羊布氏杆菌病阴道免疫法推广
2017-10-12于广秋
于广秋
(辽宁省建昌县畜牧兽医局125300)
羊布氏杆菌病阴道免疫法推广
于广秋
(辽宁省建昌县畜牧兽医局125300)
采用阴道免疫法与常规免疫法进行免疫效果对比试验,结果显示,新型免疫法免疫效果明显高于常规免疫法,且无不良反应,通过区域性推广,产生很好的保护率,值得进一步推广应用。
羊布氏杆菌;阴道免疫法;试验;推广
布氏杆菌病是人畜共患病,近年来发病率较高,疫苗免疫是控制该病的重要途径,但由于常规免疫途径存在免疫效果不确实等问题,特需探讨一种操作简便对人畜安全,免疫效果确实的免疫方法。2014年开始,笔者带领技术团队通过技术创新,研究出了安全高效的免疫方法--阴道免疫法,并用两年时间推广到全市,快速控制了羊群布氏杆菌病的传播,取得很好的效果。
1 项目设计理念
传统免疫法主要是口服和注射法,布氏杆菌病在羊体内主要侵害生殖系统,在生殖道容易定植,因此,尝试阴道免疫法对母羊进行免疫,并与其他常规免疫法作对照,评价免疫效果和安全性。
2 试验方法
选择未做过布病免疫的羊群,要求试验羊健康,饲养环境一致。首先对所有羊采血编号,用平板凝集试验检测布病血凝试验均为阴性者方可作为试验羊。将羊群分成A、B两群,每群均有不同产期的孕羊,A群为常规剂量免疫群、B群为高剂量免疫群,将每群各分5组,分别采用公羊颈部肌肉注射法、母羊口腔喷注法、阴道喷注法、全群拌料法、全群饮水免疫法。A群各组采用的剂量是常规量。B组采用的剂量是A组的倍量。抓羊时尽量采用挡板围靠法,动作要轻,防止机械性流产。免疫后正常饲喂,注意观察,有过敏者立即注射肾上腺素,有流产迹象时注射黄体酮。免疫后7d和14d、 21d、 60d、 90d、 180d进行采血,做平板凝集试验,评价体液免疫效果。
3 所用材料
3.1 布氏杆菌活疫苗(S2株)
中牧实业股份有限公司兰州生物药厂生产,生产批号:1401003;有效期:2015.1;以羊口服剂量规格80头份/瓶,每瓶含活菌不少于80×100cfu。
3.2 消毒药
百盛30,北京中农奥美生物制药有限公司生产。
3.3 阴道免疫专用喷注器
自行研制。
3.4 平板凝集试验诊断液
虎红平板凝集试验抗原,检测方法按照GB/T18646-2002进行。
3.5 基础设备
防护服、手套、口罩、鞋套
4 筛选试验羊
选定养羊户10户,存栏羊569只,全部采血做平板凝集试验,全阴性户作为免疫试验。
5 试验结果
5.1 对比试验
结果见附表。
5.2 结果显示
免疫后7d,注射法和阴道喷注法阳转率分别为90%和80%,倍量注射法的比例更高达95.8%,但注苗后的反应较大,口腔喷注、饮水、拌料法都没有产生抗体。21d后注射法和阴道喷注法阳转率达到近90%,口腔喷注和拌料法达到60%,倍量口腔喷注法和饮水法达到50%,说明注射法和阴道喷注法产生抗体快,阳转率高,抗体水平高,倍量注射法虽然阳转率高达100%,但是疫苗反应较重,没有推广意义,口服法不论哪个途径阳转率出现的较晚,抗体水平低,3周后达到50~60%,各种口服方法基本上相近。
5.3 小尾寒羊试验
疫苗说明书上说明注射法不能应用于小尾寒羊,但没有理由说明为什么不能,笔者特意选择一批小尾寒羊,公羊8只采用1/2量注射法,母羊213只采用1/2量阴道喷注法,做苗后无任何异常反应,未出现流产现象。21d后采血做抗体检测,公羊阳转率100%,母羊阳转率80%。
5.4 孕羊注射法安全性试验
推广过程中部分防疫员应用注射法给妊娠中后期母羊注射,导致流产率100%。
5.5 抗体滴度试验
通过省动物疫病预防控制中心配合继续做试管凝集试验和环境散菌检测试验,试验结果表明,阴道免疫法的抗体水平比口服法明显高。
6 结果分析与讨论
6.1 试验结论
试验结果说明,母羊自然感染条件下,对阴道黏膜更敏感,而且疫苗免疫最佳途径就是接近自然感染的途径,因此,对孕羊最佳的免疫途径是阴道喷注法。公羊和空怀母羊或小羊可以采取注射法。效果确实无不良反应。饮水法和拌料法都能产生一定的抗体,但阳转率不高,且公羊明显高于母羊,说明抢料和水要多些,有剂量不均的因素。口腔喷注法剂量虽准但阳转率不高,说明疫苗菌株进入消化道后受消化道溶菌酶或胃酸等屏障的杀灭较多,产生抗体变少,免疫效果不理想,阴道喷注法和口腔喷注法操作方法和速度近似,几秒内就能完成操作,方便高效,建议普遍采纳母羊阴道喷注法。
附表 不同免疫法免疫效果对比试验结果(单位:只、%)
6.2 小尾寒羊和其他羊免疫无差异
小尾寒羊应用公羊注射,母羊阴道免疫法效果显著,无不良反应,不要受疫苗说明书限制。
6.3 阴道免疫法需按专用器具和规程方可靠
阴道免疫法应用我们开发的专用免疫器具(已获专利)和特有的操作规程方可安全有效。
参与试验人员:郑文金、林怀明、盛晓辉、张国成、罗洪明、韩维群、马成立、安丽华。
于广秋(1963-),男,汉族,大学本科,高级兽医师,主要从事动物疫病防制工作。