甲胎蛋白联合异常凝血酶原检测在肝癌早期诊断及疗效评估中的价值分析

林炳柱，刘小燕

(广东省云浮市人民医院检验科，广东 云浮 527100)

·论著·

甲胎蛋白联合异常凝血酶原检测在肝癌早期诊断及疗效评估中的价值分析

林炳柱，刘小燕

(广东省云浮市人民医院检验科，广东 云浮 527100)

目的探讨甲胎蛋白(alpha-fetoprotei，AFP)和异常凝血酶原(abnormal prothrombin，APT)联合检测在肝癌早期诊断及疗效评估中的临床价值。方法选择肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)患者52例、肝硬化患者38例，同时随机抽取健康体检者30例为对照组。比较对照组、肝硬化组和HCC组AFP及APT的检测值；计算AFP、APT单独检测及联合检测HCC的特异度、灵敏度及准确度；分析HCC血清中AFP与APT的关系。结果HCC组AFP、APT检测值明显高于肝硬化组和对照组(P<0.05)。APT单独检测HCC的特异度明显高于AFP(P<0.05)；AFP、APT联合检测HCC的灵敏度明显高于AFP、APT单独检测(P<0.05)；AFP、APT联合检测HCC的特异度(2项同时超过临界值判定为阳性)明显高于AFP单独检测(P<0.05)；AFP、APT联合检测HCC的准确度明显高于AFP单独检测(P<0.05)。Spearman相关分析显示AFP和APT均为独立升高，两者无相关性(P>0.05)。结论AFP、APT是临床诊断HCC的重要血清学指标，良好地区分了HCC和肝硬化，二者联合检测可显著提高检测的灵敏度，并一定程度上改善了检测准确度，2项同时超过临界值判定为阳性时特异度也保持在较高水平，对HCC具有重要诊断价值。

肝肿瘤；甲胎蛋白类；异常凝血酶原

肝细胞性肝癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)属于高发病率的恶性肿瘤，在国内比较常见，病死率居恶性肿瘤第二位，预后较差，术后复发率高。相关研究显示，在今后十几年内HCC发病率还将继续升高[1]。大部分HCC患者初次就诊时已到中晚期，丧失了最佳的手术治疗时机，故对早期有效诊断HCC是非常必要的。诊断HCC主要根据影像学检查和肝组织病理活检等方法，不具备普查性，给肝癌早期诊断和筛查带来困难[2]。HCC早期诊断成为HCC研究的重点，肿瘤标志物检测对患者无损伤，性价比较高，已普遍被患者认可。目前证实，甲胎蛋白(alpha-fetoprotei，AFP)是首选的肝癌诊断和判断预后的血清标志物[3]。但临床实践发现，AFP特异度和灵敏度均不甚理想，对HCC的诊断价值不高。异常凝血酶原(abnormalprothrombin，APT)是目前比较常用的标志物，其特异度较高，对HCC诊断有较高的临床价值[4]。APT作为HCC高特异度的血清标志物，在20世纪80年代就受到了临床广泛关注，但目前其应用较少[5]。虽然每一种血清标志物对HCC早期诊断均具有一定临床意义，但它们的灵敏度及特异性并不十分理想，均具有一定局限性。本研究旨在探讨APT和AFP联合检测在HCC早期诊断中的临床意义，报告如下。

1 资 料 与 方 法

1.1 一般资料 选择2014年8月—2015年8月在我院就诊的HCC患者52例，均通过CT、MRI以及病理活组织检查确诊，男性33例，女性19例，年龄26～79岁，平均年龄(53.81±8.67) 岁，均未接受肝动脉化疗栓塞、射频消融、肝脏外科切除等肝癌相关治疗；肝硬化患者38例，通过临床表现、超声和CT等检查排除HCC，男性25例，女性13例，年龄38～81岁，平均(55.62±9.73) 岁。同时随机抽取在我院进行体检的健康者30例为对照组，男性19例，女性11例，年龄26～75岁，平均(52.18±5.46)岁。在近3个月内所有受检者均未服用华法林抗凝剂和维生素K等药物。3组性别、年龄差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

本研究经医院伦理委员会批准后实施，所有患者均对本研究目的和检查方法知情同意，主动签署知情同意书，所有患者的临床资料均不公开，充分尊重患者的隐私权。

1.2 方法 采集各组受检者清晨空腹血液，分离血清，-80 ℃条件下保存。采用电化学发光法测定AFP，试剂盒由罗氏公司提供，应用东槽AIA2000全自动免疫分析仪，操作均严格按照试剂说明书和实验室内质控文件进行。

1.3 观察指标 ①比较对照组、肝硬化组和HCC组AFP和APT检测值。②计算AFP和APT单独检测及联合检测HCC的特异度、灵敏度及准确度。③分析HCC血清中AFP与APT的相关性。

