不同资源和栽培地点的羊奶果综合性状及有机酸含量比较

高贤玉++罗心平++赵萌++张惠云++武瑞瑞++张翠仙++赵秀华++胡朝斌++张发明

摘 要 对采自6个不同地点的8份羊奶果资源果实样品进行综合性状比较，同时利用HPLC方法测定了样品中6种有机酸含量。结果显示：不同资源和不同栽培地点的羊奶果果实综合性状差异显著；8份样品有机酸含量范围分别为酒石酸0.04～0.55 mg/kg、苹果酸12.11～27.71 mg/kg、柠檬酸1.59～5.21 mg/kg、富马酸0.7～1.41 mg/kg、没食子酸0.40～0.56 mg/kg、琥珀酸0.00 mg/kg；不同资源和不同栽培地点的羊奶果果实有机酸含量差异显著。实验结果表明，资源及栽培环境对羊奶果果实综合性状及有机酸含量有显著影响。

关键词 羊奶果 ；资源 ；综合性状 ；有机酸

中图分类号 S667.9 文献标识码 A Doi：10.12008/j.issn.1009-2196.2017.10.002

Comparison of Organic Acids and Comprehensive Characteristics of

Elaeagnus conferta Fruits from Different Resources and Locations

GAO Xianyu1） LUO Xinping1） ZHAO Meng1） ZHANG Huiyun1）

WU Ruirui1） ZHANG Cuixian1） ZHAO Xiuhua2） HU Chaobin2） ZHANG Faming1）

（1 Institute of Tropical and Subtropical Economic Crops， YAAS， Baoshan， Yunnan， 678025；

2 Yuanyang of Agricultural Bureau， Yunnan， Yuanyang， 662400；）

Abstract Fruits of eight accessions of Elaeagnus conferta germplasm were sampled from six different sites to compare their comprehensive characteristics， and to determine their contents of six organic acids. The results showed that the fruits of different accessions of E. conferta collected from various sites were significantly different in comprehensive characteristics， and that the fruit samples of the eight accessions contained tartaric acid 0.04～0.55g/kg， malic acid 12.11～27.71g/kg， citric acid 1.59～5.21g/kg， fumaric acid 0.7～1.41g/kg， gallic acid 0.40～0.56g/kg， and succinic acid 0.00g/kg. The organic acids contents were significantly different in the fruits of different accessions collected from different locations. This proved that E. conferta germplasm resources and their cultivating locations gave significantly different impact on the comprehensive characteristics and organic acids contents of E. conferta fruit.

Keywords Elaeagnus conferta ； resources ； comprehensive characteristics ； organic acids

羊奶果（Elaeagnus pungens Roxb）為胡颓子科胡颓子属常绿直立灌木，主要分布于中南半岛、印度尼西亚、印度、尼泊尔。中国广西、福建等地也是其产地[1]。云南羊奶果主要分布于临沧市永德县、德宏州、保山市、红河州及西双版纳等州市的热带亚热带低热河谷地区。羊奶果在国内成熟时间为2～3月，云南产区成熟期为3～4月，此时正直国内水果淡季，其果实鲜红、营养丰富，既可鲜食、也可药用或加工成各类农副产品，具有较高商品性[2]。因其管理粗放且产值较高，近年在临沧市永德县开始规模化栽培，且近3年平均价格均在15元/kg以上。

有机酸广泛存在于各类植物中，是植物果实风味、成熟度、耐贮性及加工性等特性的重要指标。目前，国内对苹果、梨、桃、葡萄、桑葚、黄皮、芒果、荔枝和火龙果等水果的有机酸组分及含量均有相关报道，而对羊奶果仅有其果实的综合性状评价[2]、主要类胡萝卜素组分及含量[3]、营养成分测定[4]和根中三萜苷元的含量等[5]少量报道，对果实有机酸组分及含量测定则未见报道，因此本文对收集到的8份不同资源和栽培地点的羊奶果进行了果实综合性状及有机酸含量的分析测定，以期为羊奶果资源的开发及利用提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验材料

