1%甲基硫菌灵糊剂的高效液相色谱法测定

2014-12-31曲鹏晶

山西化工 2014年5期

曲鹏晶

（1.山西省应用化学研究所，山西太原 030027；2.山西省化肥农药产品质量监督检验站，山西太原 030027）

引言

甲基硫菌灵是一种农用的广谱性内吸低毒杀菌剂，具有内吸、预防和治疗作用。1%甲基硫菌灵糊剂是由甲基硫菌灵原药与适宜的填料、助剂和水加工制成的杀菌剂。甲基硫菌灵糊剂作为一种新的剂型农药，外观呈均匀的糊状物，用以防治苹果树腐烂病、轮纹病及干腐病等，效果明显，深受广大用户的好评［1］。

目前，1%甲基硫菌灵糊剂的测定没有相应的国家标准或国家行业标准，亦未检索到采用本实验所用样品处理分析实验条件的报道。本文采用反相高效液相色谱法测定甲基硫菌灵含量。实验结果表明，该方法甲基硫菌灵在一定的质量浓度范围内呈良好线性关系，平均回收率为99.35%，相对标准偏差为2.930 7%。该方法简便、准确可行、灵敏度高。

1 实验部分［2－5］

1.1 方法提要

试样用甲醇溶解，以V（甲醇）＋V（水）＝70＋30为流动相，采用C18反相色谱柱和紫外可变波长检测器，在275nm波长下，对试样中的甲基硫菌灵进行高效液相色谱分离和测定，以外标法定量。

甲基硫菌灵化学名称：1，2－二（3－甲氧碳基－2－硫脲基）苯。

甲基硫菌灵结构式：

1.2 试剂与仪器

甲醇，色谱纯，天津市大茂化学试剂厂；

水，新蒸二次蒸馏水，自制；

甲基硫菌灵标样，已知准确质量分数，≥98.0%，沈阳化工研究院；

1%甲基硫菌灵糊剂试样，山西省应用化学研究所、山西北方果康宝农药有限公司。

高效液相色谱仪，SY8000（具可变波长紫外检测器）；

数据处理机；

色谱柱，SinoChorm ODS－BP，200mm×4.6mm（i.d.）不锈钢柱，内装C18填充物，5μm；

磨口烧瓶，25mL；

水浴恒温振荡器，SHA－C，金坛市白塔金昌实验仪器厂；

超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司；

过滤器，滤膜孔径约0.45μm。

1.3 高效液相色谱操作条件

流动相，V（甲醇）＋V（水）＝70＋30，经0.45μm微孔滤膜过滤后脱气20min；

流速，1.0mL／min；

柱温，室温±2℃；

检测波长，275nm；

进样体积，10μL；

保留时间，甲基硫菌灵约6.2min。

上述液相色谱操作参数是典型的，可根据不同仪器的特点对给定操作参数作适当调整，以期获得最佳效果。

1.4 实验方法

1.4.1 标样溶液的配制

称取甲基硫菌灵标样0.05g（精确至0.000 2g）于50mL容量瓶中，用甲醇溶解稀释并定容，摇匀，用0.45μm孔径过滤器过滤，备用。

1.4.2 试样溶液的配制

称取含甲基硫菌灵0.05g（精确至0.000 2g）的试样于50mL容量瓶中，先加入适量甲醇溶液，超声提取10min，再用甲醇稀释并定容，摇匀静置，用0.45μm孔径过滤器过滤，取清液备用。

1.5 测定

1.3操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各针相对响应值的重复性。待相邻2针甲基硫菌灵的相对响应值变化小于1.5%时，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。

1.6 计算

将测得的2针试样溶液以及试样前、后2针标样溶液中甲基硫菌灵的峰面积分别进行平均。试样中甲基硫菌灵的质量分数X（%）按式（1）计算。

式中：A1为标样溶液中甲基硫菌灵峰面积的平均值；A2为试样溶液中甲基硫菌灵峰面积的平均值；m1为甲基硫菌灵标样的质量，g；m2为试样质量，g；P为甲基硫菌灵标样的质量分数，%；2为稀释换算系数。

1.7 液相色谱图

甲基硫菌灵标样和1%甲基硫菌灵糊剂试样的高效液相色谱图见图1和图2。

2 结果与讨论

2.1 萃取有机溶剂及流动相的选择

图1 标样溶液中甲基硫菌灵的液相色谱图

图2 1%甲基硫菌灵糊剂试样溶液中甲基硫菌灵的液相色谱图

对于1%甲基硫菌灵糊剂的萃取，我们选用不同的有机溶剂混合浸取进行测试，最后选定甲醇溶剂。样品经浸泡、振荡、超声处理，分离效果最好。分别试用不同比例的甲醇－水作为流动相对试样进行分离检测，发现体积比为55∶45比较合适，得到了分离完全、峰型对称、尖锐的甲基硫菌灵色谱峰。同时，为了使甲基硫菌灵的保留时间适当，采用1.0mL／min的流速进行分析。

2.2 检测波长的选择

经200nm～290nm紫外波长范围内对标样溶液进行扫描发现，在222nm处甲基硫菌灵有较强吸收峰，最终选定275nm作为检测波长。

2.3 分析方法的线性相关性测定

在1.3色谱条件下，分别配制5个不同浓度的甲基硫菌灵标样溶液，按上述液相色谱条件进样，每个浓度分析2次，求其峰面积的平均值。以甲基硫菌灵质量浓度为横坐标、甲基硫菌灵峰面积为纵坐标，绘出线性关系图（见表1和图3）。甲基硫菌灵的线性方程为y＝6 375.2x－1 691.8，相关系数为r＝0.996 2。

表1 线性相关实验数据

图3 甲基硫菌灵的线性关系图

2.4 分析方法的精密度实验

按实验方法，对同一样品中的甲基硫菌灵质量分数进行5次平行测定，并进行标准偏差及相对标准偏差的统计运算，结果见表2。由表2得到，本方法对同一样品中甲基硫菌灵分析的标准偏差为3.245×10－2，相对标准偏差为2.930 7%。

表2 精密度测定数据

2.5 方法的准确度实验

在一已知准确质量分数的试样中加入不同质量的甲基硫菌灵标样，按实验方法进行衍生化处理后进样分析，测定本方法的加标回收率。实验数据见表3。测得甲基硫菌灵的回收率在97.10%～102.27%，平均回收率为98.26%。可见，本实验方法的准确度能满足定量要求。

3 结论

采用高效液相色谱法测定1%甲基硫菌灵糊剂中甲基硫菌灵含量，在实验的色谱条件下得到良好的分离，检测波长222nm，流速1.0mL／min。该方法甲基硫菌灵在一定的质量浓度范围内呈良好线性关系，甲基硫菌灵的平均回收率99.35%，相对标准偏差2.930 7%。该方法简便、准确可行、灵敏度高，适用于产品的质量控制和检验分析。