1.4 统计学方法 应用SPSS20.0统计学软件分析数据。计量资料比较分别采用单因素方差分析和q检验；灵敏度、特异度及准确度计算采用四格表诊断性试验；相关性采用Spearman相关分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 3组AFP和APT检测值比较HCC组AFP、APT值明显高于肝硬化组和对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)；肝硬化组与对照组AFP、APT值差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 3组AFP和APT检测值比较Table 1 Comparison of AFP and APT detection values among 3 groups

*P<0.05与对照组比较 #P<0.05与肝硬化组比较(q检验)

2.2 AFP和APT单独检测及联合检测HCC的特异度和灵敏度 AFP、APT单独检测HCC灵敏度差异无统计学意义(χ2=0.854，P=0.457)；APT单独检测HCC的特异度与AFP比较明显升高，差异有统计学意义(χ2=6.585，P=0.003)；AFP、APT联合检测HCC的灵敏度(任何1项超过临界值判定为阳性)明显高于AFP、APT单独检测(χ2=5.319、5.953，P=0.004、0.003)；AFP、APT联合检测HCC的特异度(2项同时超过临界值判定为阳性)明显高于AFP单独检测(χ2=6.179，P=0.003)；AFP、APT联合检测HCC的准确度(任何1项超过临界值判定为阳性)明显高于AFP单独检测(χ2=5.148，P=0.005)。见表2。

表2 AFP和APT单独检测及联合检测HCC的特异度和灵敏度比较Table 2 Comparison of specificity and sensitivity for detecting HCC by single or combined AFP and APT (例数)

2.3 HCC中血清AFP与APT的关系 52例HCC患者中，AFP和APT同时升高27例(51.92%)；APT升高9例(17.31%)，但AFP水平处于临界值以下；AFP升高11例(21.15%)，但 APT水平处于临界值以下。通过散点图和Spearman相关分析综合分析发现，AFP和APT均为独立升高，两者无相关性(rs=0.048，P=0.621)。

3 讨 论

HCC是恶性肿瘤中的一种，具有较高病死率，发病隐匿，疾病早期缺乏典型临床症状，就诊时多数已为中晚期[6]。近年来，由于医学技术的不断发展，HCC生存率有了一定程度的提高，但5年生存率仍然较低，未超过10%。为了提高HCC生存率，早期诊断显得至关重要。AFP是一种与胚胎具有相关性的蛋白质，是目前为止发现最早和应用最广的肿瘤标志物，广泛应用于HCC的普查、诊断中，在判断治疗效果和预测复发等方面同样具有重要的临床价值[7]。临床研究显示，AFP的生物学功能较复杂，具有促进肝癌细胞增殖、抑制凋亡和免疫逃避的作用[8]。AFP已被研究证实在HCC患者血清中的阳性百分比较高，是HCC诊治应用最广的血清学标志物之一[9]。但由于血液中AFP浓度与癌肿直径、分化、生长及变性坏死有密切关系，故HCC患者有一部分也会表现为AFP浓度低或AFP检测阴性，且AFP在小肝癌患者中的检出率较低，会发生假阳性和假阴性病例。本研究结果显示，HCC组血清AFP水平明显高于肝硬化组和对照组；AFP对HCC诊断的准确度为75.56%，特异度为78.95%，灵敏度为73.08%，均有待提高。AFP虽然被认为是诊断HCC的首选指标，但HCC患者仍有20%多的比例处于正常AFP水平，而一部分恶性肿瘤患者的AFP值也会有所升高，限制了AFP单独检测在HCC早期诊断中的临床价值[10-11]。为此，寻找特异度和灵敏度更高的HCC标志物意义重大。

蛋白组学和分子生物学技术在近几年不断发展，其应用也越来越广泛，在HCC标志物的研究方面目前取得了重大进步[12]。然而，大部分HCC标志物如高尔基蛋白73、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3、某些生长因子或细胞因子等还只是停留在实验室研究阶段。研究显示，这些肿瘤标志物密切关系着HCC的发生和发展，但其自身检测方法存在敏感度和特异度不高等问题，使其临床应用价值受到限制[13]。在以往的研究中发现，相比于AFP来说，高尔基蛋白73诊断HCC的敏感度和特异度较高[14]。但高尔基蛋白73的检测试剂目前只有免疫印迹法，此种方法重复性和精确度差，耗费时间和精力，故未得到广泛推广。

