金峡桃叶橙品比试验研究

吴黎明+蒋迎春+何利刚+王志静+仝铸+孙中海+许淼+吴述勇+廖胜才+王菊平

摘要：通过在宜昌秭归桃叶橙试验基地群体选优，从桃叶橙18号中选育出一个少核优良品种金峡桃叶橙。为揭示该品种的来源，对其在秭归进行了连续3年的品比试验研究。结果表明，该品种在果实种子数量上显著少于桃叶橙18号，且在枝、叶、花、果和产量等方面都与对照品种桃叶橙18号在部分数量性状上存在一定的差异，但其生物学特性和结果习性则基本与对照相同，通过对两个品种的性状描述比较和DNA分子鉴定，可以证明金峡桃叶橙为桃叶橙18号的大果型少核芽变品种，它既保持了桃叶橙18号的优良品质，又具备了少核性狀，是桃叶橙18号比较理想的优良芽变品种。

关键词：桃叶橙[Citrus sinensis （Linn.） Osbeck cv. Taoyecheng]；少核；芽变；结果习性；生物学特性

中图分类号：S666.4 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2017）21-4076-05

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.21.020

Variety Comparative Test on Jinxia Taoye Orange

WU Li-ming1，JIANG Ying-chun1，HE Li-gang1，WANG Zhi-jing1，TONG Zhu1，SUN Zhong-hai1，

XU Miao1，WU Shu-yong2，LIAO Sheng-cai2，WANG Ju-ping2

（1.Institute of Fruit and Tea，Hubei Academy of Agricultural Sciences/Fruit and Tea Branch，Hubei Innovation Center of Agricultural Science and Technology，Wuhan 430064，China； 2.Zigui Specialty Technology Extension and Service Center，Zigui 443600，Hubei，China）

Abstract： Through large-scale bud mutant selection in citrus test demonstration base of Zigui county，Yichang city，a new few-seediness sweet orange strain named Jinxia Taoye orange was selected from Taoye orange No. 18. To reveal the source of the new sweet orange，variety comparative test on the new strain had been conducted for three years in Zigui area. The results showed that seed numbers of the new strain were significantly less than that of the control，and the fractional quantitative trait performance of shoots，leaves，flowers，fruits and yield of the new strain were founded some differences with those of the control. However，the biological characteristic and bearing habit were almost the same between them. Through the cultivar character comparison and DNA molecular identification， it can be proved that the new strain is probably a bud mutant of large few-seediness-fruited cultivar. Because of its excellent fruit quality and large & few-seediness character，it should be a rather ideal new strain of sweet orange germplasm.

Key words： Taoye orange[Citrus sinensis （Linn.） Osbeck cv. Taoyecheng]； few seediness； bud mutant； bearing habit； biological characteristics

桃叶橙是湖北省的一个优良地方柑橘良种资源，叶片狭长似桃叶，与其他普通甜橙品种的叶片迥异，故名“桃叶橙”。早在20世纪50-60年代，湖北省农业科学院果树茶叶研究所科研人员就在秭归县龙马溪村开展了实生甜橙的选育工作，鉴定和选育出多个桃叶橙优良单株，这些优良单株通过嫁接扩繁，逐步形成了现今生产中的桃叶橙品系，其中桃叶橙18号品系果实肉质细腻，高糖低酸，汁多化渣，富玫瑰香气，具有甜、香、脆的独特风味，鲜食品质极佳[1]。一直以来，秭归桃叶橙深受广大种植者和消费者的青睐，但其美中不足的是果实种子偏多，平均每果种子14.4粒。为了改良桃叶橙品种，有必要进行桃叶橙的选优，从中选育出保持其原有优良性状的少核或无核甜橙新优系。金峡桃叶橙为2008年从桃叶橙18号中发现的少核芽变单株，近几年来，以桃叶橙18号为对照，在秭归屈原镇长江村建立了金峡桃叶橙品比试验示范园，并对其少子性状、植物学特性、生物学特性、结果习性、综合品质以及该品系的分子鉴定进行了研究。endprint

