气相色谱法测定番茄中毒死蜱农药残留量的不确定度评定

2017-11-04吴姻如孙超斌江苏省宜兴市农林局406江苏省宜兴市市场监督管理局406

上海农业科技 2017年5期

吴姻如方宇孙超斌（江苏省宜兴市农林局 406；江苏省宜兴市市场监督管理局 406）

吴姻如1方宇2孙超斌1（1江苏省宜兴市农林局 214206；2江苏省宜兴市市场监督管理局 214206）

为给农残检测质量控制提供可靠依据，采用NY/T 76 1-20 08气相色谱法测定番茄中毒死蜱农药残留量，分析了运用该方法测定产生的不确定度。结果表明，样品前处理、标准溶液配制、标准曲线校准、分析仪器和样品重复测定产生的相对不确定度分别为2.647×10-3、9.248×10-3、4.779×10-3、1.021×10-3和1.794×10-3，合成相对不确定度为1.094×10-2，扩展不确定度为0.008 mg/kg（k=2），番茄中毒死蜱残留量可表示为（0.359±0.008）m g/k g。产生不确定度的主要来源是标准溶液的配制和标准曲线的校准，贡献率超过9 5%，因此在检测中应重点控制这两个过程。

不确定度；气相色谱法；番茄；毒死蜱残留量

在我国自2008年1月起彻底停止甲胺磷、对硫磷、甲基对硫磷、久效磷和磷胺等5种高毒有机磷农药的生产、流通和使用，毒死蜱作为替代高毒有机磷类农药的主要有机农药品种，其应用日益广泛[1]。在叶菜类、甘蓝类和茄果类等蔬菜生产中，喷洒有效成分为毒死蜱的农药，对蚜虫、飞虱、菜青虫和小菜蛾等有较好的防治效果，但不可避免地会引起农药残留问题。在实际工作中，一般采用NY/T 761-2008方法[2]测定蔬菜中毒死蜱农药残留量，通常测量结果包括两个部分：一是测量结果本身，二是不确定度[3]。其中，不确定度越小，说明测量结果与真值越靠近，其质量越高，数据越可靠。因此，测量不确定度就是对测量结果质量和水平的定量表征[4]。本文采用JJF 1059.1-2012《测量不确定度的评定与表示》[5]的方法，分析评定了气相色谱法测定番茄中毒死蜱残留量的不确定度，以期找出不确定度产生的来源，从而为农残检测质量控制提供可靠依据。

1 试验设计

1.1 试验原理

试样中有机磷类农药经乙腈提取，提取溶液经过滤、浓缩后，用丙酮定容，注入气相色谱仪，农药组分经毛细管柱分离，用火焰光度检测器（FPD磷滤光片）检测。以保留时间定性、外标法定量。

1.2 仪器

Agilent 7890A（配FPD检测器，色谱柱为DB-1701，0.32mm×30m×0.25 μm），AB204精密天平（梅特勒公司），0.50 mL、1.00 mL、2.0 mL、5.0 mL、10.0 mL、50.0 mL移液管，5.0 mL、10.0 mL容量瓶，食品加工器，高速匀浆机，水浴式氮吹仪，微型漩涡混合仪。

1.3 试剂

乙腈（美国TEDIA公司，HPLC级），丙酮（国药集团化学试剂有限公司，HPLC级），氯化钠（国药集团化学试剂有限公司，分析纯），毒死蜱标准溶液浓度为100μg/mL（编号为GSB05-1869-2008，农业部环境保护科研监测所）。

1.4 方法

准确称取番茄样品m，加入乙腈Va，高速匀浆2 min后用滤纸过滤，滤液收集到装有6 g氯化钠的100 mL具塞比色管中，收集滤液50 mL，盖上塞子，剧烈震荡1 min，在室温下静置30 min，使乙腈相与水相分层。从具塞比色管中吸取乙腈溶液Vb，放入150 mL烧杯中，将烧杯放在80 ℃水浴锅中加热，管内缓缓通入氮气，蒸发近干，加入2.0 mL丙酮，盖上铝箔，备用。将上述备用液完全转移至5.0 mL容量瓶中，用丙酮定容至Vc，在漩涡混合仪上混匀，移入2 mL自动进样器样品瓶中，供色谱测定。

