几种HIV抗体检测的方法学比较

韩 丹

（重庆市开州区妇幼保健院检验科，重庆 405499）

几种HIV抗体检测的方法学比较

韩 丹

（重庆市开州区妇幼保健院检验科，重庆 405499）

目的比较分析几种艾滋病病毒（HIV）抗体检测的方法学。方法选择6种血清盘来评价三种类型HIV抗体检测方法的诊断试剂的精密度、分析特异性、分析灵敏度、特异性和敏感性等指标。结果6种试剂评估基础血清盘的特异性均大于97.5%，敏感性均为100.0%。结论快速诊断试剂和ELISA诊断试剂的特异性和敏感性较高，抗原抗体检测试剂的敏感性相对较高，可以将其当成抗体筛查试剂。4种ELISA试剂的板内精密度存在较大差别。

艾滋病病毒；抗体检测；方法学

在HIV检测技术快速完善和更新的过程中，也有效缩短了HIV检测的窗口期，提高了检测结果的准确率[1]。现阶段临床中在进行HIV检测时，常用的试剂包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、快速检测试剂、蛋白印迹试验（WB）、反转录聚合酶链反应（RT-PCR）等。我室为HIV初筛实验室，常用的实验方法为酶联免疫吸附试验（ELISA）和快速检测，本研究主要比较分析几种艾滋病病毒（HIV）抗体检测的方法学，现做如下总结。

1 资料与方法

1.1 一般资料

①血清盘：1）10支美国病理学家协会的能力验证血清盘，其中HIV抗体阳性共8支，HIV抗体阴性共2支。2）选择美国SeraCare公司的10套商业阳转血清盘。3）3支参比室精密度质控品组成的精密度血清盘，低、中、高3个HIV抗体滴度。4）经3组强阳性混合样本倍比稀释系列组成的线性稀释系列血清盘。5）由10份HCV抗体阳性样本、15份梅毒抗体阳性样本和15份HBsAg抗体阳性样本组成的干扰样本血清盘。6）由40分阴性样本和40份阳性样本组成的基础血清盘。

②试剂：试剂共包括3类，分别为酶联免疫法、胶体金法/胶体硒法、重组免疫印迹法/蛋白印迹法。

1.2 方法

①评估方法：选择基础血清盘来对试剂的特异性和敏感性进行评估；在评估试剂分析特异性时，应通过干扰血清盘来完成；在评估试剂诊断线性范围时，则通过线性稀释系列血清来完成；在评估ELISA试剂的板内精密度时则通过精密度血清盘来完成，并将变异系数（CV%）当成评价指标；选择商业阳转血清盘来对试剂的分析灵敏度进行评估；选择CAP能力验证血清盘来进行质量控制。

②质量控制：严格根据试剂盒说明书来开展实验操作，对结果进行判定。选择国家参比实验室所提供的室内质控品。

1.3 统计学分析

选用SPSS 20.0统计学软件对本研究资料进行统计分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间室比较采取t检验，计数资料以n（%）表示，组间比较采取x2检验，设P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 特异性和敏感性分析

HIV抗体检测试剂、HIV抗原抗体检测试剂、HIV快速诊断试剂的特异性均大于97.5%（39/40），敏感性均为100.0%（40/40），国产抗原抗体诊断试剂存在1例假阳性，其他试剂则均为100.0%。

2.2 分析灵敏度观察

各试剂检测结果的阳性率如表1所示。

表1 阳转血清盘的阳性率观察

2.3 分析特异性

2种HIV快速检测试剂和4种HIV ELISA检测试剂的特异性均为100.0%。

2.4 板内精密度

精密度血清盘各个试剂的变异系数如表2所示。

表2 变异系数观察（CV%）

2.5 线性范围

4种HIV ELISA检测试剂平行检测3个线性稀释系统，检测结果处于线性范围内的个数如表3所示。

表3 线性稀释血清盘检测结果

3 讨 论

现阶段临床中在进行HIV抗体检测时，常用的试剂主要包括WB、PCR、ELISA以及HIV快速检测等[2]。HIV快速检测时通过免疫层析分析技术和特异性抗体抗原反应来对血液中有无HIV1/2抗体进行定性检测。HIV快速检测的技术水平要求不高、操作简单方便、检测价格低、稳定性理想等，适合应用于基层实验室[3]。

ELISA检测试剂盒是在固相载体表面有效固定待测抗体或者抗原，对抗原或抗体进行酶标记，并和已固定的抗原或者抗体形成特异性反应，在加入酶底物反应后则会出现不同的颜色，利用分光光度计来观察分析检测结果，为半定量检测技术[4]。在HIV抗体确证中，蛋白印迹试验的应用非常广泛。蛋白印迹试验的检测原理是在硝酸纤维膜上固定HIV的主要抗原，待检测标本中如果存在HIV特异性抗体，即可和纤维膜上相应位置的抗原出现反应，形成条带，而且能通过肉眼进行观察辨别。重组免疫印迹试验不需要利用电泳来分离特异性抗原，直接将其将在固相膜上，通过显色条带能对血清中的吸附抗原的特异性抗体进行有效提示。除此之外还能通过条带的显色情况来对抗体效价进行大致估计。

总之，每一种检测试剂均具有自身的优点和不足，在实际的临床应用中应结合地域人群和感染情况，选择合理的检测方法，进而来对HIV感染进行有效预防和控制。

[1] 贺 敏.研究酶联免疫法与金标法用于受血者HIV抗体检测中的临床效果[J].大家健康(中旬版),2016,10(10):55-55.

[2] 史兆驹.HIV抗体检测阳性结果专业告知服务机制的效果评估[J].中国医学创新,2016,13(12):145-148.

[3] 马永娟,王 红,周 迪,等.HIV抗体检测确证试验结果分析[J].黑龙江医药科学,2016,39(4):79-80,82.

[4] 杨 潋.HIV抗体检测产生不确定结果的特点及随访情况分析[J].大家健康(中旬版),2016,10(12):56-56,57.

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ISSN.2095-8242.2017.054.10535.02

本文编辑：吴 卫