人工镜检与朗迈（LabUMat+UriSed）全自动尿液分析仪对尿液中红细胞、白细胞检测比较分析
2017-11-15任艳玲刘丽霞
任艳玲 刘丽霞
【摘要】 目的：比较朗迈LabuMat全自动尿干化学分析仪、朗迈UriSed全自动尿沉渣仪分析仪对尿液检测的准确性、可靠性，为临床提供快速、准确的结果。方法：随机抽取1782例患者尿液标本，分别用朗迈LabuMat全自动尿干化学分析仪、朗迈UriSed全自动尿沉渣仪分析仪及人工镜检三种方法进行检测，对检测结果进行比较。结果：以显微镜检查作为对照，朗迈Urised全自动尿沉渣分析仪检查红细胞灵敏度、特异度、Kappa值分别为：98.66%（960/973），97.78%（791/809）、0.98；朗迈LabuMat全自动尿干化学分析仪检查红细胞灵敏度、特异度、Kappa值分别为：99.59%（969/973）、95.92%（776/809）、0.97。朗迈Urised全自动尿沉渣分析仪检查白细胞灵敏度、特异度、Kappa值分别为：98.59%（1190/1207），95.48%（549/575）、0.96；朗迈LabuMat全自动尿干化学分析仪检查白细胞灵敏度、特异度、Kappa值分别为：77.38%（934/1207）、73.91%（425/575）、0.63。结论：朗迈（LabuMat+UriSed）全自动分析仪检测速度快、结果比较准确，但不能完全取代人工镜检，必须与人工镜检合理的结合才能最快速、准确地为临床提供检验结果。
【关键词】 尿沉渣； 尿干化学； 人工镜检； 红细胞计数； 白细胞计数
Comparison of Detection of Red Blood Cells and White Blood Cells in Urine by Manual Microscopy and （LabuMat+UriSed） Automatic Urine Analyzer/REN Yan-ling，LIU Li-xia.//Medical Innovation of China，2017，14（22）：047-050
【Abstract】 Objective：To compare the accuracy and dependability of LabuMat automatic urine dry chemical analyzer and UriSed automatic urine sediment analyzer for urine testing，and to provide the fastest and the most accurate results for clinic.Method：Urine samples of 1782 patients were randomly selected and detected by the three methods，detection results were compared.Result：Compared with microscopy，the sensitivity，specificity and Kappa values of RBC Urised automatic urine sediment analyzer were 98.66%（960/973），97.77%（791/809） and 0.98 respectively；the sensitivity，specificity and Kappa value of RBC LabuMat automatic urine dry chemical analyzer were 99.59%（969/973），95.92%（776/809） and 0.97 respectively.The sensitivity，specificity and Kappa values of WBC Urised automatic urine sediment analyzer were 98.59%（1190/1207），95.48%（549/575） and 0.96 respectively；the sensitivity，specificity and Kappa value of WBC LabuMat automatic urine dry chemical analyzer were 77.38%（934/1207），73.91%（425/575） and 0.63 respectively.Conclusion：LabuMat automatic urine dry chemical analyzer and UriSed automatic urine sediment analyzer can quickly and accurately provide clinical results，but they can not completely replace the manual microscopy，and they must be combined with manual microscopy to provide the fastest and the most accurate results for clinical.