2 数学模型

3 不确定度来源分析

不确定度来源于样品前处理引起的不确定度urel(前处理)、标准溶液的配制引起的不确定度urel(标配)、标准曲线的校准引起的不确定度urel(曲线)、分析仪器引起的不确定度urel(仪器)、样品重复测定引起的不确定度urel(重复)。

3.1 样品前处理引起的不确定度

3.1.1 样品称量引起的不确定度

用电子天平准确称取样品25.0 g，电子天平的最大允许误差为±0.0002 g，概率分布均匀，取k=√3，由于称量时分2次完成，第1次是烧杯称重并归零，第2次是样品称重，则标准不确定度为u(m)=√2×0.0002/√3=1.633×10-4g，所以样品称量引起的相对不确定度为 urel(m)=1.633×10-4g/25.0 g=6.532×10-6。见表1。

3.1.2 试液体积引起的不确定度

样品前处理过程中，以50.0 mL单刻度移液管移取乙腈体积Va（50.0 mL），以10.0 mL单刻度移液管吸取上层提取液体积Vb（10.0 mL），以5.0 mL容量瓶定容样液体积Vc（5.0 mL），查其检定证书，其示值误差分别为±0.050 mL、±0.020 mL、±0.020 mL。按均匀分布计算，包含因子标准不确定度分别为：见表1。

表1 样品前处理引起的不确定度分量情况

3.2 标准溶液配制引起的不确定度

配制毒死蜱标准溶液时，第1次将100 mg/L标准溶液1.00 mL完全转移到10.0 mL容量瓶中，用丙酮定容至质量浓度为10.0 mg/L；第2次用1.00 mL刻度管吸取10.0 mg/L 1.00 mL溶液于10.0 mL容量瓶中，用丙酮定容至1.0 mg/L；第3次用5.0 mL刻度管吸取1.0 mg/L溶液5.0 mL于10.0 mL容量瓶中，用丙酮定容至0.5 mg/L；第4次用2.0 mL刻度管吸取1.0 mg/L溶液2.0 mL于10.0 mL容量瓶中，用丙酮定容至0.2 mg/L；第5次用1.00 mL刻度管吸取1.0 mg/L溶液1.00 mL于10.0 mL容量瓶中，用丙酮定容至0.1 mg/L；第6次用0.50 mL刻度管吸取1.0 mg/L溶液0.50 mL于10.0 mL容量瓶中，用丙酮定容至0.05 mg/L。则式中，c为毒死蜱标准溶液的质量浓度；Vi为量取体积，Vi=（1.00，5.0，2.0，1.00，0.50）mL；Vj为定容体积，Vj=10.0 mL。由该公式和不确定度传播律导出，

3.2.1 标准溶液的质量浓度引起的不确定度

标准物质证书提供的毒死蜱标准溶液质量浓度的测量不确定度为±0.08 mg/L，置信概率为95%，查表得出k=1.96，其标准不确定度为u(c0)=0.08/1.96=4.082×10-2mg/L，相对不确定度为：urel(c0)=4.082×10-2/100=4.082×10-4。

3.2.2 标准溶液稀释引起的不确定度

标准溶液稀释分别采用1.00 mL、5.0 mL、2.0 mL、1.00 mL、0.50 mL移液管，示值允差分别为±0.007 mL、±0.015 mL、±0.010 mL、±0.007 mL、±0.005 mL，按均匀分布计算标准不确定度分别为：见表2。

3.2.3 标准溶液定容引起的不确定度

10.0 mL容量瓶的示值允差为±0.020 mL，按均匀分布计算标准不确定度为相对不确定度为urel(Vj)= 1.155×10-2/10.0=1.155×10-3。

将以上不确定度分量带入公式，则标准溶液的配制引起的相对不确定度为

表2 标准溶液配制引起的不确定度分量表

3.3 标准曲线校准引起的不确定度

采用5个质量浓度的毒死蜱标准溶液，分别测定2次，得到相应峰面积，用最小二乘法进行拟合，得出直线方程y=6 323.67x-48.01，r=0.99998，斜率b=6 323.67。见表3。式中，p为测定的次数，n为测定标准溶液的次数，b为标准曲线的斜率，w为测定w的平均值，x为测定标准溶液的平均值。所以标准曲线校准引起的相对不确定度为见表4。