8份不同资源和栽培地点的羊奶果样品分别采自云南省农科院热经所种质资源圃、云南省保山市隆阳区潞江镇芒棒村、莫卡村和岗党村及德宏州芒市6个地点。endprint

1.1.2 仪器与试剂

1.1.2.1 仪器

JJ500精密电子天平（常熟双杰测试仪器厂）；0-200 电子数显卡尺（桂林量具刃具厂）；WYT-32型手持糖量计（泉州光学仪器厂）；美国ThermoFisherscientificU-3000高效液相色谱仪；Thermo-U3000/3000RS DAD检测器。TheromoFisherscientificChromeleon色谱数据处理系统；Eppendorf微量进样枪；美国Millipore-DirectQ-8UV-R超纯水仪；TP-214万分之一天平（丹佛仪器有限公司）；TGL-16aR高速离心机（上海安亭）。

1.1.2.2 试剂

药品及标样：H3P03（色谱纯，美国Tedia，纯度85%）。酒石酸（Tartaric acid）、琥珀酸（Succinic acid）、富马酸（Fumaric acid），没食子酸（Gallic acid），L-苹果酸（L-Malicacid）、柠檬酸（Citric acid）有机酸标样购自Sigma-Aldrich公司，纯度99.5%以上。实验室用水为自制超纯水。

1.2 方法

1.2.1 采样方法

每份资源随机选择5株树，每株树按东、南、西、北4个方向随机采20～50个成熟果，每份样品采样量1～2 kg，所有样品采摘后先进行冷藏，并且3 h内送回实验室进行处理。

1.2.2 试样处理方法

每份羊奶果資源随机取果35枚果实参照国标（GB5009.157-2016）中样品处理方法，进行处理。样品液经0.45 μm水相膜过滤后待测。

1.2.3 试验方法

1.2.3.1 果实综合性状测定

每份羊奶果资源随机选取15枚果实进行单果重、果实长度、果实宽度、种子重、可溶性固形物、果肉重、可食率及果形指数等综合性状测定。

1.2.3.2 有机酸测定

色谱条件：AcclaimTH120C18色谱柱（4.6×250 mm，5 μm）；紫外检测波长为210 nm，柱温30℃，进样量为5 μL，以峰面积外标法定量。

流动相为：参照食品安全国家标准食品中有机酸测定（GB5009.157-2016）方法，为甲醇-0.1%磷酸水溶液（25∶75），等度洗脱，流速为1 mL/min。

标液配制：根据国标有机酸测定（GB5009.157-2016）中的方法进行配制，定容至刻度后，封口，作为标准贮备液，在4℃保存备用。使用前，根据实验需要将此标准贮备液用流动相稀释至适宜含量，以配制标准工作液和混合标准工作液。

试验除标明外，均重复3次，用Excel和SPSS 13.0进行统计分析。

2 结果与讨论

2.1 果实综合性状

2.1.1 果实感官性状

将收集到的8份不同资源及栽培地点的羊奶果，经品尝及目测，果实形状为椭圆形；果肉颜色主要有红及橙红；风味为酸、涩，酸甜，微涩及甜。见表1。

2.1.2 羊奶果资源果实综合性状比较

从不同羊奶果资源比较发现：平均单果重为10.05～15.37 g，最大为云热02，最小为云热06；种子重为1.83～4.07 g；可溶性固形物含量为12.04%～14.29%，最高为云热01，最低为云热06；果肉重为8.21～10.61 g；可食率为72.11%～81.53%，最高为云热06，最低为云热01；果形指数为1.33～1.71。见表2。

从不同栽培地点进行比较发现：云南省农科院热经所种质资源圃内的羊奶果，果大，可溶性固形物含量高等综合性状均高于其他栽培地点的羊奶果；保山潞江镇莫卡村的羊奶果综合性状中除可食率为最高外，其余性状均为最小，平均单果重、种子重、可溶性固形物和果肉重分另为最高的65%、45%、84%和66%；德宏州芒市的2份羊奶果资源其综合性状则介于云南省农科院热经所种质资源圃内及保山其他栽培地点的羊奶果之间。

2.2 有机酸组份及含量

2.2.1 有机酸组份定性分析

图1、2分别是6种有机酸标样色谱图和羊奶果果实样品色谱图。

由图1知，6种有机酸标准样品在210 nm处出峰顺序为：酒石酸（2.750 min）、L-苹果酸（2.973 min）、柠檬酸（3.297 min）、琥珀酸（3.770）、没食子酸 （4.177 min）、富马酸 （4.427 min）。

