中药微生态制剂对奶牛隐性乳房炎乳汁相关指标的影响

2017-12-07寨鸿瑞

中国乳业 2017年11期

文/寨鸿瑞郭庆

文/寨鸿瑞1郭庆2*

（1 河南省开封市动物疫病预防控制中心；2 安徽科宝生物工程有限公司）

用乙醇溶液提取中药有效成分，接种乳酸杆菌、红茶菌和酵母菌，制备中药微生态制剂，选取某奶牛场经CMT法检测患有隐性乳房炎的泌乳奶牛，随机分成中药微生态治疗组、阳性对照组（不进行治疗）、健康对照组，治疗后第7天再用CMT检测乳汁，评价中药微生态制剂对乳汁相关指标的影响。结果显示：中药微生态制剂在试验0 天时，患隐性乳房炎奶牛与阴性对照组比，乳汁中体细胞数和电导率都极显著升高（P＜0.01），乳清中的白蛋白（ALB）、谷丙转氨酶（ALT）和乳酸脱氢酶（LDH）含量都极显著升高（P＜0.01）。通过7 天中药治疗后，中药治疗组与阳性对照组比，体细胞数、电导率、ALB、LDH和ALT含量差异显著（P ＜0.05），与阴性对照组比，体细胞数、电导率、ALB、LDH和ALT含量差异不显著（P＞0.05），结果表明：中药微生态制剂对奶牛隐性乳房炎有良好的治疗效果，其主要是能够使乳汁中的ALB、LDH和ALT含量降至正常值。

隐性乳房炎；中药；微生态制剂；乳汁；乳清

乳房炎是奶牛乳腺发生的一种炎症，是危害奶牛场最大、最常见、经济损失最严重的疾病之一，尤其是奶牛隐性乳房炎，由于其发病率高，无明显的临床症状，乳汁虽有变化但肉眼很难察觉，且随着病情的发展可能会变成临床型乳房炎[1，2]。近年来用中草药治疗奶牛乳房炎已成为热门的研究课题，并且已有中草药复方制剂、散剂、汤剂和中草药提取物制成注射剂，在奶牛乳房炎的防治方面发挥了重要作用[3～5]，目前，也有采用微生态制剂治疗奶牛隐性乳房炎的报道[6，7]，但都是单纯的采用益生菌制成微生态制剂。为了探索疗效显著、简单易行、经济实用的中药疗法，以克服其它疗法的弊端。本试验以中兽医理论为基础，筛选出对奶牛乳房炎有效的中药，经过科学组方，提取有效成分，接种乳酸杆菌、红茶菌和酵母菌，发酵后制成中药微生态制剂，直接给奶牛饮用，通过测定用药前后乳汁中体细胞数、电导率、白蛋白（ALB）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、乳酸脱氢酶（LDH）相关指标的影响，以评价其对奶牛隐性乳房炎治疗效果。

1 材料与方法

1.1 药品与试剂

杜仲叶、银杏叶、紫苏、白头翁、紫锥菊、葎草、虾壳、黄芪、甘草购于淮北市养生堂大药房；CMT诊断液购于西安麦得法药业有限公司；乳酸杆菌、红茶菌和酵母菌购于徐州市献华生物科技有限公司；ALB、ALT、和LDH试剂盒均购于上海士锋生物科技有限公司；乙醇等化学试剂均为分析纯。

1.2 仪器

HH-4数显恒温水浴锅、恒温磁力搅拌器、RE-5001旋转蒸发仪、DL-360B超声波清洗器、迈瑞BA-90半自动生化分析仪、高速冷冻离心机、CONscan40型数显电导率仪。

1.3 中药微生态制剂的制备工艺

将杜仲叶、银杏叶、紫苏、白头翁、紫锥菊、葎草、虾壳、黄芪、甘草等按比例准确称取，用80%乙醇浸泡30 min（料液比1:10），然后超声15 min，回流提取，第一次2 h，用16 层纱布过滤倒出药液。药渣再加60%乙醇（料液比1:8），第二次1 h，倒出药液，合并2 次滤液，旋转蒸发至无醇味，向浓缩液中加纯化水至1 g/mL生药。以1 000 g浓缩液加15 g的白糖加热煮沸5 min，降至常温无菌室内接种乳酸杆菌、红茶菌和酵母30 g，37 ℃发酵72 h，即得中药微生态制剂，4 ℃保存备用[8]。

