超高液相色谱法测定黄瓜中的4种苯并咪唑类农药残留量

2017-12-06孟繁磊宋志峰张振都何智勇蔡红梅魏春雁

吉林农业 2017年22期

关键词：硫菌苯并咪唑多菌灵

孟繁磊，宋志峰，张振都，何智勇，蔡红梅，魏春雁

（吉林省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所；农业部农产品质量安全风险评估实验室（长春），吉林长春130033）

超高液相色谱法测定黄瓜中的4种苯并咪唑类农药残留量

孟繁磊，宋志峰，张振都，何智勇，蔡红梅，魏春雁*

（吉林省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所；农业部农产品质量安全风险评估实验室（长春），吉林长春130033）

建立检测黄瓜中的多菌灵、噻菌灵、甲基硫菌灵、2-氨基苯并咪唑残留量的超高液相色谱方法。黄瓜样品用乙腈匀浆提取，盐析净化后，经C18柱分离，甲醇—水体系为流动相进行梯度洗脱，可调波长检测器分别在275nm、265nm、300nm和275nm处检测，保留时间定性，外标法定量。结果4种农药在1~100mg/L的范围内线性关系良好（r2=0.9987~0.9992）。该方法前处理步骤简单，分析速度快，能够满足农残分析的要求。

超高液相色谱法；黄瓜；农残

多菌灵等苯并咪唑类农药是常用的低毒杀菌，能防治多种作物病害，在农业生产中广泛使用。已报道的苯并咪唑类农药分析方法有分光光度法[1-2]、气相色谱法[3]、液相色谱法[4-5]、液相色谱串联质谱法[6-7]等。本研究在总结各种方法的基础上，结合本实验室条件，筛选出适合黄瓜中4种苯并咪唑类农药前处理及检测方法，同时为检测其他基质上4种农药残留提供技术支持。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

超高液相色谱仪：Waters公司；旋转蒸发仪：德国 IKA公司；涡旋混匀器：德国IKA公司；

乙腈、甲醇、丙酮：色谱级，赛默飞世尔科技公司；无水硫酸镁：分析纯，广州分析试剂厂；N-丙基乙二胺（PSA）、C18：美国安捷伦公司。

多菌灵、噻菌灵、甲基硫菌灵、2-氨基苯并咪唑：纯度≥98%，北京坛墨质检科技有限公司。

1.2 色谱条件

色谱柱：ACQUITYUPLCBEHC18（100×2.1mm，1.7μm）；流动相：甲醇溶液+水（40+60）；流速：0.5mL/min；柱温：40℃；进样量：5μL。检测波长，见表1。

表1 检测波长切换表

1.3 标准曲线的绘制

分别称取0.01g多菌灵、噻菌灵、甲基硫菌灵、2-氨基苯并咪唑，用丙酮溶解定容至100mL，摇匀，零下18℃保存。然后用流动相配制成浓度分别为 1mg/L、2mg/L、5mg/L、10mg/L、100mg/L的混合标准工作液。混合标准溶液的色谱图，见图1。

1.4 样品处理

1.4.1 提取称取20g试样于具塞离心管中，加入25mL乙腈，10000r/min高速匀浆2min，加入无水硫酸镁和氯化钠的混合物（质量比 1∶1）15g，盖上盖子剧烈振摇 1min，5000r/min离心5min，使乙腈和水分层。

1.4.2 净化移取上层乙腈1mL置于预先加有50mgPSA、50mgC18、150mg无水 MgSO4的2mL离心管内，2000r/min涡旋2min，5000r/min离心5min，取上层清液0.5mL，加入 0.5mL超纯水中，过0.22μm的滤膜，供UPLC分析。

2 结果与分析

2.1 检测波长的确定

通过紫外分光光度计对多菌灵、噻菌灵、甲基硫菌灵、2-氨基苯并咪唑标准品的扫描，确定了最大吸收波长分别在275nm、265nm、300nm、275nm处。

图1 4种苯并咪唑类农药标准品的色谱图

2.2 线性关系和检出限

将1.3中的混合标准工作液按照1.2的色谱条件进行测定，峰面积为纵坐标（y），浓度 C（mg/L）为横坐标（x）绘制工作曲线，以信噪比（S/N）=3时的测定浓度为测定低限，结果见表2。结果表明，4种农药的浓度与对应的峰面积呈良好的线性关系，相关系数在0.9987~0.9996之间，测定低限不大于0.1mg/kg。

表2 4种苯并咪唑类农药的回归方程、线性范围和测定低限

2.3 方法的回收率与精密度

本试验采用加标的方式来进行回收率的测定。称取18份空白黄瓜基质，加入不同浓度的混合标准工作溶液，进行回收率和重复性实验，每个添加浓度平行测定6次，按照1.4进行样品处理、1.2色谱条件测定，结果见表3。4种苯并咪唑类农药的回收率为86.89%~100.21%，RSD为1.98%~5.26%，表明该方法提取测定黄瓜中的4种苯并咪唑类农药准确可行及重复性良好。