新疆假龙胆的化学成分研究与含量测定△

邹德志，杨丹，王建华，韩华锐，白小荣，张春红，李旻辉，5*

(1.包头医学院，内蒙古 包头 014060；2.内蒙古自治区特色药用植物培育与保护工程技术研究中心，内蒙古 包头 014060；3.内蒙古自治区特色道地药材资源保护与利用重点实验室，内蒙古 包头 014060；4.内蒙古医科大学药学院，内蒙古 呼和浩特 010110；5.内蒙古自治区中医药研究所，内蒙古 呼和浩特 010020)

·基础研究·

新疆假龙胆的化学成分研究与含量测定△

邹德志1，2，3，杨丹1，王建华4，韩华锐1，2，3，白小荣1，2，3，张春红，李旻辉1，2，3，5*

(1.包头医学院，内蒙古 包头 014060；2.内蒙古自治区特色药用植物培育与保护工程技术研究中心，内蒙古 包头 014060；3.内蒙古自治区特色道地药材资源保护与利用重点实验室，内蒙古 包头 014060；4.内蒙古医科大学药学院，内蒙古 呼和浩特 010110；5.内蒙古自治区中医药研究所，内蒙古 呼和浩特 010020)

目的：对新疆假龙胆全草进行化学成分初步研究，并对分离得到酮类化类物进行定量分析。方法：采用75%乙醇回流法对新疆假龙胆全草进行提取，粗提物经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次梯度萃取制备不同极性部分，将石油醚部分和乙酸乙酯部分浸膏分别用硅胶柱层析和葡聚糖凝胶LH-20柱层析分离纯化，所得单体化合物经EI-MS、1H-NMR、13C-NMR等光谱法进行结构鉴定；建立高效液相测定方法测定新疆假龙胆中3个酮类化合物的含量。结果：从新疆假龙胆中分离得到6个化合物，分别为1，8-二羟基-3，5-二甲氧基酮(1)、1-羟基-3，5，8-三甲氧基酮(2)、1-羟基-3，5-二甲氧基酮(3)、木犀草素(4)、胡萝卜素(5)和β-谷甾醇(6)；含量测定方法学结果表明1，8-二羟基-3，5-二甲氧基酮、1-羟基-3，5，8-三甲氧基酮和1-羟基-3，5-二甲氧基酮3个酮化合物分离度较好，分别在35.7～713.4、32～1280、34.3～686 ng时与峰面积呈良好的线性关系，精密度试验RSD分别为 0.31%、0.27%、0.25%，稳定性实验的RSD分别为 1.05%、1.33%、1.58%，重复性实验的RSD分别为 2.48%、0.82%、2.63%，加样回收率分别为 103.1%(RSD=1.25%)、100.02%(RSD=0.93%)，95.10%(RSD=2.62%)；1，8-二羟基-3，5-二甲氧基酮等3个化合物的含量范围分别为 0.21%～0.28%、0.65%～0.77%、0.19%～0.15%。结论：新疆假龙胆含有黄酮类、酮类和甾醇类化合物；经方法学考察，本研究建立的高效液相测定方法适合新疆假龙胆中1，8-二羟基-3，5-二甲氧基酮等3个化合物的测定；新疆假龙胆中1，8-二羟基-3，5-二甲氧基酮等3个化合物的含量较高。

新疆假龙胆；化学成分；黄酮；酮；含量测定

新疆假龙胆，又称新疆阿帕斯，为龙胆科假龙胆属植物新疆假龙胆GentianellaTurkestanorum(Gand.) Holub一年或两年生草本植物，全草入药，主要分布于新疆、内蒙古等地，前苏联、蒙古等地也有分布[1]。新疆假龙胆是维医常用药材，具有清热解毒、利湿消肿等功效，常用于关节炎的治疗，民间用其全草泡茶治疗感冒、发热等症。据文献报道和走访调查，假龙胆属植物全世界约有125种，我国有9种，主要分布于东北、西北、及西南部地区，其中有5种作为药用，除了新疆假龙胆另外4种分别为：尖叶假龙胆，全草入蒙药，味苦、性凉，具有清热、利湿的功效；黑边假龙胆，全草入藏药，具有清热解毒、去除肝胆之火的功效；紫红假龙胆，全草入药，味苦性寒，具有清热利湿、解毒消肿等功效；矮假龙胆，全草入藏药，具有清热解毒、舒肝利胆的功效[2-4]。

