慢性自发性荨麻疹患者血清中IL-31水平与瘙痒程度的相关性

段 娜 郑 瑞 周瑞艳

·论著·

·论著·

山西省留学回国人员科技活动项目择优资助项目(编号：2014-779)

山西医科大学第一医院，太原,030001

郑瑞，E-mail: zhengr2002@163.com

慢性自发性荨麻疹患者血清中IL-31水平与瘙痒程度的相关性

段 娜 郑 瑞 周瑞艳

目的明确慢性自发性荨麻疹患者血清中IL-31水平与瘙痒程度的相关性。方法采用ELISA法检测61例慢性自发性荨麻疹患者和59名健康体检者血清IL-31的含量，视觉模拟量表评价患者瘙痒程度。结果荨麻疹患者血清IL-31水平为28.63±15.38 pg/mL高于对照组的1.74±0.30 pg/mL，两组相比差异具有统计学意义(P<0.001)。慢性自发性荨麻疹患者轻度、中度及重度瘙痒组IL-31水平分别为17.82±14.77 pg/mL，34.28±10.39 pg/mL 和37.68±15.18 pg/mL，各组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论慢性自发性荨麻疹患者瘙痒程度可能与血清IL-31的表达升高有关。

慢性自发性荨麻关疹； 白细胞介素-31； 瘙痒

慢性自发性荨麻疹(chronic spontaneous urticaria, CSU)是皮肤科最常见的变态反应性疾病之一，CSU患者常伴有明显的瘙痒。目前研究证实了多种瘙痒因子包括组胺、白三烯B4、P物质、5-羟色胺、白介素-2、白介素-31(Interlukin 31，IL-31)、血小板活化因子、乙酰胆碱、阿片样肽等。有效控制瘙痒是CSU治疗目标之一，抗组胺药物可以减轻患者瘙痒症状，但仍然有部分患者疗效比较差。本实验采用ELISA法检测CSU患者和健康体检者外周血IL-31表达水平，探讨其与瘙痒程度的关系，这可能对CSU发病机制及瘙痒的治疗有指导性意义。

1 对象与方法

1.1 对象 研究组：来自2016年6～12月在山西医科大学第一医院皮肤科门诊确诊为CSU的患者61例，男24例，女37例，男女比例0.65:1，平均年龄(37.48±13.31)岁。纳入标准：(1)荨麻疹每周发作≥2次，持续时间≥6周，无明显诱因；(2)年龄≥16岁；(3)就诊前3天未用抗组胺类药物，1个月内未用糖皮质激素、免疫抑制剂及免疫调节剂；(4)有阅读能力并能根据病情如实回答问题；排除标准：(1)肝肾功能明显异常(高于正常值1倍以上)；(2)因合并其他疾病需使用药物治疗或严重系统性疾病及肿瘤等；(3)合并感染者；(4)患有其他过敏性疾病或自身免疫性疾病；(5)药物及/或酒精滥用者；(6)妊娠期及哺乳期妇女；(7)不愿意加入本研究及患有神经精神等疾患不能合作者。

健康组：随机抽取同期在我院进行体检的健康正常人群59名，男32名，女27名，男女比例1.19∶1，平均年龄(40.92±11.30)岁。排除近期局部及全身感染性疾病，且均无心、肺、肝、肾、内分泌等系统性疾病，也无哮喘、特应性皮炎等其他过敏性疾病及自身免疫性疾病史。

两组受检者的性别、年龄、职业、文化程度、居住地等均无统计学差异，所有受检者都签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 标本的采集 抽取受试者的肘静脉血3 mL，静置于室温50 min，后3000 r/min离心10 min，取上清液，置-80℃冰箱待检，避免反复冻融。

1.2.2 标本检测 采用人IL-31 ELISA试剂盒检测受试者血清样本中IL-31水平，严格按照说明书操作进行操作。

1.2.3 病情评估 瘙痒程度的评估：瘙痒严重程度的评估是根据视觉模拟评分(Visual analogue scale, VAS)来评价，按瘙痒严重程度从轻到重分0～10不同的等级刻度，其中0代表无瘙痒，10代表难以忍受的瘙痒。瘙痒程度按3级评分：轻度瘙痒(1～3)、中度瘙痒(4～6)、重度瘙痒(7～10)[1]。

