绒叶泡桐提取液对6种细菌抑菌活性的研究

臧爱梅

摘要 本研究采用抑菌圈法用絨叶泡桐叶和花的石油醚、乙醇、丙酮提取液对6种细菌进行了抑菌活性测定。结果表明，泡桐叶和花的乙醇提取液及丙酮提取液对白菜软腐病菌、猕猴桃溃疡病菌、水稻白叶枯病菌和金葡萄球菌4种细菌有较好的抑菌效果。其中，泡桐叶的最佳提取溶剂为丙酮，泡桐花的最佳提取溶剂为乙醇。泡桐花和叶的提取液对大肠杆菌和沙门氏杆菌均无抑菌作用；泡桐叶和花的石油醚提取液对6种细菌均无抑菌作用。

关键词 绒叶泡桐；提取物；细菌；抑菌活性

中图分类号 S792.43 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2017）21-0112-01

近年来，从植物中探求新的活性先导化合物或新的作用靶标，通过类推合成或生物合理设计新农药的开发已成为当前农药化学和农药毒理学研究的热点[1]。1982年，Cercos[2]用醚、乙醇、丙酮3种有机溶剂从毛泡桐果实的外种皮中提取出一种有抗菌活性的物质。这种物质对葡萄球菌和杆状病毒都有较好的抑制活性，而对酵母菌的抑制活性较小。1994年，Kang等[3]发现毛泡桐茎的丁醇提取物对葡萄球菌、链球菌等细菌有抗菌活性。1999年，Kang[4]等用甲醇对毛泡桐的茎皮进行提取，得到一种对脊髓灰质炎病毒有抗性的物质。由此可见，泡桐在天然产物研发中有着很大的研究价值和应用价值。为了进一步开发泡桐，从中寻找具有生物活性的先导化合物，采用不同溶剂对泡桐不同部位进行提取，用粗提液测定其对植物病原菌和动物病原菌的抑菌作用，为新药剂的开发奠定基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料

将泡桐叶、花置于通风处自然阴干，用粉碎机粉碎成粉末，过20目标准筛，于冰箱中低温保存，备用。试验试剂有95%乙醇（分析纯）、丙酮（分析纯）、石油醚（沸程60～90 ℃）。供试细菌包括大肠杆菌（Escherchia.coli）、金葡萄球菌（Sta-phylococcus aureus）、沙门氏杆菌（Samonella typhimurium）、白菜软腐病菌（Erwinia.carotovora pv. carotovora）、水稻白叶枯病菌（Xanthomonas.oryzae. pv. oryzae）、猕猴桃溃疡病菌（Pseud-omonas syringae pv.），以上菌种均由青岛农业大学植物保护学院提供。

1.2 抑菌活性测定方法

采用抑菌圈法[5]用泡桐花和叶的乙醇、丙酮、石油醚提取液对6种细菌进行抑菌活性测定。首先在NA平板表面均匀涂抹供试菌悬浊液200 μL，置于室温干燥5 min，在每个平板表面周边距中心25 mm等距离贴3片带毒滤纸片，1片对照滤纸片。然后将贴好纸片的平板置于31 ℃隔水培养箱中培养，18～24 h观察结果。用十字交叉法测量抑菌圈的直径（包括贴片），并记录测量数据。

判定标准：以抑菌圈直径 >7 mm者判为有抑菌作用，抑菌圈≤7 mm者判为无抑菌作用，3次重复试验均达到有抑菌作用结果者，判为合格。抑菌圈直径与抑菌效果成正比，抑菌圈越大效果越好。对照应无抑菌圈产生，否则试验无效。

2 结果与分析

2.1 不同部位不同溶剂泡桐粗提物的抑菌试验结果

用泡桐花和叶的3种溶剂提取液对6种细菌进行抑菌活性测定（表1）。结果表明，在各溶剂干物质浓度为2 g/mL时，泡桐叶的丙酮提取液和乙醇提取液对白菜软腐病菌、猕猴桃溃疡病菌、水稻白叶枯病菌和金葡萄球菌4种细菌的抑菌圈直径分别为17.83、17.50、17.32、13.75 mm和15.83、13.67、13.50、12.25 mm；泡桐叶的石油醚提取液对6种细菌均无抑菌作用。泡桐叶的丙酮提取液抑菌作用优于乙醇提取液，即泡桐叶的最佳提取溶剂为丙酮。

