畜禽衣原体病垂直传播阻断技术示范应用

石瑜 朱雅宁 袁雪涛（天津市动物疫病预防控制中心300402）

畜禽衣原体病垂直传播阻断技术示范应用

石瑜 朱雅宁 袁雪涛（天津市动物疫病预防控制中心300402）

鉴于天津地区畜禽衣原体病已广泛存在，给养殖业带来巨大的经济损失，为有效防控衣原体病的发生，我们引进新技术对衣原体从垂直传播途径上进行阻断，从而降低发病率，减少死淘率。

衣原体病;药物阻断;示范应用

衣原体（Chlamydia）是感染人和多种畜禽的病原体,现已遍布世界各地,主要引起猪、牛流产和禽的产蛋下降,是一种接触性传染病。本研究采取药物阻断技术,阻断种公畜禽精液衣原体传播技术,从而有效防控衣原体病的发生,降低发病率,死淘率,取得良好的经济效益。

引进中国农业大学提供的 “畜禽衣原体综合防治技术与应用研究”项目中的衣原体垂直传播阻断技术在天津市进行技术转化,为衣原体的防治提供新的技术途径,对畜禽衣原体从垂直传播途径上进行阻断,从而有效防控畜禽衣原体的发生,降低养殖业的经济损失和公共卫生危害。

1 药物阻断技术

1.1 材料

1.1.1 样品来源及种类

（1） 禽样品

选取天津市3个区县3个养殖场,每场采集100枚种蛋,阻断技术应用前、后各采集一次,共计采集样本600份,具体信息见表1。

表1 禽场采样信息表

（2）猪、牛样品

选取天津市5个区县5个养殖场（其中猪场2个,牛场3个）,每场采集新生犊牛血清样本50份、仔猪血清样本100份,阻断技术应用前、后各采集一次,共计采集样本700份,具体信息见表2。

1.1.2 试剂

表2 猪、牛养殖场采样信息表

衣原体间接血凝 (IHA)试验试剂,由中国农业科学院兰州兽医研究所提供,抗原批号130524,稀释液130524,阳性血清130403,阴性血清130524。

1.2 阻断方法

1.2.1 鸡胚药物阻断技术

（1） 药物

盐酸强力霉素和盐酸环丙沙星原料药：购自天津恒基利得科技发展有限公司,批号分别为20130603,20130518。

（2）药物的配制

盐酸强力霉素：称取2mg强力霉素,加入2ml灭菌蒸馏水, 配成1mg/ml的原液 (即1000μg/ml)。

盐酸环丙沙星注射液：称取2.5mg,加入2.5ml蒸馏水,配成 lmg/ml的原液 (即1000μg/ml)。以上药物均用0.22μm的针头滤器过滤除菌,置于-20℃冰箱保存。

（3）接种剂量和方法

接种剂量分别为：盐酸强力霉素：100.0μg/枚,盐酸环丙沙星：100.0μg/枚,接种7～8d鸡胚的卵黄囊腔,0.2ml胚（50ml卵黄液/枚）,石蜡封口,在37～38℃孵育。接种后每天进行灯检,直到鸡胚孵化,观察鸡胚发育特点和每100枚种蛋的孵化率以及健康雏鸡的数量。

1.2.2 精液药物阻断技术

（1） 药物

注射用乳糖酸红霉素 (0.3g,30万单位),购自哈药集团制药总厂,批号20130219。

（2）药物的配制

乳糖酸红霉素针剂的配制：加灭菌注射用水10ml至0.5g乳糖酸红霉素粉针瓶,用力震摇至溶解。然后加生理盐水稀释,红霉素浓度在1～5%以内。

（3）精液阻断方法

精液加入生理盐水进行1：1稀释,每0.25ml精液加入0.25ml已配制好的药物溶液,混匀后,分别对待配种的母畜进行人工授精。

1.3 检测方法

间接血凝 (IHA)试验,IHA冻干衣原体抗原、标准阳性和阴性血清均由兰州兽医研究所提供。

（1） 每孔加入75μl稀释液。

（2）在第一孔加入25μl被检血清,4倍递增稀释3孔（1：4～1：16）, 第3孔弃去25μl。 同一板上同时设阳性、 阴性和空白对照各2孔。

（3）每孔加入稀释的抗原 25μl,37℃作用2h后判定结果。

判定标准：在对照孔成立的条件下,观察各待检血清孔,被检血清1：16孔为++及以上凝集者为阳性,1：4孔为++及以下者为阴性。

2 示范应用

将药物阻断方法应用于全市3个种鸡场、3个奶牛场和2个猪场,使用IHA方法对未应用药物阻断技术和应用药物阻断技术种蛋的孵化率和血清阳性率进行比较,结果显示,应用该阻断技术后种蛋的孵化率明显提高,仔猪和犊牛的血清阳性率明显降低,具体结果见表3和表4。

3 讨论和结论

将药物阻断方法应用于天津市的8个畜禽养殖场,对未应用和应用该技术后衣原体病的检测结果进行对比。结果显示,3个示范禽场未应用药物阻断技术时种蛋的孵化率平均为92%,应用阻断技术后种蛋的孵化率平均为95%,平均提高3%；5个家畜示范场应用该技术后,配种成功率明显提高,怀孕母畜的流产率大大降低。此外,未应用药物阻断技术的仔畜的血清样本抗体阳性检出率为9.14%,应用该技术后的仔畜血清样本抗体阳性率为6.57%,下降2.57%。仔猪和犊牛的血清抗体阳性率有明显降低,健康状况有效提高。

由于药物阻断技术对操作人员技术熟练程度要求较高,鸡胚接种操作时会增加种蛋破损,造成一定的经济损失；此外,如果连续进行药物阻断,衣原体产生的耐药性可能会影响阻断效果,虽然药物阻断在禽衣原体的垂直传播上是安全有效的,综合考虑其风险因素,不适合在种禽养殖场进行大面积推广。

表3 种蛋的孵化率比较

表4 犊牛和仔猪血清阳性检出率比较