激光针灸治疗大鼠慢性萎缩性胃炎实验研究

王 凯，沈 阳，邵雪辉,张晓丽

(1.河北北方学院中西医临床系，河北 张家口 075000；2.河北北方学院医学物理教研室，河北 张家口 075000；3.河北北方学院生命科学中心，河北 张家口 075000)

来稿日期：2016-09-06

王凯(1995-)，男，河北保定人，河北北方学院2013级本科生，研究方向：中医针炙。

激光针灸治疗大鼠慢性萎缩性胃炎实验研究

王 凯1，沈 阳1，邵雪辉2,张晓丽3

(1.河北北方学院中西医临床系，河北 张家口 075000；2.河北北方学院医学物理教研室，河北 张家口 075000；3.河北北方学院生命科学中心，河北 张家口 075000)

目的观察激光针灸对大鼠慢性萎缩性胃炎的治疗作用,为临床应用提供实验依据。方法60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、给药组、针刺组和激光针灸组5组,采用复合法复制大鼠慢性萎缩性胃炎模型,分别给予药物灌胃、针刺和激光针灸治疗14 d，观察各组大鼠外观、胃黏膜状态及病理组织学变化。结果模型对照组大鼠体质量较正常对照组显著降低(P<0.01)，胃扩张,胃黏膜变薄(P<0.05)，腺体萎缩或消失，炎性细胞浸润；治疗后各组大鼠状态均有好转，激光针灸组疗效尤为显著，未见胃扩张，胃黏膜厚度较模型对照组明显增加(P<0.05)，细胞结构、形态正常，腺体排列规整，无腺体萎缩现象。结论激光针灸可明显改善慢性萎缩性胃炎大鼠外观、胃黏膜状态及病理形态学表现,疗效优于给药和针刺。

激光针灸；Wistar大鼠；慢性萎缩性胃炎；胃黏膜

(1.Clinical Department of Traditional Chinese Medicine and Western Medicine,Hebei North University,Zhangjiakou，Hebei 075000，China；2.The Teaching and Research Section of Medical Physics，Hebei North University,Zhangjiakou，Hebei 075000，China；3.Life Science Center,Hebei North University,Zhangjiakou，Hebei 075000，China)

慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis，CAG)是一种以胃黏膜上皮和腺体萎缩、胃黏膜变薄、黏膜基底层增厚或伴肠腺化生、不典型增生为特征的慢性消化系统疾病。临床上常表现为上腹部隐痛、胀满、嗳气、食欲不振、消瘦、贫血等，目前尚无完善、有效的治疗方案[1]。有研究表明中医针刺治疗CAG有较好疗效[2]，氦氖激光针灸治疗炎症性疾病有很好的效果[3]。我们应用激光针灸治疗大鼠CAG，探究其治疗效果。

1 材料与方法

1.1 材料与动物

1.1.1 主要试剂与器材

延参健胃胶囊(天圣制药集团股份有限公司生产，国药准字：Z20120004)，康复新液(四川好医生攀西药业有限责任公司，国药准字：Z51021834)；水杨酸钠AR分析纯(上海国药集团，批号:20140612)；氦氖激光治疗机(吉林省科英激光技术有限责任公司，型号：ZYS)，华佗牌无菌针灸针(苏州医疗用品厂，规格：0.30 mm×25 mm)，光学显微镜(Olympus，BX40)。

1.1.2 实验动物与分组

Wistar大鼠60只，购自首都医科大学实验动物部，清洁级，健康雄性，动物合格证号：SCXK(京)2010-0006，鼠龄3～4个月，体质量180～220 g。实验室温度22～26 ℃，湿度44%～50%，适应性饲养1周后开始实验。随机分成正常对照组、模型对照组、给药组、针刺组和激光针灸组5组，其中正常对照组9只，标准颗粒饲料常规饲养，自由饮水。排除外界因素对实验的影响，各组大鼠一般情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 造模方法

模型对照组、给药组、针刺组和激光针灸组共51只造模，制成CAG动物模型。造模方法参见文献[4]，采用2%水杨酸钠和30%酒精制成混合溶液，每天定点实施灌胃刺激，每日1次，每次2 mL，并辅以劳累(在转轮中跑动，每日1次，每次持续10 min)、饥饱失常(单日禁食，双日足量喂食)等多因素干预8周。造模过程中因灌胃操作不当，7只大鼠死亡。