1 材料与方法

1.1 试验材料及立地条件

试验地选择在秭归县屈原镇长江村清滩滑坡遗址桃叶橙试验园，选高接换种的四年生金峡桃叶橙和对照品种桃叶橙18号各30株，其中中间砧为普通甜橙，基砧为红橘。试验园地处长江三峡河谷地区。海拔220 m，亚热带湿润季风气候，年平均温度17 ℃，年平均日照时数1 620 h，≥10 ℃年积温5 500 ℃，年平均降雨量1 200 mm，年无霜期310 d。沙壤土，pH 5.8，肥力中等。株行距为2.0 m×3.0 m，果园间作绿肥，樹盘清耕，配方施肥，整形修剪及病虫害等综合栽培技术参照DB 42-T077-2011[2]实施。

1.2 调查和测定方法

1.2.1 植物学性状观察 参照文献[3]以及文献[4]的方法进行。

1.2.2 生物学特性观察 采用机械抽样法测定各品种的生物学特性，即每小区每品种选取长势相当的代表株3株，高接树龄均为四年生，调查试验园内各品种生长发育规律和树体的结构状况，调查内容包括物候期、树形、树高、冠幅、干粗和新梢生长量。

1.2.3 结果习性观察 选择树体长势一致的金峡桃叶橙和对照桃叶橙18号试验高接树，高接树龄为4年，单株小区，每小区每品种随机选取3株，于当年生枝梢（春、夏、秋梢）顶芽自剪后随机选取30个，调查并记载各季抽生的枝数及其长度、粗度和叶数，统计各次梢比例。同时于定果后调查各品种（系）结果母枝类型及比例，并进行结果枝类别的记载，统计两个品种有叶结果枝和无叶结果枝着果数及其占总果数的比例。

1.2.4 品质分析 金峡桃叶橙和桃叶橙18号果实品质分析于果实成熟后进行，连续分析测定3年。主要测定果实的可溶性固形物（TSS）、可滴定酸（TA）、固酸比（TSS/TA）、可食率、平均单果重、果形指数、平均每果种子数等，参照有关国家标准，可溶性固形物用手持测糖仪测定，可测定酸含量以0.1 mol/L标准NaOH溶液滴定，再换算为柠檬酸含量[5]。

1.2.5 遗传稳定性分析及品种鉴定 对桃叶橙群体资源进行筛选评价[6]，采用AFLP分子标记方法[7]对金峡桃叶橙进行遗传鉴定，与桃叶橙18号进行指纹图谱比较分析，以进一步确定其芽变亲本。

2 结果与分析

2.1 金峡桃叶橙母株的发现及高接扩繁

2009-2010年在秭归屈原镇桃叶橙基地进行大规模群体选优，并通过广大群众的参与寻找较好芽变单株，共初选了具有优良经济性状的单株3个，表现出少核性状，命名为WSF40、DYL63和WGH01，通过进一步观察发现，编号WSF40表现更为优良，属于桃叶橙中的少核大果类型，命名为金峡桃叶橙。其母树树龄30余年生，树高3.35 m，冠幅3.65 m×4.25 m。果实平均单果重152.9 g，每果平均种子数4.3粒，大大低于桃叶橙18号的种子数每果14.4粒，其果实品质较优，保持了桃叶橙18号的优良风味，初步推断为桃叶橙18号芽变。确定优系后，随后进行了高接扩繁，在秭归屈原镇长江村清滩滑坡遗址建立了金峡桃叶橙2 000 m2的品比试验示范园，并连续3年进行了观察记载和品质测定，结果表明该品系少核性状遗传稳定，品质优良，确定为甜橙中的优良芽变品种。

2.2 植物学特性比较

在高接品比示范园，于2011年和2012年对金峡桃叶橙和对照桃叶橙18号的花、春梢、春叶及果实纵横径进行测量，结果见表1。金峡桃叶橙和桃叶橙18号树姿均直立，树势均强，树冠自然圆头形。从表1中可见，金峡桃叶橙春梢粗度、春梢节间较对照桃叶橙18号大，果形指数稍大，果实高桩形。另外，据观察，在花的类型中，金峡桃叶橙有正常花和露柱花两种，并均占有一定比例，有的年份露柱花比例占到20%左右，这与对照桃叶橙18号以正常花占据绝对优势有很大不同。因此，金峡桃叶橙在叶、花、果数量性状方面均与对照存在一些差异。