本研究重点分析AFP和APT联合检测对HCC诊断的临床意义。APT的产生与肝细胞病变密切相关，但至今仍未完全清楚其发生机制[15]。目前认为APT的产生与肝癌细胞内凝血酶原前体异常羧基化和缺乏维生素K相关[16]。一般条件下，在维生素K的参与下，羧化凝血酶原前体的谷氨酸氨基端产生正常凝血素，其含有10个γ-羧基谷氨酸端，如果肝细胞发生病变，不成熟的、缺乏羧基谷氨酸端的凝血素分泌入血液而被检测到[17]。因此，APT又称为右旋-γ-羧基凝血酶原、维生素K缺乏或拮抗剂Ⅱ诱导的蛋白质，其检测经相关临床研究证实对诊断原发性肝癌的临床价值较高，进一步提高了HCC的诊断水平[2，4]。

相关临床调查显示，APT诊断HCC的特异度较高，APT单独检测诊断HCC的特异度为91.1%，HCC经APT和AFP联合检测诊断的特异度为94.1%[18]。本研究结果与之相近。本研究HCC经AFP、APT单独检测诊断的灵敏度(73.08%、69.23%)差异无统计学意义；HCC经APT单独检测诊断的特异度(92.11%)与AFP(78.95%)比较明显升高；AFP、APT联合检测诊断HCC的灵敏度(任何1项超过临界值判定为阳性)明显高于AFP和APT单独检测，准确度也较AFP和APT单独检测高；而特异度相较于AFP和APT单独检测虽然有所降低，但仍维持在一个较高的水平。提示HCC经AFP、APT联合检测(任何1项超过临界值判定为阳性)诊断既弥补了AFP、APT单独检测时的低灵敏度，又一定程度上提高了检测的准确度，同时特异度也可维持在较高水平。通过散点图和Spearman相关分析综合分析发现，AFP和APT均独立升高，两者无相关性，这可能与2种标记物在细胞中合成途径不同有关。以上结果表明，在诊断HCC方面，AFP和APT具有互补性，这就为进一步探讨AFP、APT联合检测在诊断HCC中的临床价值提供了理论依据。此外，癌细胞是否有转移或治疗后是否有复发可以通过血清APT水平变化监测[19]。治疗前血清APT水平升高的患者预后效果往往差于治疗前血清APT水平低的患者[20]。所以，APT既可以作为区分良恶性HCC的重要血清标志物，也可以作为临床评估HCC预后的重要预测因子。表明AFP、APT联合检测为HCC临床诊断提供了有价值的参考，可以更好地指导临床工作。

综上所述，AFP、APT是临床诊断HCC的重要血清学指标，可良好地区分HCC和肝硬化，二者联合检测(任何1项超过临界值判定为阳性)可显著提高检测的灵敏度，并一定程度上改善检测准确度，2项同时超过临界值判定为阳性时特异度也保持在较高水平，对HCC具有重要诊断价值。

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(本文编辑：赵丽洁)

AnalysisofthevalueofAFPcombinedwithabnormalprothrombinintheearlydiagnosisandcurativeeffectevaluationoflivercancer

LINBing-zhu，LIUXiao-yan

(DepartmentofLaboratory,YunfuPeople′sHospital,GuangdongProvince,Yunfu527100，China)

ObjectiveTo analyze the clinical value of combined detection of alpha-fetoprotein(AFP) and abnormal prothrombin(APT) in the early diagnosis and therapeutic evaluation of hepatocellular carcinoma.MethodsFifty-two patients with hepatocellular carcinoma(HCC) and 38 patients with cirrhosis were selected, and 30 healthy subjects were randomly selected as the control group.The detection values of AFP and APT were compared among 3 groups. The specificity, accuracy and sensitivity of AFP and APT single or combine detected for HCC were compared. The relationship between AFP and APT in serum of HCC was analyzed.ResultsThe values of AFP and APT in HCC patients were significantly higher than those in liver cirrhosis group and normal group(P<0.05).The specificity of APT alone detection for HCC was significantly higher than that of AFP(P<0.05). The sensitivity of the combined detection of AFP and APT for HCC was significantly higher than that in the single detection(P<0.05).The specificity of combined detection of AFP and APT for HCC was significantly higher than that in AFP single detection(P<0.05). The sensitivity of the combined detection of AFP and APT for HCC was significantly higher than that in AFP single detection(P<0.05). The relationship of AFP and APT were independent, and there was no correlation between them through the analysis of scatter plots and Spearman correlation analysis(P>0.05).ConclusionAPT and AFP were important serological markers for clinical diagnosis of HCC, which could distinguish HCC and cirrhosis. Combined detection of AFP and APT could improve the diagnostic accuracy and sensitivity, and the diagnostic specificity remained at a high level. They have a profound diagnostic value for HCC.

liverneoplasms；alpha-fetoproteins；abnormalprothrombin

R735.7

A

1007-3205(2017)10-1193-04

2016-11-08；

2016-12-25

林炳柱(1980-)，男，广东湛江人，广东省云浮市人民医院副主任检验师，医学学士，从事临床检验学研究。

10.3969/j.issn.1007-3205.2017.10.018