目前对新疆假龙胆的研究较少，仅有对新疆假龙胆中龙胆苦苷、芒果苷、獐牙菜苦苷等环烯醚萜类化合物进行了含量测定[5-7]，本文采用现代科学的提取、分离纯化、鉴定及含量测定手段对新疆假龙胆干燥全草进行了化学成分的初步研究，为阐明新疆假龙胆的化学组成，合理利用资源提供科学依据。

1 材料与仪器

1.1 仪器

UltiMate 3000 高效液相色谱仪(Thermo Fisher Scientific)；TSQ Quantum液质联用色谱仪(Thermo Fisher)；Labofuge 400R 离心机(Thermo Fisher Scientific)；冷冻干燥机(北京博医康实验仪器有限公司)；MSA224S-100-DU电子精密天平(德国赛多利斯)；KQ 300V超声波清洗机(上海绿宇精密仪器)；RE-2000E旋转蒸发仪(上海亚荣公司)；电热恒温水浴锅(北京市电热恒温水浴锅)；SHZ-D(III)循环水真空泵(天津华鑫仪器厂)；HC.TP11B5 架盘药物天平(量程 0～500 g，北京市宣武区天平厂)；BSZ-100馏分收集器(上海沪西仪器有限公司)。

1.2 材料

药材：新疆假龙胆药材于2013年购自新疆药材公司，经包头医学院李旻辉教授鉴定为新疆假龙胆干燥全草。

试剂：石油醚、乙酸乙酯、氯仿、正丁醇、无水乙醇及甲醇 (分析纯，天津市福晨化学试剂厂)；甲醇(色谱纯，天津市风船化学试剂三厂)；纯净水(娃哈哈纯净水)；薄层层析硅胶板(GF254，青岛海洋化工厂)；柱层析硅胶(100-200、200-300目，青岛海洋化工厂理化分厂)；葡聚糖凝胶(SephadexTMLH-20，GE Healthcare)，碘(分析纯，成都麦卡希化工有限公司)。

2 方法

2.1 提取、分离纯化与结构鉴定

2.1.1 提取、分离纯化 称取新疆假龙胆药材粗粉2.0 kg，加70%乙醇12 L，热回流提取2 h，过滤，残渣重复提取4次(每次加70%乙醇12 L，提取2 h)，合并滤液，减压浓缩近干，即为70%乙醇提取浸膏。将浸膏用3倍体积水40 ℃超声溶解后，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行梯度萃取，将各萃取液及剩余水层浓缩并冷冻干燥，分别得到石油醚部分浸膏(35 g)、乙酸乙酯部分浸膏(53 g)、正丁醇部分浸膏(82 g)和水部分浸膏(185 g)。

称取硅胶(200～300 目，300 g)干法装柱，将石油醚部分浸膏(30 g)溶于少量甲醇，加入硅胶(100～200目，30 g)搅拌并挥去溶剂，上样，以流动相石油醚-乙酸乙酯(15∶1～3∶1)为洗脱剂梯度洗脱，洗脱液用自动部分收集器分段收集(每管15 mL)，并用薄层层析法点板跟踪(薄层板：GF254；展开剂：石油醚-乙酸乙酯=7∶1；显色：碘显色)，将得到的组分A(20～70管合并浓缩)按上述方法重复进行柱层析分离纯化，合并20～45瓶和56～77瓶，浓缩，得到化合物1(黄色针晶，51 mg)和化合物2(黄色粉末，44 mg)。

称取硅胶(200～300目，210 g)干法装柱，取乙酸乙酯部分(25 g)溶于少量甲醇中，加入硅胶(100～200目，30 g)拌样，挥去甲醇后上样，以石油醚-乙酸乙酯(5∶1～1∶3)为洗脱剂进行梯度洗脱，洗脱液用自动部分收集器分段收集(每管15 mL)，并用薄层层析法点板跟踪(薄层板：GF254；展开剂：石油醚-乙酸乙酯=7∶1；显色：碘显色)，分别合并10～84、115～178管，得到组分B和C。将组分B上葡聚糖凝胶LH-20柱(取100 g，湿法装柱)，用80%甲醇洗脱，按硅胶柱层析方法收集洗脱液，并用薄层层析法点板跟踪(薄层板：GF 254；展开剂：石油醚-乙酸乙酯=3∶1；显色：碘显色)，合并并减压浓缩11～33和75～94管，得到化合物3(淡黄色结晶，35 mg)和化合物4(白色粉末，15 mg)；将组分C按上述硅胶柱层析法上样，合并35～87管，经葡聚糖凝胶柱洗脱纯化，其中3～26管减压浓缩得到化合物5(白色粉末，8 mg)，31～54管合并得到化合物6(灰白色的粉末，10 mg)。

