胶体金免疫层析法与试管凝集试验检测布鲁氏菌的比较

郝晴晴 霍翠梅 商爱国 （山东省济宁市动物疫病预防与控制中心 272100）

胡莉萍* （山东省动物疫病预防与控制中心 山东 济南）

朱瑞良* （山东农业大学动物科技学院 山东 泰安）

胶体金免疫层析法与试管凝集试验检测布鲁氏菌的比较

郝晴晴 霍翠梅 商爱国 （山东省济宁市动物疫病预防与控制中心 272100）

胡莉萍*（山东省动物疫病预防与控制中心 山东 济南）

朱瑞良*（山东农业大学动物科技学院 山东 泰安）

采集济宁市某县300个羊血清，选用2个厂家生产的布鲁氏菌胶体金快速检测试剂卡和试管凝集试验分别对采集的羊血清进行检测。比较2种布鲁氏菌胶体金快速检测试剂卡与试管凝集试验检测布鲁氏菌的阳性率，对检测效果进行比较。结果表明，这2个胶体金快速检测试剂卡检测的阳性率与试管凝集试验检测的阳性率有所差异，因此，在选用市场上现有的布鲁氏菌胶体金快速检测试剂卡时，应该与国标试管凝集试验比较确定。

胶体金免疫层析法 试管凝集试验 布鲁氏菌

布鲁氏菌病(简称布病)，是由布鲁氏菌属细菌引起的人畜共患的变态反应性传染病。牛、羊、猪等家畜最易感，对人有高度感染性和致病性。布病的危害非常严重，可导致多种动物、尤其是牛羊猪发病，怀孕家畜流产、死胎，公畜睾丸炎；人感染之后也可以流产、发热、出汗、浑身无力、全身疼痛等，给畜牧养殖业造成重大经济损失，给人类健康带来威胁，影响社会安定。布病的确切诊断是控制布病的前提条件，目前检测方法多种多样，新的方法不断出现，究竟哪种方法更加可靠，本试验比较了胶体金快速检测卡与国标试管凝集试验方法诊断布鲁氏菌病的效果，为生产推广应用奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 血清样本 来自济宁市某县6个规模化羊场，各场随机采集50只羊血清(母羊30只、公羊20只)共采集300份羊血清，4°C保存被检。

1.1.2 主要试剂及设备 两个公司(A、B公司)生产的羊布鲁氏菌抗体快速检测试纸卡、布鲁氏菌平板凝集抗原、0.5%石炭酸生理盐、移液器、试管、吸管。

1.2 检测方法

将300只被检羊血清分别作成1:25、1:50稀释，分别进行如下方法检测：

1.2.1 试纸卡法 分别取1:50稀释的300只被检羊血清50微升，分别加入A、B公司生产的羊布鲁氏菌抗体快速检测试纸卡加样孔，室温下放置5-10min判断结果。判断标准：根据A、B公司羊布鲁氏菌抗体快速检测试纸卡使用说明，在出现C线结果的前提条件下，出现T线判为阳性；不出现T线判为阴性。

1.2.2 试管凝集试验 分别取1:25、1:50稀释的300只被检羊血清，根据国标GB/T 18646-2002动物布鲁氏菌病诊断技术进行。判断标准：1:50稀释羊血清，出现“++”以上凝集现象时，受检血清判定为阳性，否则判为阴性。

2 结果

2.1 试纸卡检测 A、B两个公司生产的羊布鲁氏菌抗体快速检测试纸卡检测结果图(见附图)。

附图 羊布鲁氏菌抗体快速检测试纸卡检测结果图

2.2 试纸卡和试管凝集试验 采用A、B两个公司生产的羊布鲁氏菌抗体快速检测试纸卡和国标试管凝集试验对6个规模化羊场的300份羊血清检测结果见附表。

附表 300份羊血清布鲁氏菌抗体检测结果 (%)

3 讨论与小结

（1）对300份羊血清布鲁氏菌抗体检测，采用A、B两个公司生产的羊布鲁氏菌抗体快速检测试纸卡的阳性率分别为8.7%和10.0%，而采用试管凝集法检测的阳性率为7.7%，并且所有试管凝集法检测的阳性血清，采用A、B两个公司快速检测试纸卡均为阳性，A、B两个公司检测阳性率高出试管凝集法分别为1.0%和2.3%，A方法检测的结果与试管凝集更接近，可能是试纸卡敏感性增强的原因，也可能存在少数的假阳性，有待于进一步确定。（2）从试验过程看，试纸卡法用时较短，操作简单。而试管凝集方法过程相对复杂，对试验用品和器材有一定要求，且用时相对较长。但在布病监测时建议还是先采用试管凝集方法为好。（3）胶体金免疫层析法与试管凝集试验均存在一定的局限性，一般情况下应该先选用虎红平板凝集试验进行粗筛，然后，采用敏感度和特异性相对好一些的的诊断方法予以确定。胶体金免疫层析法虽然在方法上更简便，但是各个厂家生产的质量不一样，导致检测结果存在一定程度上的差异，建议在兽医一线工作上要对此甄别。

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S852.61+4

A

1007-1733(2017)09-0003-02

2017–05–11）

十三五国家重点研发计划(2016YFD0500905)、 山东省农业重大应用创新项目、山东省重点研发计划项目(2016GGH3115)和山东省现代农业产业技术体系羊产业创新团队项目(SDAIT-10-06)。

*通讯作者