慢性阻塞性肺疾病急性加重期及治疗后诱导痰细胞分类、嗜酸粒细胞阳离子蛋白的变化比较

文一波　刑斌　朱佑铭

【摘要】 目的：比较分析慢性阻塞性肺疾病急性加重期（AECOPD）及治疗后诱导痰细胞分类、血嗜酸粒细胞阳离子蛋白（ECP）的变化。方法：抽取笔者所在医院于2016年4-12月收治的128例AECOPD患者。分别于入院当天及治疗1周后应用荧光酶免疫法测定血液中的ECP，以及应用改良后的诱导痰技术实施诱导痰细胞分类的计数。结果：AECOPD患者治疗后，中性粒细胞比例降低，巨噬细胞比例升高，ECP值比治疗前降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。淋巴细胞的比例较治疗前升高，嗜酸性粒细胞降低，但差异无统计学意义（P>0.05）。结论：AECOPD患者诱导的痰细胞主要是中性粒细胞，而健康人诱导的痰细胞主要是巨噬细胞，治疗后，患者的痰细胞分类及ECP均有明显变化。

【关键词】 AECOPD； ECP； 痰细胞分类

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2017.23.020 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2017）23-0042-02

The Comparative Analysis of the Changes of Induced Sputum Cytology and Eosinophil Cationic Protein in Patients with Acute Exacerbation of Chronic Obstructive Pulmonary Disease/WEN Yi-bo，XING Bin，ZHU You-ming.//Chinese and Foreign Medical Research，2017，15（23）：42-43

【Abstract】 Objective：To compare and analyze the changes of induced sputum cytology and eosinophil cationic protein（ECP） in patients with acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease（AECOPD）.Method：128 patients diagnosed as AECOPD were selected from April 2016 to December 2016 in our hospital.On the day of admission and a week after treatment，the fluorescence enzyme immunoassay was used to test the ECP in blood，and the induced sputum technique was applied in sputum cell classification counting.Result：After treatment，the proportion of neutrophils decreased，while the proportion of macrophages increased，the value of ECP decreased，the differences were statistically significant（P<0.05）.The proportion of lymphocytes increased，and the proportion of eosinophils decreased，but the differences were not statistically significant（P>0.05）.Conclusion：In the induced sputum of AECOPD patients，neutrophil is the major cell type，while macrophages predominated in the healthy people.After treatment，the sputum cytology and ECP value change obviously.

【Key words】 AECOPD； ECP； Sputum cell classification

First-authors address：Guangan City Hospital of Traditional Chinese Medicine，Guangan 638500，China

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）是一種以不完全可逆的气流受限为特征的疾病，与肺部对有害气体或有害颗粒的异常炎症反应有关，由不同炎性细胞、炎症介质和细胞因子介导的慢性气道炎症，会进一步引发气道阻塞和气道重构，对COPD发生发展起着重要作用[1]。痰诱导是指以高渗盐水或其他诱导液雾化吸入，诱导无痰或少痰的受检者产生足够的痰液，对呼吸道分泌物中的细胞及其他液相成分进行分析研究的一种无创性检测方法。目前痰诱导方法众多，没有统一的标准，人们在不断探索一种可以用于各类呼吸道疾病且副作用少的方法[2]。为了比较分析慢性阻塞性肺疾病急性加重期（acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease，AECOPD）及治疗后诱导痰细胞分类、血嗜酸细胞阳离子蛋白（ECP）的变化，笔者所在医院对其开展了深入探究，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

经患者同意和医院伦理委员会批准实施，抽取笔者所在医院于2016年4-12月收治的AECOPD患者作为研究对象，其中男56例，女72例，患者年龄43～72岁，平均（72.6±9.4）岁，平均患病时间（5.13±2.34）年。纳入标准：患者无心源性哮喘或脑血管疾病等，存在意识模糊和嗜睡等症状，X线胸片提示有支气管和肺部感染迹象，且不吸烟，近1个月内未发生过支气管及肺部感染，近2个月未用激素，均签署知情同意书[3]。排除标准：本次研究前2周内曾有急性发作，患者呼吸衰竭需要使用机械通气，患者患有哮喘、支气管扩张、肿瘤、结缔组织病、糖尿病、甲状腺功能亢进等疾病，合并高血压病、严重左、右心功能衰竭者[4]。endprint