2.1.2 新疆假龙胆化合物结构鉴定 化合物1：黄色针状结晶 mp 186～187 ℃(丙酮)。IR (KBr) υmax：3200～2800、1670、1640、1608、1582、1490 cm-1。EI-MSm/z：288[M]+。1H-NMR (400 MHz，CDCl3) δ：11.98 (1H，s，C1-OH)，11.39 (1H，s，C8-OH)，7.24 (1H，d，J=8.5Hz，C6-H)，6.72 (1H，d，J=8.5 Hz，C7-H)，6.55 (1H，d，J=2.10 Hz，C4-H)，6.36 (1H，d，J=2.1 Hz，C2-H)，3.96 (3H，s，OCH3)，3.90 (3H，s，OCH3)。13C-NMR (100 MHz，DMSO-d6) δ：162.9 (C-1)，97.3 (C-2)，167.5 (C-3)，93.1 (C-4)，139.9 (C-5)，120.4 (C-6)，109.3 (C-7)，154.3 (C-8)，184.6 (C-9)，157.9 (C-4a)，145.5 (C-4b)，108.2 (C-8a)，102.8 (C-8b)，57.4 (C3-OCH3)，56.2 (C7-OCH3)。数据经鉴定与1，8-二羟基-3，5-二甲氧基酮数据基本符合[8]，故鉴定为1，8-二羟基-3，5-二甲氧基酮。

化合物2：mp 206～207 ℃(MeOH)。IR (KBr) υmax：3100～2600、1660、1610、1576、1485 cm-1。EI-MSm/z：302[M]+。1H-NMR (400 MHz，CDCl3) δ：13.9 (1H，s，C1-OH)，7.17 (1H，d，J=9.00 Hz，C6-H)，6.70 (1H，d，J=9.00 Hz，C7-H)，6.49 (1H，d，J= 2.40 Hz，C4-H)，6.32 (1H，d，J=2.40 Hz，C2-H)，3.98 (3H，s，C8-OCH3)，3.97 (3H，s，C3-OCH3)，3.87 (3H，s，C5-OCH3)。13C-NMR (100 MHz，CDCl3) δ：163.6 (C-1)，97.6(C-2)，166.5 (C-3)，92.3 (C-4)，142.1 (C-5)，116.9 (C-6)，104.5 (C-7)，156.9 (C-8)，181.5 (C-9)，153.7 (C-4a)，147.6 (C-4b)，111.9 (C-8a)，104.4 (C-8b)，57.0 (C8-OCH3)，56.5 (C7-OCH3)，55.9 (C3-OCH3)。数据与1-羟基-3，5，8-三甲氧基酮数据基本一致[8]，鉴定为1-羟基-3，5，8-三甲氧基酮。

化合物3：黄色针状结晶，EI-MSm/z：272.25[M]+。1H-NMR (400 MHz，CDCl3)：12.83 (1H，s，1-OH)，7.82 (1H，dd，J=8.0，1.5 Hz，H-8)，7.31 (1H，t，J=8.0 Hz，H-7)，7.24 (1H，dd，J=8.0，1.5 Hz，H-6)，6.56 (1H，d，J=2.2 Hz，H-4)，6.37 (1H，d，J=2.2 Hz，H-2)，4.04 (3H，s，OCH3)，3.90 (3H，s，OCH3)；13C-NMR (100 MHz，CDCl3)：180.8 (C=0)，166.7 (C-3)，163.3 (C-l)，157.6 (C-4a)，148.3(C-5)，146.3 (C-4b)，123.6 (C-7)，121.5 (C-8a)，116.7 (C-8)，115.6 (C-6)，103.9 (C-4b)，97.5 (C-2)，92.8 (C-4)。数据与1-羟基-3，5-二甲氧基酮数据基本一致[9]，故鉴定为1-羟基-3，5-二甲氧基酮。