【Key words】 Urinary sediment； Urine dry chemistry； Manual microscopy； Red blood cell count； White blood cell count
First-authors address：The Second Affiliated Hospital of Baotou Medical College，Baotou 026000，China
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.22.014
尿液分析作為临床检验的三大常规之一，标本采集方便、且能为泌尿系统及相关疾病诊断及治疗提供重要依据，受到临床医生越来越多的重视，成为疾病诊断和常规体检的必须手段。人工镜检的结果直观、可靠，仍为尿液检查的金标准[1]。但其操作复杂、费时、工作强度较大[2]，不能完全适应临床尿液检测标本量的增加。随着医学技术的突飞猛进，全自动尿液检测分析仪问世了。朗迈LabuMat全自动尿干化学分析仪检测最快速度达到250样本/h，朗迈UriSed全自动尿液有形成分分析仪最快达到100样本/h，其检测速度之快是人类手工镜检不可比拟的，在一定程度上弥补了人工镜检速度较慢的不足。但是实际检测中尿液成份十分复杂，一些形态近似的成分会产生相互干扰，结果使得朗迈UriSed全自动尿沉渣分析仪对某些有形成分产生错误的判断。朗迈LabuMat全自动尿干化学分析仪的干化学试纸比较容易受到环境因素的影响而出现假阳性或者假阴性，这暴露了全自动尿液检测分析仪器的局限性。为此笔者进行了如下的研究，以便全自动仪器与人工镜检紧密结合，取全自动尿液检测分析仪器检测速度快之长，补人工镜检费时之短为临床提供快速、准确的检测结果，现报道如下。endprint
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取本院2016年8-12月门诊及住院部送检患者尿液标本1782例，年龄3～87岁，平均（42.0±2.5）岁。
1.2 仪器与试剂 普通双目生物显微镜（日本Olympus公司）；朗迈UriSed全自动尿沉渣分析仪及配套尿沉渣计数板（匈牙利77Elektronika公司）；朗迈LabuMat干化学分析仪及其质控品（北京倍肯恒业科技发展有限公司）；湘仪L550型台式离心机，湖南湘仪离心机仪器有限公司。
1.3 方法
1.3.1 每一位患者留中段尿液10 mL，盛于一个10 mL带有刻度的、专用尿沉渣离心管中，标本必须在2 h内完成检测。
1.3.2 尿液首先使用朗迈LabuMat干化学分析仪及朗迈UriSed沉渣分析仪进行检测。朗迈LabuMat干化学分析仪直接将检测干化学条试纸完全浸入尿液中后取出，白光照射到尿试纸条上，彩色CCD传感器接收反射光。仪器内置程序对数字化的图像信号进行处理，先对试纸条上空白色块进行定位，然后对反射光的各波长进行分析，计算出尿液中各组成成分的数值结果。朗迈UriSed全自动尿沉渣分析仪是将不离心的尿液经混匀后加入特制的计数板中，通过内置离心机以2000 r/min离心10 s（半径6 cm），使尿液均匀地沉积于计数板底部。离心后，样本承载板被推片装置推至显像系统上方的移动机械臂中，机械臂带动样本承载板自动移动20个摄像位，全自动计算机显微镜镜检智能识别，以形态学方法对尿液中的有形成分进行自动识别与分类计数并统计结果。
1.3.3 人工鏡检 参照《全国临床检验操作规程》[3]，取朗迈LabuMat干化学分析仪测试完的尿液标本，以1500 r/min，离心5 min，倾去上清液，留取
0.2 mL混匀，吸取20 μL涂于清洁玻片，加盖盖玻片镜检，分别计数红、白细胞等，细胞以10个视野中最少数到最多数报告。人工镜检均由有经验的中级以上检验师进行操作。
1.3.4 结果判定 人工镜检红细胞超过3个/高倍视野，但肉眼所见尿液颜色没有异常时，称为镜下血尿；白细胞正常人尿沉渣镜检白细胞加脓细胞不超过5个/高倍视野，当超过5个/高倍视野，就称为镜下脓尿。结果尿液有形成分参考范围，一次性计数板法，红细胞：男0～4.5 P/μL（成人）；女0～6 P/μL（儿童），0～7 P/μL（成人）；白细胞：男0～3 P/μL（儿童），0～6 P/μL（成人）；女0～4 P/μL（儿童），0～14/μL（成人）[4]。朗迈Urised全自动尿沉渣分析仪与朗迈LabuMat干化学分析仪厂家提供的参考范围见表1。
1.4 统计学处理 采用SPSS 10.0软件对所得数据进行统计分析，计数资料采用 字2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。运用Kappa检验判断一致性强弱，Kappa≤0.6表示一致性弱，0.6