1.2 方法

1.2.1 采集及處理痰标本 患者均采用超声雾化机以1 ml/min的速度吸入30 ml 3%的高渗盐水实施痰诱导。在雾化前，患者擤鼻，深咳，在此时如果有痰，就将痰液咳出并弃去，然后用生理盐水漱口。每次间隔5 min收集痰液并且测定FEV，如果雾化不够5 min弃去咳出痰液，等患者雾化的时间大于5 min之后再次用生理盐水漱口之后让患者深咳，此时如果有痰，就将痰液咳入到无菌的容器内备查。如果无痰或痰量少，则给予生理盐水漱口之后再次雾化。在取得足够的痰量或雾化时间达到30 min时暂停诱导。收集的痰液应在2 h内处理，其中痰液标本内每个低倍视野的白细胞≥25个，鳞状上皮细胞数≥10个，无唾液、痰液重量≥1 g、细胞活力不小于50%为合格标本。调节细胞的悬浮密度达到1×106个/ml，把75 μl的悬浮液放置在离心机内，450 r/min，离心6 min，将沉淀涂片、风干并用苏木素伊红进行染色。计算分类以每张涂片上非鳞状上皮细胞的个数为40个，鳞状上皮细胞<20%看作合格标本。对细胞实施分类和计数。

1.2.2 留取及处理血标本 采集2～3 ml静脉血放置在玻璃管内，在20 ℃～25 ℃下凝血1 h，1.0～1.3 kg，离心10 min，把血清移到另外洁净的玻璃管内，1.0～1.3 kg，离心的时间为10 min。把血清移到洁净的塑料试管内，放在20 ℃下保存，采用荧光酶免疫法测定血液之中ECP的含量。

1.3 观察指标

观察并比较治疗前后的痰细胞的分类，以及ECP值变化。

1.4 统计学处理

本研究数据采用SPSS 13.0统计学软件进行分析和处理，计量资料以（x±s）表示，采用t检验，各组均数比较采用单因素方差分析、组间两两比较用SNK-q检验，方差不齐者采用秩和检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 痰细胞的分类

AECOPD患者经治疗后，痰液内中性粒细胞及嗜酸性粒细胞的比例都有下降的趋势，而巨噬细胞及淋巴细胞比例则升高；其中中性粒细胞降低及巨噬细胞上升较显著，差异有统计学意义（P<0.05）；淋巴细胞的升高及嗜酸性粒细胞降低则不显著，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

2.2 ECP值变化

患者在治疗后，其血液ECP的值明显下降，与治疗前比较，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

3 讨论

慢性阻塞性肺疾病是一种具有气流受限特征的可以预防和治疗的疾病，气流受限不完全可逆、呈进行性发展，是一种重要的慢性呼吸系统疾病，严重影响患者的劳动能力和生活质量[5-6]。目前临床及实验室多通过支气管肺泡灌洗、聚合酶链反应等技术研究气道炎症，但这些方法存在侵入性、危险性、费用高等问题，绝大多数患者无法接受[7-8]。

诱导痰的来源与自发排痰、支气管肺泡灌洗液、支气管活检的部位不同，主要来源于外周气道至中央气道的分泌物，反映了气道分泌物自然状态下的浓度，具有更集中的细胞和生化物质成分，尤适合气道炎症疾病的研究[9-10]。该技术有易行、无创、经济、安全、可靠性高、重复性好及患者很容易接受的优点。而ECP是嗜酸性粒细胞的特异标志，是嗜酸细胞活化后释放出的强碱性颗粒蛋白，反映了嗜酸细胞的活化程度，具有极强的细胞毒性作用，引起气道高反应性或喘息发作，加重变态反应炎症过程[11-12]。

本次研究证明，患者在AECOPD内，中性粒细胞的比例明显高于其他细胞，嗜酸性粒细胞的比例高。治疗后，中性粒细胞比例降低及巨噬细胞比例升高明显，差异有统计学意义（P<0.05）。淋巴细胞升高及嗜酸性粒细胞降低的比例较小，差异无统计学意义（P>0.05）。治疗后，患者的ECP值比治疗前降低，差异有统计学意义（P<0.05）。

综上所述，通过分析诱导血ECP及痰细胞分类比例之间的关联，有助于了解AECOPD患者的病情。

参考文献

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（收稿日期：2017-04-19）endprint