荨麻疹活动度评分：我们采用欧洲EAACI/GA2LEN/EDF/WAO推荐的UAS表来评估慢性荨麻疹的活动度[2]，根据CSU患者过去一周内风团数量及瘙痒程度来评分。每日评分为0～6，总分值为0～42。将两部分连续7天的得分相加得到总分并进行分组：轻度组(0～14)、中度组(15～28)、重度组(29～42)。

1.2.4 统计学方法 采用SPSS 22.0软件对数据进行处理，采用SPSS 22.0进行统计学分析。定量数据描述采用均数±标准差，定性数据以率的形式表示。定量资料如果满正态性则采用独立样本t检验或者方差分析进行对比；若不满足则采用基于秩次的非参数检验进行对比。定性资料采用四个表或者R×C列表进行分析。P<0.05认为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 研究组与对照组血清IL-31水平对比 经正态性检验，研究组和对照组IL-31含量均不满足正态分布(P<0.05)，研究组IL-31水平为(28.63±15.38 pg/mL)，对照组IL-31水平为(1.74±0.30 pg/mL)。经Mann-Whitney U检验，两组差异具有统计学意义(Z=-9.095，P<0.001)。见表1。

表1 研究组和对照组IL-31表达情况

2.2 血清IL-31水平和瘙痒程度对比 轻度、中度和重度瘙痒三组之间的比较采用Kruskal-Wallis检验，轻度、中度、重度瘙痒组之间IL-31水平差异有统计学意义(P<0.05)，结果见表2。进一步做Kruskal-Wallis检验两两比较，校正后的检验效度为0.017。结果显示，轻度瘙痒和中度瘙痒以及轻度瘙痒与重度瘙痒之间差异有统计学差异(P<0.016)，中度瘙痒和重度瘙痒之间没有统计学差异(P>0.016)，结果见表3。

表2 不同瘙痒程度分组CSU患者血清IL-31水平对比

表3 不同瘙痒程度分组CSU患者IL-31水平两两比较

3 讨论

CSU是一种常见的反复发作的变态反应性疾病，以速发性风团为主要的临床特征，并伴有瘙痒。CSU病程持续时间长，反复发作风团和瘙痒，迁延不愈，使患者的身心健康受到不同程度的影响，甚至使得他们无法正常工作和生活。国内外大量实验均是通过测定CSU患者体内的细胞因子表达水平来间接反映CSU与Th1/Th2细胞失衡间的关系，并证实主导其免疫应答的是Th2细胞[3]。另有学者发现机体免疫功能异常可能参与CSU的发病，表现为Th1细胞因子水平降低，Th2细胞因子平升高[4]。Th2 细胞可通过分泌细胞因子诸如IL-4、IL-5、IL-13等，也可促进 B 细胞产生IgE直接或间接地引起变态反应[5]。IL-31主要是由激活的Th2产生，其可能也在 CSU 发病中发挥作用[6]。IL-31属于IL-6 家族成员，人IL-31基因定位在12q24.31，全长为904 bp，开放阅读框为495 bp，其编码的蛋白前体由164个氨基酸组成，其活性形式由141个氨基酸组成的具有4个α螺旋结构。IL-31通过与其受体，即由IL-31受体A(IL-31RA)与OSMR(Oncostatin M receptor，制瘤素M受体)构成的二聚体，结合发挥生物学效应。