1.2.2 实验方法

正常对照组采取同样的灌胃刺激方法，灌胃溶液为生理盐水2 mL。每周固定时间对大鼠称重，记录数据。观察大鼠毛色、活动程度、粪便状况。从第10周开始进行治疗干预。给药组采用0.7 g·kg-1延参健胃胶囊和0.6 mL·kg-1康复新液灌服。针刺组、激光针灸组大鼠置于大鼠固定器内，穴位定位按中华人民共和国国家标准“经穴部位Location of point”(GB12346—90国家技术监督局1990-06-07发布，1991-01-01实施取穴)，针刺组采用华佗牌一次性无菌针灸针，针刺大鼠两侧足三里，针刺深度约2～3 mm，每侧1 min，并在针刺期间对针刺部位进行捻针弹针等刺激，增加针刺效果；激光针灸组采用经耦合光纤输出的氦氖激光,波长632.8 nm，输出功率30 mW，光斑直径2 cm，将光斑中心对准穴位点，照射距离10 cm，直接照射左、右足三里穴各3 min。以上干预均为每日1次，连续14 d。末次干预后禁食不禁水24 h，测定体质量后，应用3.5 mL·kg-1的10%水合氯醛腹腔注射，待麻醉后直接断头处死动物，迅速剖腹，取胃，沿胃小弯取胃窦及部分胃体黏膜组织，10%中性福尔马林固定，常规石蜡切片，苏木精—伊红染色，进行病理组织学检查。

1.3 统计学方法

2 结 果

2.1 治疗前后各组大鼠体质量、毛色及活动度比较

造模前造模组(模型对照组、给药组、针刺组和激光针灸组)各组大鼠体质量与正常组比较差异无统计学意义，毛色顺滑，光亮；造模后期造模组大鼠体质量与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05)(表1)，大鼠毛色灰暗、乍毛、出现扎堆现象，个别大鼠粪便呈稀溏状态，正常对照组大鼠毛顺滑、粪便正常、活动度较好。

治疗后与正常对照组比较，模型对照组、给药组和针刺组体质量减少，差异有显著性(P<0.01)；治疗后期激光针灸组与正常组比较体质量差异无统计学意义(表2)。

表1 造模过程中大鼠体质量变化

注：造模第1周造模组大鼠存活51只，第4周存活47只，第8周存活44只。与正常对照组比较*P<0.05。

表2 治疗中各组大鼠体质量变化

注：与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01。

2.2 治疗前后各组大鼠胃黏膜病理学变化

正常对照组大鼠胃较小，胃壁富有弹性，胃黏膜呈粉红色，表面光滑，皱襞隆起、清晰、规整，有较多黏液，无出血点，显微镜下可见胃黏膜较厚度，上皮完整，细胞排列整齐，无脱落或缺损，固有膜腺体形状规则，未见或偶见炎性细胞，黏膜下层无水肿(图1-①)；模型组大鼠胃扩张明显,胃壁变薄,弹性差，胃内容物增多,皱襞低平，走向紊乱，黏膜色泽灰白，可见不同程度的陈旧性出血点，镜下观察发现胃黏膜层变薄，可见不同程度变性或坏死的脱落细胞，腺腔扩张，腺体萎缩或消失，结构不规则，排列紊乱，细胞轻度水肿，间质有多种炎性细胞(主要为淋巴细胞和浆细胞)浸润(图1-②)；给药组大鼠胃略扩张，弹性较差，偶见散在出血点，其胃黏膜较模型对照组增厚，但差异不显著，镜下见胃黏膜细胞排列较整齐，间质有部分炎性细胞(图1-③)；针刺组大鼠多有胃扩张，胃壁薄，皱襞不清，有不同程度的出血点，其胃黏膜较正常对照组明显变薄(P<0.05)，与模型对照组差异不显著，偶见部分腺体成囊性扩张，腺腔内有少量出血点，炎细胞浸润有所减少，但腺体仍有萎缩(图1-④)；激光针灸组大鼠未见胃扩张，胃壁弹性较好，胃黏膜表面光滑，皱襞清晰，胃黏膜厚度较模型对照组明显增厚(P<0.05)，与正常对照组差异无显著性，显微镜下观察可见上皮细胞相对完整，细胞形态正常，腺体排列规整，间质中有少量炎细胞，无腺体萎缩现象(图1-⑤、表3)。

表3 治疗后各组大鼠的胃黏膜厚度比较

注：与正常组比较﹡P<0.05;与模型组比较#P<0.05；与针刺组比较△P<0.05。

3 讨 论

CAG作为一种常见脾胃系统疾病，在中医辩证上属于胃痞。单纯西医治疗不能有效去除病根，相比西医，中医在治疗CAG等脾胃系统疾病时有较好疗效。中医治疗CAG的原则是行气除痞、健脾和胃，可采用针刺方法治疗[5]，因足三里为胃之下合穴，是足阳明胃经上主要的穴位，有健脾和胃、安神补虚之功效[6]，故本研究穴位选取足三里穴。传统针刺在治疗过程中会出现许多问题(如针的保存与消毒、针刺过程中可能损伤人体脏腑、治疗时断针等问题),临床上常会出现晕针、弯针、折针、刺伤、刺禁等,且有可能造成血液传染。我们采用激光针灸替代传统针刺治疗CAG，激光针灸是以低强度激光束直接、聚焦或扩束后照射穴位区表面或深部,对穴位进行刺激,达到疏通经络、行气活血、平衡阴阳等作用[7]。与传统针刺相比，激光针灸具有无痛、无菌、安全、易控、可调等特点,患者更易接受。

