西藏谢通门县山羊球虫感染情况调查

常艳凯 ， 毋亚运 ， 郑双健 ， 王 璐 ， 李东方 ， 李家奎 ， 张龙现 ， 张慧正 ， 张素梅

(1.河南农业大学牧医工程学院 ， 河南 郑州 450002 ； 2. 西藏农牧学院动物科学学院 ， 西藏 林芝 860000 ; 3.华中农业大学动物医学院 ， 湖北 武汉 430070 ； 4.河南省汝阳县卫生监督所付店分所 ， 河南 汝阳 471200)

西藏谢通门县山羊球虫感染情况调查

常艳凯1， 毋亚运1， 郑双健1， 王 璐1， 李东方1， 李家奎2，3， 张龙现1， 张慧正4， 张素梅1

(1.河南农业大学牧医工程学院 ， 河南 郑州 450002 ； 2. 西藏农牧学院动物科学学院 ， 西藏 林芝 860000 ; 3.华中农业大学动物医学院 ， 湖北 武汉 430070 ； 4.河南省汝阳县卫生监督所付店分所 ， 河南 汝阳 471200)

为了解西藏谢通门县山羊球虫的感染情况，采用饱和蔗糖溶液漂浮法,对该地区采集的260份山羊新鲜粪便样品进行了显微镜检查，并对球虫种类进行了形态学鉴定。结果：该地区山羊球虫总感染率为81.15%(211/260)，共感染12种山羊艾美耳球虫(Eimeria)，其中艾丽艾美耳球虫(E.alijevi)和苍白艾美耳球虫(E.pallida)的感染率分别为52.7%(137/260)和50.8%(132/260)，为优势虫种。山羊感染球虫多呈混合感染，混合感染率为61.7%(129/209)，并首次在西藏地区发现了斑点、柯察、苍白艾美耳球虫。依据本次调查山羊球虫的结果和艾美耳球虫孢子化卵囊特征，制订了山羊球虫检索表。结论：西藏谢通门县山羊球虫的感染情况较为严重，建议积极做好防控措施，减少球虫感染。

球虫感染 ； 种类 ； 西藏 ； 山羊

西藏地区作为中国五大牧场之一，动物种类繁多，一直以来畜牧业在其生产总值中占有较大比重。2015年西藏家畜存栏量有2 188万头，其中山羊有533万头，占西藏家畜总量的24.3%(国家统计中心http://t.cn/RI9Zg1z)。西藏地区山羊的养殖主要以个体放牧饲养为主，交通不便和管理粗放导致了山羊球虫病治疗的滞后。羊球虫病引起的腹泻和亚临床感染(消瘦、发育停滞)严重影响了养羊业的经济效益。国内外关于山羊球虫感染情况调查较多，但西藏地区作为传统牧区，且又处于高海拔地区，关于山羊球虫的报道相对较少。日喀则地区位于青藏高原西南部，山羊存栏量居西藏全区之首，谢通门县是日喀则地区主要的羊生产区之一[1]。为了弄清高海拔地区山羊球虫感染情况，为本病的防控提供科学的依据，本研究对平均海拔 4 100 m 以上的日喀则地区谢通门县牧区山羊球虫感染情况进行了调查，以期为高原地区山羊寄生虫病的防控提供参考。

1 材料与方法

1.1 样品采集 本调查于2016年6-7月在西藏谢通门县(位于日喀则地区中北部，东经87°4′至89°1′，北纬29°18′至30°26′，平均海拔4 100 m以上)4个乡镇7个不同放牧地点随机采集了260份山羊粪便，每份样品20～30 g。每份加2.5%重铬酸钾，置于4 ℃冰箱中保存。

1.2 检查方法 应用饱和蔗糖漂浮法对球虫样本进行阳性筛选。参考Becker[2]的方法进行球虫的收集与培养。

1.3 虫种鉴定 为确定球虫的种类，将孢子化球虫卵囊置于显微镜(OLYMPUS BX53)下进行鉴定。根据卵囊大小、形状、卵囊结构、内残体的有无和孢子囊形状进行形态学定种[3-4]。