目前关于IL-31的研究主要集中在特应性皮炎(Atopic Dermatitis，AD)中，认为IL-31是参与瘙痒性疾病的一种新型细胞因子。Takaoka[7]等将有持续瘙痒行为的自发性AD NC/Nga小鼠，与半抗原诱发的无瘙痒行为的AD小鼠进行比较，前者IL-31mRNA的表达明显增加，给小鼠皮肤注射IL-31后出现明显的搔抓行为，且搔抓评分与IL-31mRNA的表达呈正相关。另有研究报道，在大多数自然发生AD的犬中可以检测到犬IL-31，且可致犬产生搔抓的行为，表明该细胞因子可能在瘙痒性过敏性皮肤病中起着重要的作用[8]。腹腔注射抗IL-31单克隆抗体可以有效减少NC/Nga小鼠的瘙痒行为，但对皮炎无任何影响，进一步说明了IL-31与AD瘙痒相关[9]。角质形成细胞能够对IL-31作出反应，干扰角质形成细胞的分化，此外，INF-γ等前炎症因子可刺激角质形成细胞表达IL-31RA[10，11]。体内外实验发现，IL-31可诱导感觉神经元发生转录，导致神经伸长并出现分支[12]。脊髓后根神经节处主要有感觉神经元胞体，痒感主要由感觉神经元无髓C纤维传递。Bando等[13]研究显示在三叉神经结以及脊髓背根神经结神经元上都检测到IL-31R mRNA，且分布在脊髓背根神经结处的IL-31R mRNA与OSMR完全重叠，可形成有功能的受体复合物，对IL-31及0SM的刺激产生反应。亦有报道称，在角质形成细胞和脊髓背根神经节中均有IL-31RA和OSMRβ表达[14]。因此，IL-31可能通过与其脊髓背根神经节处受体结合来传递瘙痒信号。另有研究证实，多次给予小鼠皮内注射IL-31可使小鼠背根神经节胞体表达IL-31RA和OSMRβ增加，当停止注射后2日，IL-31RA的表达降至原来的基线水平[15]。国内学者在AD皮损中发现，在神经纤维束内、真皮层触觉小体及环层小体被囊均有IL-31RA表达，提示IL-31可能直接调节皮肤感觉神经纤维兴奋，参与瘙痒形成[16]。

目前，有关IL-31与CSU的研究国内外仅有少数报道。外国学者在CSU患者体内检测出IL-31水平高于健康对照组，认为IL-31可能在CSU患者瘙痒中也起着一定作用[6，17]。国内学者研究证实CSU患者外周血IL-31水平明显高于健康组，且与皮肤瘙痒程度评分呈正相关，而与风团数量及大小无相关性[18]。我们检测出IL-31水平高于健康对照组，且与瘙痒程度呈正相关。我们还检测出研究组IL-31水平与荨麻疹严重程度呈正相关。

推测IL-31可能参与CSU的发病过程，并与瘙痒程度有关，IL-31RA在表皮全层、汗腺导管、血管内皮细胞，以及触觉小体、环层小体被囊以、皮肤传入神经纤维、脊髓背根神经结均有表达。IL-31水平与瘙痒程度呈正相关，可能是IL-31通过与角质形成细胞、内皮细胞受体结合，激活皮肤感觉神经，经过脊髓投射到中枢神经系统，产生痒觉；也可能通过与角质形成细胞表面的功能性受体结合，从而影响角质形成细胞神经营养因子的产生释放，直接或间接调节皮肤感觉神经纤维功能以及神经肽的合成，从而参与瘙痒形成。此外，血清IL-31表达水平升高也见于其它瘙痒性皮肤疾病，如AD、银屑病、扁平苔癣、变应性接触性皮炎、皮肤T细胞淋巴瘤等。有效的控制瘙痒是CSU治疗目标之一，抗组胺药物可以减轻患者瘙痒症状，但仍然有部分患者疗效比较差。因此，基于已有研究的基础上对IL-31进行更深一步的研究是及其必要的。

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ThecorrelationbetweentheIL-31levelinserumandpruritusseverityinthepatientswithchronicspontaneousurticaria

DUANNa,ZHENGRui,ZHOURuiyan.

FirstHospitalofShanxiMedicalUniversity,Taiyuan030001,China

ZHENGRui,E-mail:zhengr2002@163.com

Objective: To determine the correlation between serum IL-31 levels and itching severity in the patients with chronic spontaneous urticaria.MethodsThe level of IL-31 in 61 patients with chronic spontaneous urticaria and 59 healthy controls was detected by ELISA. The itching severity was assessed by visual analogue scale.ResultsThe average serum level of IL-31 in the patients was 28.63±15.38 pg/mL, which was higher than those in the healthy controls (1.74±0.30 pg/mL), with a significant difference (P<0.001). The average serum levels of IL-31 in the patients with mild, moderate and sever itching were 7.82±14.77 pg/mL, 34.28±10.39 pg/mL and 37.68±15.18 pg/mL respectively. The differences among the groups were significant (P<0.05).ConclusionThe itching severity in the patients with chronic spontaneous urticaria may be associated with the increasing level of IL-31.

chronic spontaneous urticaria; interleukin-31; pruritus

(收稿：2017-04-27 修回：2017-07-12)