血液净化系统，型号7106505)，以连续性静-静脉血液过滤方式，2次/d，治疗3 d。乌司他丁组静脉输注乌司他丁(广东天普生化医药股份有限公司，批号031611323)；300 000 U加入5%的葡萄糖溶液100 mL中静点，3次/d，治疗5 d。联合组在此基础上皮下注射胸腺肽(成都地奥九泓制药厂，批号1612032)，1.6 mg/次，2次/d，均连续治疗5 d。

1.3 观察指标 三组治疗前后血清C反应蛋白(CRP)、降钙素(PCT)、肾上腺髓质前体(Pro-ADM)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平[8,9]。抽取患者空腹静脉血3 mL，CRP采用酶联免疫吸附法检测；PCT采用免疫比浊法检测；Pro-ADM采用化学发光免疫检测定量法，定义≥1.0 nmol/L为阳性；TNF-α采用酶联免疫吸附法检测。观察三组治疗前后白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素10(IL-10)的水平[7]，抽取患者空腹静脉血3 mL，均采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测。观察三组治疗前后血栓调节蛋白(sTM)、血管性假血友病因子(vWF)、内皮素1(ET-1)的水平变化[7]，抽取患者空腹静脉血3 mL，sTM vWF采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测，ET-1采用放射免疫法。观察三组治疗前后免疫细胞亚群变化，包括CD4+、CD3+、CD8+细胞及CD4+/CD8+，抽取患者清晨静脉血5 mL，采用流式细胞仪进行检测。

2 结果

2.1 三组治疗前后血清CRP、PCT、Pro-ADM、TNF-α比较 见表1。

表1 三组治疗前后血清CRP、PCT、Pro-ADM、TNF-α水平比较

注：与同组治疗前比较，aPlt;0.05;与对照组比较，bPlt;0.05;与乌司他丁组比较，cPlt;0.05。

2.2 三组治疗前后血清IL-6、IL-1β、IL-10水平比较 见表2。

表2 三组治疗前后血清IL-6、IL-1β、IL-10水平比较

注：与同组治疗前比较，aPlt;0.05;与对照组比较，bPlt;0.05;与乌司他丁组比较，cPlt;0.05。

2.3 三组治疗前后血清sTM、vWF、ET-1水平比较 见表3。

表3 三组治疗前后血清sTM、vWF、ET-1水平比较

注：与同组治疗前比较，aPlt;0.05;与对照组比较，bPlt;0.05;与乌司他丁组比较，cPlt;0.05。

2.4 三组治疗前后CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD3+水平比较 见表4。

表4 三组治疗前后CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD3+水平比较

注：与同组治疗前比较，aPlt;0.05;与对照组比较，bPlt;0.05;与乌司他丁组比较，cPlt;0.05。

3 讨论

脓毒血症发病机制复杂[10]，合并感染性休克后病死率可高达80%。脓毒血症伴有机体氧化应激、凝血障碍、免疫障碍及炎症反应，越来越多的临床证据指明脓毒血症发病过程中血管内皮细损伤引起凝血机制异常、免疫抑制等亦占有重要地位，早期炎症介质增多，机体为拮抗炎症反应，导致CD4 T淋巴细胞活化并释放大量抗炎因子，而这一过程很快被大量炎症介质破坏，导致机体出现免疫麻痹状态，即T淋巴细胞对其特异性抗原刺激不再敏感，开始出现细胞凋亡，而淋巴细胞凋亡可能与氧化应激反应和内源性糖皮质激素的释放相关。尸检发现脓毒血症患者体内免疫细胞显著降低，主要为CD4 T淋巴细胞[12]，减少程度与病情呈正相关。

脓毒血症的进展还与黏附因子密切相关，在炎症因子的刺激下血管内皮会出现损伤进而释放黏附因子并加速病情进展，vWF、sTM、ET-1均是血管内皮受损的重要标志，肾上腺髓质素(ADM)是一类具有广泛生物学作用的肽类物质，具有调节免疫、改善血管活性、抗菌等作用，Pro-ADM是其中间产物，可作为直接反映ADM的标志物，检测Pro-ADM变化可反映脓毒血症严重程度。IL-6具有促炎及抗感染双重作用，IL-1β是一类强促炎因子，上述细胞因子均由巨噬细胞及淋巴细胞释放，当血清IL-6升高时反映机体存在持续性炎症反应。IL-10是机体降炎细胞因子，主要由单核-巨噬细胞及CD4+T淋巴细胞释放，在体内表达晚于促炎因子，主要通过抑制TNF-α、IL-6等促炎因子发挥抑制机体炎症瀑布反应作用，但抗炎因子IL-10的过度抗炎会导致机体免疫应答被抑制。同时IL-6、IL-1等促炎因子升高到一定程度可诱导淋巴细胞尤其是CD4+T的凋亡。T细胞亚群是机体细胞免疫的主要群体，CD4+/CD8+主要反映机体细胞免疫状态，CD4+、CD4+/CD8+升高均提示免疫抑制被改善。因此在监测脓毒血症患者机体各类炎症因子来预测疾病的同时应监测机体免疫细胞功能，以反映疾病预后。

乌司他丁具有广泛的抗炎作用。周昌娥等[13]发现，乌司他丁联合血必净可显著降低脓毒血症患者IL-6、TNF-α，并抑制CD4+凋亡，改善脓毒血症患者免疫抑制。本研究发现乌司他丁组IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-10、Pro-ADM较对照组降低，差异有统计学意义，提示乌司他丁可降低脓毒血症患者促炎因子表达，与国内相关研究结果一致，但对患者CD4+、CD4+/CD8+、CD3+等免疫细胞亚群影响不显著。胸腺肽具有明显刺激淋巴细胞增殖、分化、成熟的作用，可增加抗原提呈细胞活性，韩宇等[14]研究发现，乌司他丁联合胸腺肽可调节患者免疫状态，抑制免疫细胞凋亡。本研究发现，联合组血清IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-10、Pro-ADM较对照组及乌司他丁组降低，差异有统计学意义，并对患者CD4+、CD4+/CD8+、CD3+等免疫细胞亚群调节作用显著。本研究结果发现，乌司他丁可降低血清sTM、vWF、ET-1水平，而联合胸腺肽治疗后血清sTM、vWF、ET-1水平下降更显著，差异有统计学意义，提示胸腺肽可抑制血管内皮损伤而延缓疾病进展。

综上所述，乌司他丁联合胸腺肽治疗脓毒血症患者，可降低患者血清IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-10、Pro-ADM、sTM、vWF、ET-1水平，并调节CD4+、CD4+/CD8+、CD3+等免疫细胞亚群。

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10.3969/j.issn.1002-266X.2017.41.031

R515.3

B

1002-266X(2017)41-0091-03

2017-07-01)