由图2知，羊奶果果实样品中的5种有机酸在210 nm检测条件下分离效果良好。

2.2.2 有机酸含量分析

8份羊奶果资源经HPLC检测后发现（表3），6种有机酸中有5种被检测出，含量大小顺序依次为苹果酸、柠檬酸、富马酸、酒石酸、没食子酸，琥珀酸未被检测出。

不同资源比较发现，酒石酸（0.04～0.55 mg/kg），含量最高为云热06，最低为云热03；苹果酸（12.11～27.71 mg/kg），含量最高为云热01，最低为云热08；柠檬酸（1.59～5.21 mg/kg），含量最高为云热01，最低为云热03；富马酸（0.7～1.41 mg/kg），含量最高为云热01，最低为云热04；没食子酸（0.40～0.56 mg/kg），含量最高为云热06，最低为云热07。云热03、04和05果实中没食子酸未被检测出。

不同栽培地点比较发现，云南省农科院热经所种质资源圃中栽培的羊奶果中苹果酸、柠檬酸、富马酸含量显著高于其他栽培地点资源，其含量分别为德宏州芒市（云热08）的2.3倍、为保山潞江镇莫卡村的2.1倍、为保山潞江镇岗党村的2倍；保山潞江镇莫卡村栽培的羊奶果中酒石酸、没食子酸含量显著高于其他栽培地点，酒石酸含量为云南省农科院热经所种质资源圃（云热03）的13.75倍，没食子酸含量为德宏州芒市（云热07）的1.4倍。德宏州芒市栽培的羊奶果资源中的有机酸含量则介于其他两个栽培地点之间。endprint

3 讨论与结论

3.1 讨论

植物果实的色泽、外观、风味等品质是决定植物果实经济价值的重要因素。本次实验结果显示云南省农科院热经所种质资源圃栽培的羊奶果，其平均单果重、可食率和可溶性固形物等综合性状最好，但风味偏酸、涩；德宏州芒市的羊奶果其次，风味酸甜均有；保山潞江镇岗党村、芒棒村和莫卡村虽为最后，但其风味甜，因此使其在保山地区仍具有一定的市场。

植物果实中大量存在的有机酸为苹果酸和柠檬酸，但不同树种果实中的有机酸类型差异较大。据报道显示苹果[6]、桑葚[7]中最主要的有機酸为苹果酸、琥珀酸和柠檬酸；杏[8]、梨[9-10]、桃[11]、芒果[12]和火龙果[13]等果实中以苹果酸和柠檬酸为主；荔枝[14-15]和葡萄[16]中则以苹果酸和酒石酸为主。在葡萄及葡萄酒的研究中发现，酒石酸是葡萄酒中主要的酸味来源，琥珀酸主要来源于葡萄酒中糖分子的发酵作用，极少量来自于葡萄果汁所含谷氨酸的变化，是酒精发酵后的一种正常副产物[16]。本次试验结果显示，不同资源和栽培地点的羊奶果有机酸以苹果酸和柠檬酸为主，琥珀酸则未检出。在云南省农科院热经所种质资源圃（云热03）、保山潞江镇岗党村及保山潞江镇芒棒村栽培的羊奶果中没石子酸未被检测出，是否与提取方法有关，还待进一步研究。

植物组织中有机酸组分及含量的高低由于植物种类和栽培环境的不同而存在显著差异，也因此影响其果实风味及加工性等特性[7，16，18-19]。本次实验结果说明，不同资源和栽培地点的羊奶果果实有机酸含量：云南省农科院热经所种质资源圃中栽培的羊奶果其苹果酸、柠檬酸、富马酸含量显著高于其他栽培点；保山潞江镇莫卡村栽培的羊奶果中酒石酸、没食子酸含量显著高于其他栽培点；德宏州芒市栽培的羊奶果有机酸含量介于另外两地之间。

3.2 结论

（1）资源类型及栽培地点对羊奶果果实的综合性状有显著影响，且差异显著。不同资源相比较：平均单果重云热02>云热01>云热08>云热07>云热04>云热03>云热05>云热06；可溶性固形物云热01>云热03>云热04>云热07>云热02>云热08>云热05>云热06；可食率云热06>云热02>云热08>云热04>云热03>云热05>云热07>云热01。不同栽培地点相比较：云南省农科院热经所种质资源圃栽培的羊奶果在单果重、可溶性固形物等综合性状上优于德宏州芒市栽培的，更优于保山潞江镇栽培的。