本研究采用水杨酸钠和酒精混合溶液灌胃造模，刺激大鼠胃黏膜，导致大鼠胃黏膜细胞损伤、腺体萎缩、炎细胞浸润、肠上皮化生等CAG症状。我们比较了给药、针刺、激光针灸等不同干预方式治疗CAG的疗效，发现给药组和针刺组大鼠体质量增长不明显，大鼠活动度较弱，仍有扎堆现象，胃黏膜较模型对照组增厚，胃黏膜细胞排列较整齐，但胃壁弹性较差，炎细胞浸润有所减少，但腺体仍有萎缩；激光针灸组大鼠毛色光亮、顺滑，体质量增加，活动度强，无扎堆现象，未见胃扩张，胃壁弹性较好，胃黏膜厚度较模型对照组明显增厚(P<0.05)，胃黏膜表面光滑，皱襞清晰，显微镜下可见胃黏膜细胞形态正常，腺体排列规整，无腺体萎缩现象，激光针灸治疗CAG的疗效优于给药和针刺，可作为治疗CAG的有效方法。激光方向性好、强度大，含有能量的激光照射在患者相应穴位上，直接穿透至相应穴位，并将能量释放至相应部位，引起相应部位神经、肌肉一系列的变化，激光具有热效应，激光针灸照射穴位，不仅起到针的作用，还起到了灸的作用，可以达到事半功倍的效果。

[1] 中华医学会消化病学分会.中国慢性胃炎共识意见[J].中华消化杂志，2013,18(1)：24-30.

[2] 李琼,刘晏,吴坚炯.慢性萎缩性胃炎的治疗进展[J].中医学报，2013,28(1)：114-115.

[3] 樊凤杰,洪文学,宋佳霖.激光针灸的研究现状与展望[J].激光杂志,2010,31(5)：58-59.

[4] 邵雪辉,王建国.大鼠实验性慢性萎缩性胃炎的建立[J].张家口医学院学报，2002,19(2):11-13.

[5] 周唯一,陈德轩.针灸治疗慢性萎缩性胃炎的研究进展[J].内蒙古中医药,2008,27(2):44-45.

[6] 石学敏.针灸学[M].北京：中国中医药出版社,2007.

[7] 于丽玫,郭涛,林丽红.He-Ne激光穴位照射治疗分泌性中耳炎60例[J].针灸临床杂志,2003,19(4)：28.

StudyontheTherapeuticEffectofLaserAcupunctureonChronicAtrophicGastritis

WANGKai1,SHENYang1,SHAOXue-hui2,ZHANGXiao-li3

ObjectiveTo observe the therapeutic effect of laser acupuncture on chronic atrophic gastritis in rats,and to provide experimental evidence for clinical application.Method60 Wistar rats were randomly divided into 5 groups:normal control group,model control group,drug group,acupuncture group and laser acupuncture group.The model of chronic atrophic gastritis was made by compound method.The groups except normal control group and model control group were respectively treated with medicine,acupuncture and laser acupuncture for 14 d,then the appearance,the status of gastric mucosa and histopathological changes of rats in each group were observed.ResultsCompared with normal control group,the weight of rats in model control group was significantly lower(P<0.01),and the thickness of gastric mucosa of rats in model control group was thinner as well(P<0.05).There were some phenomenon appearing in model control group,such as,gastric dilatation,the gland atrophy or disappearing and inflammatory cell infiltration.After treatment,the condition of rats in each group improved,especially laser acupuncture group,there was no gastric dilatation or glandular atrophy,the thickness of gastric mucosa of laser acupuncture group was significantly thicker than that of model control group(P<0.05),while the structure and morphology of the cell as well as the gland of laser acupuncture group were normal.ConclusionLaser acupuncture has a significant effect on the appearance,gastric mucosal morphology and pathological changes of rats with chronic atrophic gastritis,and its therapeutic effect is better than those of medicine and acupuncture.

laser acupuncture；Wistar rat;chronic atrophic gastritis；gastric mucosa

R 246.1

A

10.3969/j.issn.1673-1492.2017.10.002

[责任编辑：李蓟龙英文编辑：刘彦哲]