2 结果与分析

2.1 球虫感染情况 260份粪便样品中，检测到211份球虫阳性样品，感染率为81.2%(211/260)。因部分样品球虫感染量小，未进行球虫孢子化培养，对211份球虫阳性样品中的209份球虫进行了形态学鉴定，共鉴定出12种山羊艾美耳球虫。感染率分别为：艾丽艾美耳球虫(E.alijevi)52.7%(137/260)，苍白艾美耳球虫(E.pallida)50.8%(132/260)，克氏艾美耳球虫(E.christenseni)10.8%(28/260)，柯察艾美耳球虫(E.kocharli)9.6%(25/260)，家山羊艾美耳球虫(E.hirci)8.8%(23/260)，阿普艾美耳球虫(E.apsheronica)7.3%(19/260)，阿氏艾美耳球虫(E.arloingi)5%(13/260)，山羊艾美耳球虫(E.caprina)4.2%(11/260)，约奇艾美耳球虫(E.jolchijevi)2.7%(7/260)，斑点艾美耳球虫(E.punctata)2.7%(7/260)，妮氏艾美耳球虫(E.ninakohlyakimovae)1.5%(4/260)，羊艾美耳球虫(E.caprovina)0.4%(1/260)。

本次调查显示，山羊球虫的混合感染率为61.7%(129/209)。阳性样本中，最多有7种球虫的混合感染，平均感染1.9种球虫。混合感染2、3、4、5、7种球虫的所占的比率分别为38.3%、15.8%、6.7%、0.5%、0.5%。

2.2 山羊球虫种类及孢子化卵囊形态特征 本次调查检测到的山羊球虫种类及孢子化卵囊形态特征描述如下(图1)：(1)约奇艾美耳球虫(E.jolchijevi)：卵囊大小31.4(27.7～41.6)μm×22.3(18.4～28.6)μm，呈壶形或罐状，有极帽且极帽稍平，近极帽端较宽，有卵膜孔，无卵囊残体，孢子囊椭圆形，大小14.3(11.7～16.9)μm×7.7(6.1～10.4)μm，有斯氏体，有孢子囊残体；(2)家山羊艾美耳球虫(E.hirci)：卵囊大小26.1(19.2～30.2)μm×19.1(15.4～20.8)μm，宽椭圆形，或近似球形，卵囊壁光滑，有极帽，有卵膜孔，无卵囊残体，孢子囊宽椭圆形，大小11.2(9.0～13.1)μm×7.7(6.2～9.3)μm，有斯氏体，有孢子囊残体；(3)阿氏艾美耳球虫(E.arloingi)：卵囊大小30.5(25.6～38.7)μm× 21.3(17.9～26.0)μm，椭圆形，两边相对平直，卵囊壁光滑，有极帽，有卵膜孔，无卵囊残体，孢子囊长椭圆形，大小14.8(13.0～17.9)μm×7.5(5.6～8.2)μm，无斯氏体，有孢子囊残体；(4)克氏艾美耳球虫(E.christenseni)：卵囊大小40.9(36.4～46.1)μm×26.1(24.3～28.6)μm,卵圆形，卵囊壁光滑，有极帽，有卵膜孔，无卵囊残体，孢子囊宽椭圆形，大小15.3(13.5～17.4)μm×9.7(8.2～10.9)μm，斯氏体不明显，有孢子囊残体；(5)阿普艾美耳球虫(E.apsheronica)：卵囊大小33.4(22.9～38.4)μm× 24.8(22.5～28.2)μm，尖卵圆形，卵囊外壁较厚，无极帽，有卵膜孔，且卵膜孔内陷成一个小孔，无卵囊残体，孢子囊卵圆形，大小14.5(12.8～17.9)μm×8.4(7.7～10.2)μm，斯氏体不明显，有孢子囊残体；(6)羊艾美耳球虫(E.caprovina)：卵囊大小32.8(26.1～41.1)μm×26.4(20.5～38.8)μm，短椭圆形或近似球形，卵囊壁光滑，无极帽，有卵膜孔，无卵囊残体，孢子囊长椭圆形，大小15.3(12.8～17.7)μm×8.2(7.2～10.4)μm,有斯氏体，有孢子囊残体；(7)斑点艾美耳球虫(E.punctata)：卵囊大小30.2(25.6～35.8)μm×22.3(17.9～25.6)μm，卵囊呈椭圆形、近似球形或卵圆形，卵囊壁粗糙，呈波浪状，有极帽，有卵膜孔，有卵囊残体，孢子囊呈梨形，大小12.1(10.2～15.4)μm×6.9(5.1～8.2)μm，有斯氏体，有卵囊残体；(8)山羊艾美耳球虫(E.caprina)：卵囊大小37.0(28.1～42.9)μm×25.3(20.5～28.6)μm，椭圆形，卵囊壁光滑，无极帽，有卵膜孔，无卵囊残体，孢子囊长椭圆形，大小15.8(11.7～18.2)μm×9.0(6.4～10.4)μm，有斯氏体，有孢子囊残体；(9)柯察艾美耳球虫(E.kocharli)：卵囊大小51.5(43.5～57.4)μm×38.5(30.2～44.2)μm，椭圆形或卵圆形，卵囊表面有颗粒状浮起，有横纹，有极帽，有卵膜孔，无卵囊残体，孢子囊长椭圆形，大小20.3(17.4～27.3)μm×10.7(9.0～13.0)μm，有斯氏体，有孢子囊残体；(10)妮氏艾美耳球虫(E.ninakohlyakimovae)：卵囊大小24.9(20.5～29.4)μm×19.7(15.4～25.6)μm，卵圆形，卵囊壁光滑，无极帽，有卵膜孔，无卵囊残体，孢子囊椭圆形，大小12.9(10.2～15.4)μm×7.6(6.4～9.1)μm，有斯氏体，有卵囊残体；(11)艾丽艾美耳球虫(E.alijevi)：卵囊大小17.8(15.4～21.1)μm× 15.7(12.8～19.5)μm，球形或近似球形，卵囊壁光滑，无极帽，无卵膜孔，无卵囊残体，孢子囊卵圆形，大小9.5(7.7～11.7)μm×5.3(4.2～6.5)μm，斯氏体不明显，有孢子囊残体；(12)苍白艾美耳球虫(E.pallida)：卵囊大小18.2(14.3～22.5)μm×13.2(12.2～15.4)μm，长椭圆形，卵囊壁光滑，无极帽，无卵膜孔，无卵囊残体，孢子囊长椭圆形，大小7.5(5.0～9.1)μm×4.8(3.1～6.4)μm，无斯氏体，无孢子囊残体。