（2）羊奶果果实有机酸含量因资源类型及栽培地点不同而存在差异，且差异显著。不同资源相比较：5种有机酸含量，酒石酸，云热06>云热02>云热05、08>云热04>云热01>云热07>云热03；苹果酸，云热01>云热04>云热03>云热05>云热07>云热02>云热06>云热08；柠檬酸，云热01>云热07>云热08>云热04>云热05>云热02>云热06>云热03；没食子酸，云热06>云热01>云热08>云热02>云热07；富马酸，云热01>云热05>云热08>云热06>云热03>云热07>云热02>云热04。不同栽培地点相比较：苹果酸、柠檬酸和富马酸含量，云南省农科院热经所种质资源圃（云热01）最高。酒石酸、没食子酸含量，保山潞江镇莫卡村最高。

参考文献

[1] 农业部发展南亚热带作物办公室组. 中国热带南亚热带果树[M]. 北京：中国农业出版社，1998：334-335.

[2] 张阳梅，袁志章，刘代兴，等. 西双版纳羊奶果资源收集和评价初报[J]. 中国南方果树，2015，44（3）：98-102.

[3] 胡海涛，金晓琴，成龙平，等. 密花胡颓子果实主要类胡萝卜素组分及含量分析[J]. 中国农业科学，2014，47（8）：1 652-1 656.

[4] 朱 笃，徐 曲. 胡颓子果实营养成分的测定[J]. 江西师范大学学报（自然科学版），2000，24（1）：90-91.

[5] 杨 敏，张春凤. 杨中林.HPLC法测定不同产地胡颓子根中三萜苷元的含量[J]. 中医药学报，2012，40（3）： 91-93.

[6] 郭 燕，梁 俊，李敏敏，等. 高效液相色谱法测定苹果果实中的有机酸[J]. 食品科学，2012，33（2）： 227-230.

[7] 乔 宇，吕辉华，吴继军，等. 不同品种桑椹中糖酸组成和甜酸风味评价[J]. 食品科学技术学报，2016，34（4）：44-49.

[8] 陈美霞，陈学森，慈志娟，等. 杏果实糖酸组成及其不同发育阶段的变化[J]. 园艺学报，2006，33（4）：805-808.

[9] 姚改芳，张绍铃，吴 俊，等.10个不同系统梨品种的可溶性糖与有机酸组分含量分析[J]. 南京农业大学学报，2011，34（5）： 25-31.

[10] 姚改芳，杨志军，张绍铃，等. 梨不同栽培种果实有机酸组分及含量特征分析[J]. 园艺学报，2014，41（4）： 755-764.

[11] 牛 景，赵剑波，吴本宏，等. 不同来源桃种质果实糖酸组分含量特点的研究[J]. 园艺学报，2006，33（1）：6-11.

[12] 张娥珍，崔 素，辛 明，等. HPLC法同时测定不同种类芒果中10种有机酸的研究[J]. 食品科技，2014，39（3）：276-280.

[13] 李 亚，王珠娜. 热带水果果肉 4 种有机酸反相高效液相色谱测定法[J]. 中国果树，2011（4）：44-47.

[14] 胡志群，王惠聪，胡桂兵. 高效液相色谱测定荔枝果肉中的糖、酸和维生素C[J]. 果树学报，2005，22（5）：582-585.

[15] 黄桂颖，白卫东，杨幼慧，等. 反相高效液相色谱法测定荔枝肉中10种有机酸[J]. 现代食品科技，2009，25（5）：568-570.

[16] 段云涛. 葡萄和葡萄酒中 9种有机酸RP-HPLC检测体系的建立及其相关研究[D]. 北京：中国农业大学，2007.

[17] 陈虹颖，樊梦原，问亚琴，等. 几个酿酒葡萄品种及品系的有机酸分析[J]. 中外葡萄与葡萄酒，2012（3）：12-15.

[18] 问亚琴，张艳芳，潘秋红. 葡萄果实有机酸的研究进展[J]. 海南大学学报（自然科学版），2009，27（3）： 302-307.

[19] 陈虹颖，樊梦原，问亚琴，等. 几个酿酒葡萄品种及品系的有机酸分析[J]. 2012（3）：12-15.endprint