2.3 生物学特性比较

2.3.1 物候期 金峡桃叶橙和桃叶橙18号的物候期大致相近，在秭归地区，通过连续3年的观察，均在3月中下旬开始萌芽生长，春梢开始生长在4月初，现蕾期在4月中旬，初花期在4月21-24日，盛花期在4月25-29日，末花期在4月30日至5月4日，第一次生理落果期在5月中旬，第二次生理落果期在6月中旬至7月上旬，夏梢开始生长在6月下旬，秋梢开始生长在8月中旬，果实着色期在11月上旬，成熟期在12月上旬。

2.3.2 生长发育特性 通过调查金峡桃叶橙和对照桃叶橙18号树体生长情况包括各次梢生长量（表2、表3），结果表明，四年生金峡桃叶橙的树体生长势和生长量各项指标比对照桃叶橙18号略高或相当，尤其春梢生长量（18.94 cm）明显高于对照（12.61 cm），表现出初结果树较旺的生长势。新品种金峡桃叶橙生长量较大，抽发新梢能力较强，每大枝抽发秋梢数为12.9个，高于桃叶橙18号抽枝力（10.2个/枝）。在着果数和产量方面，金峡桃叶橙高于对照，显示了优良单株的优良结果能力。

2.4 结果习性比较

在秭归品比试验园，于2012年通过调查金峡桃叶橙和对照桃叶橙18号品种的各次梢数量和比例、春秋梢成为结果母枝数量和比例、结果枝类型和比例以及坐果率。结果表明，金峡桃叶橙和对照桃叶橙18号在结果母枝类型方面，均以春秋梢作结果母枝（表4），尤其以当年生秋梢为主，其中秋梢占总结果母枝数的比例分别达到61.9%和65.0%，春梢比例分别为38.1%和35.0%，当年抽发的夏梢基本不作次年的结果母枝。春梢结果母枝长度以10～20 cm、粗度0.2～0.4 cm为好，秋梢结果母枝长度以20～25 cm、粗度0.3～0.5 cm为好。成花能力强，一般为单花，少数花为伞形花序。在结果枝类型方面，据观察，金峡桃叶橙有两种结果枝：有叶结果枝和无叶结果枝，其中以有叶结果枝（有叶顶花枝和有叶花序枝）为主（表5），所占总果枝数比例达到70.4%，与对照桃叶橙18号（65.9%）相当。且着果率高，特别着生叶片的春梢有叶顶花枝着果率更高，可达到5.0%以上，无叶花枝和花序枝着果率较低，在1%以下，平均着果率2.80%，与桃叶橙18号（2.81%）相近。endprint

2.5 果实主要经济性状比较

2.5.1 产量性状比较 从表2可以看出，四年生金峡桃叶橙高接树平均株产达到30.50 kg，而对照桃叶橙18号平均株产为24.18 kg，前者显著高于后者，表明金峡桃叶橙新品种具有较好的丰产性能。

2.5.2 品质性状比较 于2011-2013年连续3年对金峡桃叶橙和对照桃叶橙18号进行果实品质测定和方差分析（表6），结果表明，金峡桃叶橙和对照桃叶橙18号的外在品质方面，前者平均單果重为152.9 g，果形指数为0.98，均高于后者（两项指标分别为127.4 g和0.94），且单果重差异达显著水平；另外，两者每果种子数相比，金峡桃叶橙为4.3粒，显著低于对照（14.4粒），比对照减少了70.1%。在内在品质方面，两个品种（系）的可食率、可溶性固形物（TSS）含量、可滴定酸（TA）含量、固酸比（TSS/TA）均相当，差异不显著，两者TSS含量高，均在12%以上，可滴定酸含量平均0.6%左右，低酸，固酸比高，保持着较好的风味，综合比较，两者内在品质均较优良。通过内外品质性状比较和分析发现，金峡桃叶橙较对照桃叶橙18号果实显著增大，种子数显著减少，并保持和具备了对照桃叶橙18号优良的内在品质和浓郁的风味，属于大果、少子、高品质甜橙类型，为甜橙中的优良芽变。

2.6 品种性状描述比较

通过对金峡桃叶橙和对照桃叶橙18号植株、叶片、果实、种子的观察，并进行其主要形态特征的描述（表7），可以看出，金峡桃叶橙与对照桃叶橙18号大部分品种性状描述一致，只在种子的数量和质量、果重、果形指数、果皮厚度、果实品质等数量性状方面存在变异，另外，花的类型也存在少量变异（表1），因此，从外观形态上可以鉴定金峡桃叶橙品种为甜橙的优良变异。