泡桐花的丙酮和乙醇提取液对白菜软腐病菌、猕猴桃溃疡病菌、水稻白叶枯病菌和金葡萄球菌4种细菌的抑菌圈直径分别为14.00、10.50、11.00、8.83 mm和15.17、13.50、13.00、12.50 mm；泡桐花的石油醚提取液对6种细菌均无抑菌作用。泡桐花的乙醇提取液抑菌效果优于丙酮提取液，所以，泡桐花的最佳提取溶剂为乙醇。泡桐叶、花的3种溶剂提取液对大肠杆菌和沙门氏杆菌均无抑菌作用。

2.2 不同溶剂不同浓度泡桐粗提物的抑菌试验结果

用丙酮提取液和乙醇提取液对4种有活性的细菌进行不同浓度的抑菌活性试验（表2）。结果表明，泡桐叶的丙酮提取液稀释不同倍数后，随着稀释倍数增大，其对4种病菌的抑菌圈愈来愈小。10倍稀释液对4种菌均无抑制作用。

不同溶剂不同浓度泡桐粗提物的抑菌试验结果表明，泡桐叶、花的提取液对白菜软腐病菌的抑菌效果最好。粗提物的抑菌效果与其浓度成正相关，同一部位同一溶剂的提取物浓度越大，对同一种菌的抑菌效果越明显；浓度越小，抑菌效果越差。

3 结论与讨论

用泡桐叶和花的乙醇、丙酮和石油醚提取液对3种植物病原菌和3种动物病原菌同时进行了抑菌活性测定，结果表明，泡桐叶的乙醇提取液和丙酮提取液以及泡桐花的乙醇和丙酮提取液对白菜软腐病菌、猕猴桃溃疡病菌、水稻白叶枯病菌和金葡萄球菌4种细菌均有抑制作用，其中对白菜软腐病菌的抑菌效果最为显著。这也是泡桐提取液对植物病原细菌的首次报道，也是本研究的创新点。

泡桐叶的丙酮提取液抑菌作用优于其乙醇提取液，即泡桐叶的最佳提取溶剂为丙酮；泡桐花的乙醇提取液抑菌效果优于其丙酮提取液，即泡桐花的最佳提取溶剂为乙醇。

Kang等从泡桐分离得到一种呋喃醌酮，对Hela癌细胞有抑制作用。陕西省畜牧兽医研究所和中国农业大学动物医学院试验证明泡桐花黄酮具有一定的抗菌谱，增强动物机体免疫功能，抑菌作用显著[6]。为了进一步开发泡桐，从中寻找具有生物活性的先导化合物，本研究以泡桐作为试验材料，对其农用抑菌生物活性进行初步研究，旨在为开发新的仿生农用杀菌剂寻找先导化合物打下基础。

4 参考文献

[1] 吴新安，花日茂，岳永德，等.几种中草药提取物对生物病原菌的抗菌活性研究[J].安徽农业大学学报，2002，29（4）：330-332.

[2] CERCOS A P.Antimicrobial antivity of the epicarp of the fruits of Paul-ownia tomentosa[J].Rev Argent Microbial，1982，14（2）：111-113.

[3] KANG K H，JANG S K，KIM B K.et al.Antibacterial phenylpropanoid glycosides from Paulownia tomentosa Steud [J].Arch Pharm Res，1994，17（6）：470-474.

[4] KANG K H，HUH H，KIM B K，et al.An antiviral furanquinone from Paulownia tomentosa Steud[J].Phytother Res，1999，13（7）：624-629.

[5] 王桂亭，王皞，宋艳艳，等.无花果叶提取物抑菌作用的实验研究[J].中国消毒学杂志，2005，22（4）：374-376.

[6] 付明哲，卢兴民，陆刚，等.泡桐花黄酮抗菌作用及对免疫机能的影响[J].中国兽医杂志，1999，25（5）：46-47.endprint