图1 山羊孢子化艾美耳球虫卵囊图A：约奇艾美耳球虫 B：家山羊艾美耳球虫 C：阿氏艾美耳球虫 D：克氏艾美耳球虫 E：阿普艾美耳球虫 F：羊艾美耳球虫 G：斑点艾美耳球虫 H：山羊艾美耳球虫 I：柯察艾美耳球虫 J：妮氏艾美耳球虫 K：艾丽艾美耳球虫 L：苍白艾美耳球虫

2.3 鉴别山羊球虫检索表 山羊球虫种类较多，结构上较为相似，但不同种类形态上有差异，依据国内外相关文献[3-4]和本次检测到的球虫种类，制订了山羊艾美耳球虫检索表(表1)，为其他学者在鉴定种类时提供参考。

3 讨论

本次对谢通门县区域山羊球虫感染情况调查，结果显示球虫的感染率较为普遍(81.2%，211/260)。和夏晨阳[5]7月份对青藏高原尼木县放牧山羊的调查(86.7%，1 040/1 200)、韩琼琼[6]在云南、贵州等高山地区对肉用山羊球虫的调查(88.0%，243/276)的结果相一致，朱丹[7]在河南(95.6%，807/844)和Penzhorn[8]在美国(97.2%，599/616)的结果都高于本调查，这可能因为高山地区较平原温度低，气候不适于卵囊的生长发育。但是远远高于阎晓菲[9]在新疆(71.4%，893/1 251)和Cai[10]对宁夏地区放牧山羊(86.7%，26/30)的报道，可能与空气的湿度对卵囊的感染传播有影响。

自Marotel第一次描述山羊的球虫，到如今被描述的山羊球虫多达20种，但其中一些种类被重复描述，且部分种类是在绵羊体内发现而当作山羊感染的种类[3]。一些科学家在山羊和绵羊间进行了球虫的交叉感染[11-12]，以期证明山羊和绵羊可以同时感染相同种类的球虫，但都未得到预期结果。综合国内外相关文献，多数学者认为感染山羊球虫有13种[3-4,9]。

本次在谢通门县地区共发现12种山羊艾美耳球虫，其中斑点、柯察、苍白艾美耳球虫在西藏地区首次报道，国内其他地区也有检测记录[5-6,10]。据Andrews[13]统计，现有的艾美耳球虫中，阿氏、克氏、家山羊、山羊、妮氏、艾丽艾美耳球虫是在山羊体内发现最多的虫种。本次调查中艾丽和苍白艾美耳球虫为本试验中的优势虫种，李梦婕[14]对尧山白山羊的调查阿氏、克氏、艾丽艾美耳球虫为优势虫种，涂宜强[15]报道的陕西大耳山羊优势虫种为阿氏、雅氏及艾氏艾美耳球虫。夏晨阳[5]在西藏对放牧山羊球虫的调查艾丽、阿氏、山羊、雅氏、约奇、羊艾美耳球虫为优势虫种。不同地区的优势虫种不同，可能与地区的差异、生活环境因素和山羊品种有关，有待进一步的研究。