2 结果
2.1 三种方法检测尿液中RBC、WBC阳性结果比较 以人工镜检作为对照，Urised全自动尿液沉渣仪和LabuMat全自动尿液干化学分析仪检测RBC、WBC结果见表2。
2.2 1782例尿液中红细胞人工镜和朗迈LabuMat全自动尿干化学分析仪及Urised全自动尿液沉渣仪法检测结果比较 朗迈Urised全自动尿沉渣分析仪检查红细胞灵敏度、特异度、Kappa值分别为：98.66%（960/973），97.78%（791/809）、0.98；朗迈LabuMat全自动尿干化学分析仪检查红细胞灵敏度、特异度、Kappa值分别为：99.59%（969/973）、95.92%（776/809）、0.97，见表3。
2.3 1782例尿液中白细胞人工镜和朗迈LabuMat全自动尿干化学分析仪及Urised全自动尿液沉渣仪法检测结果比较 朗迈Urised全自动尿沉渣分析仪检查白细胞灵敏度、特异度、Kappa值分别为：98.59%（1190/1207），95.48%（549/575）、0.96；朗迈LabuMat全自动尿干化学分析仪检查白细胞灵敏度、特异度、Kappa值分别为：77.38%（934/1207）、73.91%（425/575）、0.63，见表4。
3 讨论
朗迈LabuMat全自动尿干化学分析仪检测原理是利用尿液中的相关化学物质使尿常规干化学试纸条不同发色模块发生变色反应。尿干化学潜血是根据血红蛋白接触活性原理，通过尿中的过氧化物酶分解过氧化物[5]，使邻联甲苯胺氧化呈色，强氧化剂可能造成假阳性。如果尿中有易热性触酶、尿液被氧化剂污染、尿路感染的细菌产生过氧化物酶时可出现假阳性，尿中存在大量血红蛋白及含有大量还原物质如维生素C、甲醛和亚硝酸盐等时可出现潜血假阴性[6]。本研究发现除外血管内溶血性疾病和肌红蛋白损伤性疾病[7]，朗迈UriSed全自动尿液有形成分红细胞与朗迈LabuMat全自动尿干化学中潜血呈一定的相关性，若出现二者不一致的现象均需进行人工镜检。干化学检测尿液中的白细胞主要根据酯酶法的原理[8]，将尿中的白红胞转化为酯酶的测定，这种酶能水解一种3-羟基吡咯类底物，释出酚从而与重氮试剂反应生成紫红色化合物。尿干化学的检测受到很多因素的影响，当与尿沉渣结果不符合时，必须进行人工镜检[9]。高比重尿、淋巴细胞尿、高葡萄糖（10～20 g/L以上）及室温较低时（20 ℃以下）可造成白细胞测定结果偏低或假阴性。朗迈UriSed全自动尿液有形成分白细胞与朗迈LabuMat全自动尿干化学中白细胞酯酶呈一定的相关性，若出现二者不一致的现象均需进行人工镜检。
朗迈UriSed全自动尿液有形成分分析仪对细胞自动识别理论是基于人工网络自适应共振理论[10]，可以逼真地模拟生物神经系统，拥有学过不忘和不断积累的能力[11]，一般情况下可以很好的识别尿液中的有形成分但是容易受到尿液中盐类结晶、酵母菌、滴虫、精子、上皮细胞、黏液丝等困扰[12-14]，所以当有肉眼可见脓尿、血尿、盐类结晶较多的尿液时必须要镜检。另外研究中发现检测结果尿沉渣中白细胞与干化学白细胞脂酶的一致性比较差，分析原因与干化学检测的局限性有关，干化学法试带上带有的化学物质吲哚酚酯仅与尿液中的中性粒细胞酯酶发生反应而显色[15]，所以不能检出淋巴和单核细胞。尿液中存在大量脓细胞也会干扰酯酶反应，而使干化学出现阴性。恰恰慢性尿道炎症、肾移植术后发生排斥反应的患者尿液中有大量的淋巴细胞核和单核细胞，所以在检测过程中常常干化学LEU阴性，沉渣中见到大量白细胞。白细胞容易受到滴虫或者细菌的影响而变形[16-17]，本研究中还发现尿液中若存在滴虫，仪器常常将波状运动某一状态的滴虫错误的识别为白细胞，沉渣的照片中的白细胞多模糊，且有变形。此时需要离心镜检以确认白细胞的数量及是否有滴虫存在。在研究中还发现另外一个现象，同一干化学条上的色块在浸入尿液中取出后都会在30S左右发生颜色的变化，并且一步到位，但是白细胞的色块颜色发生变化要相对长一些，所以有时沉渣中出现大量白细胞但是干化学却显示白细胞酯酶阴性，这一说法还需要进一步的研究和比对。
LabuMat全自动尿沉渣分析仪与LabuMat全自动尿液干化学分析仪在充分发挥尿沉渣分析仪快速筛查的功能时，当LabuMat全自动尿沉渣分析仪与LabuMat全自动尿液干化学分析仪检测红细胞/白细胞的结果一致时，完全不用人工镜检[18]，但存在其它情况绝对不能忽视显微镜检查的重要性[19-20]，只有两者密切结合，才能既快速又准确的为临床疾病的诊断和鉴别诊断、疗效观察和健康普查等提供客观、准确的实验诊断依据。
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（收稿日期：2017-04-12） （本文编辑：邓朝阳）endprint