化合物4：白色粉末，mp 328～330 ℃(乙醇)。EI-MSm/z：286[M]+。1H-NMR (400 MHz，DMSO-d6) δ：12.98 (1H，s，C5-OH)，10.79 (1H，s，C7-OH)，9.88 (1H，s，C3′-OH)，9.38 (1H，s，C4′-OH)，7.43 (1H，dd，J= 8.2，2.2 Hz，C6′-H)，7.41 (1H，d，J= 2.22 Hz，C2′-H)，6.92 (1H，d，J=8.16 Hz，C5′-H)，6.67 (1H，s，C8-H)，6.46 (1H，d，J=2.01 Hz，C3-H)，6.20 (1H，d，J=2.01 Hz，C6-H).13C-NMR (100 MHz，DMSO-d6)δ：164.3 (C-2)，103.3 (C-3)，181.8 (C-4)，157.6 (C-5)，99.2 (C-6)，164.4 (C-7)，94.2 (C-8)，161.6 (C-9)，104.0 (C-10)，119.4 (C-1′)，113.5 (C-2′)，150.0 (C-3′)，146.1 (C-4′)，116.4 (C-5′)，121.6 (C-6′)。数据与木犀草素基本数据一致[8]，故化合物4鉴定为木犀草素。

化合物5：无色颗粒状结晶，mp 300～302 ℃。该化合物硫酸-乙醇显色显紫红色，长时间放置变成灰绿色，Liebermann-Burchard反应阳性，Molish反应阳性，推测该化合物为甾体苷类化合物。EI-MSm/z：576[M]+。1H-NMR (400 MHz，CDCl3) δ：5.33 (1H，H-6)，4.42 (1H，t，H-3)，4.22 (1H，d，H-1′)；13C-NMR (100 MHz，CDCl3) δ：38.8 (C-1)，29.7 (C-2)，77.2 (C-3)，40.6 (C-4)，140.9 (C-5)，121.7 (C-6)，33.8 (C-7)，31.9 (C-8)，50.1 (C-9)，25.9 (C-10)，21.1 (C-11)，28.3 (C-12)，42.3 (C-13)，56.7 (C-14)，24.3 (C-15)，42.3 (C-16)，55.9 (C-17)，12.1(C-18)，19.6 (C-19)，36.7 (C-20)，19.4 (C-21)，36.0 (C-22)，37.3 (C-23)，45.6 (C-24)，29.2 (C-25)，19.1 (C-26)，20.2 (C-27)，23.1 (C-28)，12.3 (C-29)，101.3 (C-1′)，73.9 (C-2′)，77.4 (C-3′)，70.6 (C-4′)，77.3 (C-5′)，61.6 (C-6′)。数据与胡萝卜苷数据对照基本一致[10]，故确定化合物5为胡萝卜苷。

化合物6：白色针状结晶，mp 119～121 ℃。10% 硫酸乙醇溶液显色呈紫红色斑点。EI-MSm/z：414 (M+)。1H-NMR (400 MHz，DMSO-d6) δ：5.32 (1H，6-H)，4.42 (1H，t，3-H)，4.21 (1H，d，1′-H)；13C-NMR (100 MHz，DMSO-d6) δ：38.3 (C-1)，29.3 (C-2)，76.8 (C-3)，40.3 (C-4)，140.4 (C-5)，121.2 (C-6)，33.3 (C-7)，31.4 (C-8)，49.6 (C-9)，25.5 (C-10)，20.6 (C-11)，27.8 (C-12)，41.8 (C-13)，56.2 (C-14)，23.9 (C-15)，41.7 (C-16)，55.4 (C-17)，11.7 (C-18)，19.1 (C-19)，36.4 (C-20)，19.0 (C-21)，35.4 (C-22)，36.8 (C-23)，45.1 (C-24)，28.8 (C-25)，18.9 (C-26)，19.7 (C-27)，22.6 (C-28)，11.8 (C-29)，102.5 (C-1′)，73.4 (C-2′)，76.9 (C-3′)，70.0 (C-4′)，76.7 (C-5′)，61.0 (C-6′)。数据与β-谷甾醇数据基本一致[11]，故鉴定为β-谷甾醇。