表1山羊艾美耳球虫检索表

检索特征检索特征或检索结果1无极帽(妮氏、山羊、艾丽、羊、阿普、苍白)2 有极帽(约奇、家山羊、阿氏、克氏、斑点、柯察)52卵膜孔不明显，或无，卵囊球形到椭圆形，小型体积(艾丽、苍白)3 有卵膜孔卵膜孔不凹陷(山羊、羊、妮氏)4 有卵膜孔且卵膜孔呈小凹陷阿普3卵囊呈球形或近似球形艾丽 卵囊呈椭圆形苍白4卵囊卵圆形，中小型体积(20～29．4)μm×(15．4～25．6)μm妮氏 卵囊椭圆形，孢子囊长椭圆形，大型体积山羊 卵囊短椭圆形或近似球形，大型体积羊5卵囊壁光滑6 卵囊壁粗糙76卵囊椭圆形，两侧相对平直阿氏 卵囊呈罐状约奇 卵囊宽椭圆形或近似球形，孢子囊宽椭圆形，中小型体积(19．2～30．2)μm×(15．4～20．8)μm家山羊 卵囊卵圆形，孢子囊宽卵圆形，大型体积(36．4～46．1)μm×(24．3～28．6)μm克氏7卵囊壁呈波浪花纹状，有卵囊残体，中型体积(25．6～35．8)μm×(17．9～25．6)μm斑点 卵囊表面有粒状浮起，有横纹，无卵囊残体，大型体积(43．5～57．4)μm×(30．2～44．2)μm柯察

本次调查球虫在山羊体内主要呈现混合感染(61.7%，129/209)，混合感染2～7种虫种，和国内外其他学者调查基本一致，但是在目前的研究中涉及的混合感染的虫种的平均数量小于Skirnisson[16]所报道的每个样品平均感染7.4种。球虫的混合感染也被认为是引起山羊球虫病的一个重要因素。山羊感染球虫病时会出现腹泻，甚至死亡。有研究表明，球虫病引起的腹泻可能是引起羊死亡的第二大病因[17]。并且球虫病会伴发感染蠕虫病、 肺炎、 疥癣等疾病，如果不及时治疗，会导致山羊的死亡率增加。

综上所述，西藏谢通门县地区山羊球虫的感染率和混合感染率均较高，且感染虫种较多。本次调查在高原地区首次发现了斑点、柯察、苍白艾美耳球虫，更为重要的是山羊球虫检索表的制定为今后其他学者进行羊球虫病的防控提供了重要参考。

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InvestigationofCoccidialInfectionandSpeciesinGoatsinXaitongmoin,Tibet

CHANG Yan-kai1, WU Ya-yun1, ZHENG Shuang-jian1, WANG Lu1, LI Dong-fang1, LI Jia-kui2,3, ZHANG Long-xian1, ZHANG Hui-zheng4, ZHANG Su-mei1

(1. College of Animal Science and Veterinary Medicine, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China;2.College of Animal Science, Tibetan Agricultural and Animal Husbandry College, Linzhi 860000,China;3. College of Veterinary Medicine, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China;4. Fudian Branch Institute of Ruyang Animal Health Inspection Institute, Ruyang 471200, China)

In order to understand the infection situation of goat coccidiosis in Xaitongmoin County of Tibet, 260 goats fecal samples were examined by the sheather floatation method and theEimeriaspecies were identified based on morphological features and size of the sporulated oocysts. Results showed that the prevalence ofEimeriain goats was 81.15% (211/260), and theEimeriaalijeviandEimeriapallidawere the dominant species in 12 identified species in this study, with 52.7% (137/260) and 50.8% (132/260) infection rates and concurrent infection rate 61.7% (129/209)simultaneously.E.punctate,E.kocharli, andE.pallidawere first discovered in Tibet. A retrieval table ofEimeriaspp. in goats was established to identify the species according to the characteristics of sporulated oocysts under microscopy. From above all, effective measures should be taken to control the coccidial infection in Tibet.

Coccidial infection ; Species ; Tibet ; Goats

ZHANG Su-mei

S858.27

A

0529-6005(2017)09-0009-04

2017-02-27

国家现代肉羊产业技术体系建设专项资金项目(NYCYTX-39)；国家现代肉牛牦牛产业技术体系建设专项资金项目(CARS-38)

常艳凯(1992-)，男，硕士生，研究方向为人兽共患寄生虫病学，E-mail:changyankai369@163.com

张素梅，E-mail：zhsumei2815@163.com