1.4 乳汁中体细胞数和电导率的测定

参照《奶牛病学》[9]中的方法检测体细胞数，用CONscan40型数显电导率仪测定乳汁的电导率。

1.5 乳清中 ALB、ALT和LDH含量的测定

3 000 r/min离心乳汁除去乳脂，然后12 000 r/min离心，取上清液4 ℃保存，备用。采用迈瑞BA-90半自动生化分析仪测定乳清中ALB、ALT和LDH含量，按试剂盒说明书进行测定。

1.6 试验动物的分组与采样

选取某奶牛场的泌乳奶牛若干头。严格消毒，弃去前三把乳汁，应用CMT诊断液进行诊断，根据付秀花、王恬的方法[10]判定患有隐性乳房炎的泌乳奶牛。经CMT检测患有隐性乳房炎的奶牛30 头，随机分成中药治疗组（Ⅰ组，20 头65 个乳区）与阳性对照组（Ⅱ组，10 头26 个乳区）；另选10 头健康奶牛作为阴性对照组（Ⅲ组，40 个乳区）。中药治疗组奶牛自由饮用中药微生态制剂，3 次／天，阳性对照组不用药，健康对照组饮用5 倍稀释后的中药微生态制剂，用药7 天后，采取乳样进行分析。同时比较用药第0天和用药后第7天的各组乳汁指标的变化。

1.7 数据处理

应用SPSS 18.0统计软件，对试验数据进行分析。

2 结果

2.1 中药微生态剂乳汁中体细胞数和电导率的影响

由表1可以知，在治疗前，Ⅰ、Ⅱ组奶牛乳汁中的体细胞数、电导率与Ⅲ组相比差异极显著（P＜0.01）。通过中药微生态制剂治疗7 天后，Ⅰ组奶牛乳汁中的体细胞数、电导率与Ⅱ组相比差异极显著（P＜ 0.01），与Ⅲ组相比差异不显著（P＞ 0.05）；Ⅱ组奶牛乳汁中的体细胞数、电导率与Ⅲ组相比差异极显著（P＜ 0.01）（表1）。

表1 中药微生态制剂对奶牛隐性乳房炎体细胞数和电导率的影响

表2 中药微生态制剂对隐性乳房炎患牛乳清中ALB、LDH、ALT含量的影响

2.2 中药微生态制剂对隐性乳房炎患牛乳清中ALB、ALT和LDH含量的影响

由表2可知，在治疗前，Ⅰ、Ⅱ组奶牛乳清中ALB、ALT和LDH含量与Ⅲ组相比差异极显著（P ﹤0.01）。通过中药微生态制剂治疗7 天后，Ⅰ组奶牛乳清中ALB、LDH、ALT与Ⅱ组相比差异显著（P﹤0.05），与Ⅲ组相比差异不显著（P ＞0.05）；Ⅱ组奶牛乳清中的ALB、LDH、ALT与Ⅲ组相比差异极显著（P ﹤0.01）（表2）。

3 讨论

由试验结果可以看出，让患有隐性乳房炎的奶牛连续饮用7 天中药微生态制剂后，乳汁体细胞数下降比较明显，治疗组由153.58 万个/mL降到48.13 万个/mL，降低乳汁体细胞数明显，而阳性对照组变化不大，阴性对照组体细胞数下降，说明中药微生态制剂对奶牛隐性乳房炎具有较好的预防作用。中药微生态制剂防治隐性乳房炎的途径，可能是乳酸菌与肠道菌群建立有益菌的生长，减少有害菌群的产生，促进营养物质的吸收，加强机体防御能力，也可能是中药中的有效成分能够清除氧自由基，修复被损伤的乳腺细胞等。将中药和有益菌放在一起进行发酵制成微生态制剂，能够起到协同作用。但其作用机理还有待深入研究。

在中药微生态制剂配方中，紫苏、白头翁、杜仲叶、银杏叶等均有清热解毒、活血化瘀的功能，黄芪、甘草等均具有增强机体免疫力的作用[11]，乳酸菌是良好的免疫激活剂，能够增强奶牛免疫功能，激活巨噬细胞活性，提高奶牛抗体水平和免疫球蛋白水平，提高抗病力和抗应激能力，有效预防金黄色葡萄球菌等有害菌的感染，降低乳房炎发病率[12，13]。本试验结果表明，中药微生态制剂对患有隐性乳房炎奶牛有良好的治疗效果，ALB、ALT和LDH含量达到正常的水平，与阴性对照组相当。这为临床应用提供了试验数据，但其具体作用机制有待进一步探讨。C

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