2.7 金峡桃叶橙的芽变AFLP分子鉴定

在对金峡桃叶橙和对照桃叶橙18号进行AFLP指纹图谱分析时，从64对引物组合中进行筛选，共筛选出6对合适的引物组合：E-ACT/M-CAA、E-ACT/M-CTT、E-ACC/M-CAA、E-ACG/M-CAA、E-AGC/M-CAA、E-AGC/M-CAC，对其进行扩增，部分引物扩增结果如图1、图2所示，在286个位点扩增出条带，平均每对引物组合扩增位点为47.7个，其中多态性位点48个（表8），占总扩增位点比例为16.78%，平均每对引物组合扩增多态性位点为8个，两个品种存在遗传上的差异。对参选的23份桃叶橙资源扩增结果应用Ntsys软件进行UPGMA聚类（图3），结果表明，桃叶橙各单株（包括杂交亲本及子代）在相似系数为0.28～0.67水平上聚类，新品种金峡桃叶橙与桃叶橙18号较为临近，具有较近的遗传关系，可以证明金峡桃叶橙为桃叶橙18号的营养系后代。

3 小结与讨论

通过多年调查和测定新品种金峡桃叶橙和对照桃叶橙18号的植物学性状和生长结果习性，研究表明，金峡桃叶橙为桃叶橙18号的芽变品系，在种子数、果实形状大小及花的部分数量性状存在变异，即种子数显著减少，果实等器官较大，花器官中露柱花比例较高，初结果树的树体生长势和生长量较强。但两者主要物候期和植物学性状相近，结果习性相似，产量无显著差异，丰产性好，果实品质与对照基本相当。两者通过AFLP分子标记鉴定，进一步证实了金峡桃叶橙为桃叶橙18号的芽变后代。

金峡桃叶橙和对照桃叶橙18号均以春秋梢作结果母枝，从数据上看，以当年生秋梢为主，其中秋梢占总结果母枝数量超过60%，但春梢也占据一定比例，因此管理上要求在春梢萌芽前施适量催芽肥，培养适量的优质春梢，以促进形成立体结果，提高产量。在结果枝方面，金峡桃叶橙存在有叶结果枝和无叶结果枝两种结果枝，其中以有叶结果枝（有叶顶花枝和有叶花序枝）为主，所占总果枝数比例超过70%，着果率较高（5%以上），因此在花量较大的年份，针对这种花序状果枝较多时，可以疏剪一部分，也可以在7月定果后采取疏果技术[8]，以减少着果数量，增加果实单果重量，提高果实品质。

另外，金峡桃叶橙在栽培过程中，采取规模化种植方式，区域化发展，避免品种混栽，有利于该品种少核特性的发挥，同时可以保证品种纯度，提高品种市场竞争力。老旧果园可以采取高接换种方式快速推广，两年结果，3年投产。果实在12月上旬可完全成熟，推荐完熟采收或果实留树保鲜，可以充分体现味甜、清香、质脆化渣以及果面橙红光洁的优良遗传特性。

参考文献：

[1] 向长海.秭归开展桃叶橙优良单株选育[J].中国果业信息，2009（12）：44.

[2] DB 42/T 077-2011，甜橙栽培技术规程[S].

[3] NY/T 2435-2013，植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南 柑橘[S].

[4] 江 东，龚桂芝，洪棋斌.柑橘种质资源描述规范和数据标准[M].北京：中国农业出版社，2006.53-66.

[5] 李锡香.新鲜果蔬的品质及其分析法[M].北京：中国农业出版社，1994.208-209.

[6] 何利刚，蒋迎春，吴黎明，等.桃叶橙资源筛选评价及分子鉴定[J].湖北农业科学，2012，51（21）：4823-4826.

[7] 廖振坤，张秋明，刘卫国，等.利用AFLP鉴定柑橘芽变[J].果树学报，2006，23（3）：486-488.

[8] 吴黎明，蒋迎春，何利刚，等.疏果对桃叶橙果实品质的影响及效益分析[J].中国南方果树，2015，44（6）：34，37.endprint