2.2.1 色谱条件 色谱柱：Agilent Eclipse XDB-C8(4.6 mm×150 mm，5 μm)柱；流动相：甲醇-0.05%磷酸水 (65∶35)；流速：1.0 mL· min-1；检测波长：254 nm；柱温：室温。理论板数不低于3000。

分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5 μL，注入液相色谱仪，按以上色谱条件进行测定，记录色谱图。从图1、图2可以看出，1，8-二羟基-3，5-二甲氧基酮等3个酮化合物的分离度较好。

注：1.1，8-二羟基-3，5-二甲氧基酮;2.1-羟基-3，5，8-三甲氧基酮;3.1-羟基-3，5-二甲氧基酮。图1 对照品的液相色谱图

注：1.1，8-二羟基-3，5-二甲氧基酮;2.1-羟基-3，5，8-三甲氧基酮;3.1-羟基-3，5-二甲氧基酮。图2 供试品的液相色谱图

2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取1，8-二羟基-3，5-二甲氧基酮1.07 mg、1-羟基-3，5，8-三甲氧基酮0.96 mg和1-羟基-3，5-二甲氧基酮1.03 mg标准品置于10 mL容量瓶中，用甲醇溶解定容，配制成浓度分别为0.107、0.096、0.103 mg·mL-1，并等体积混合对照品溶液。

2.2.3 供试品溶液的制备 精密称取新疆假龙胆0.1 g(粉碎，过80目筛)，放入具塞试管中，精密加入甲醇10 mL，精密称定，浸渍过夜，超声45 min(功率为260 W，频率为40 KHz)，放冷，取出补重，微孔滤膜滤过(0.45 μm)，取续滤液作为供试品溶液。

2.2.4 线性关系考察 取2.2.2 项下制备的1，8-二羟基-3，5-二甲氧基酮、1-羟基-3，5，8-三甲氧基酮和1-羟基-3，5-二甲氧基酮混合对照品溶液1、2、5、10、20 μL，按2.2.1 项下色谱条件进样，测定色谱峰面积，以进样质量为横坐标(X)，峰面积为纵坐标(Y)，进行线性回归，得回归方程：1，8-二羟基-3，5-二甲氧基酮为Y=48 303X-0.043(r=0.999 7)，1-羟基-3，5，8-三甲氧基酮为Y=68 848X-0.09(r=0.999 7)，1-羟基-3，5-二甲氧基酮为Y=63 397X-0.069(r=0.999 8)。结果表明：1，8-二羟基-3，5-二甲氧基酮的进样量在35.7～713.4 ng；1-羟基-3，5，8-三甲氧基酮进样量在32～1280 ng；1-羟基-3，5-二甲氧基酮进样量在34.3～6860 ng时线性关系良好。

2.2.5 精密度试验 精密吸取2.2.3 项下供试品溶液20 μL，按2.2.1 项下色谱条件连续进样6次，测得1，8-二羟基-3，5-二甲氧基酮、1-羟基-3，5，8-三甲氧基酮和1-羟基-3，5-二甲氧基酮峰面积的RSD(n=6)分别为0.31%、0.27%、0.25%。表明该方法精密度良好。

2.2.6 稳定性试验 取同一供试品溶液10 μL，按2.2.1 项下色谱条件下，分别于0、2、4、8、12、24 h进样，测得1，8-二羟基-3，5-二甲氧基酮、1-羟基-3，5，8-三甲氧基酮、1-羟基-3，5-二甲氧基酮的RSD分别为1.05%、1.33%、1.58%，表明供试液中3种成分在24 h内稳定性良好。

2.2.7 重复性试验 取同一批样品6份，精密称定，按2.2.3 项下方法制备供试品溶液，进样10 μL，测得1，8-二羟基-3，5-二甲氧基酮、1-羟基-3，5，8-三甲氧基酮和1-羟基-3，5-二甲氧基酮峰面积的RSD(n=6)分别为2.48%、0.82%、2.63%。结果表明该方法重复性较好。

2.2.8 加样回收率 精密称取已知含量的假龙胆样品粉末6份，精密称定，分别精密加入混合对照品溶液各2 mL，按2.2.3 项下的方法制备供试品溶液，进样10 μL 测定，计算回收率，结果1，8-二羟基-3，5-二甲氧基酮、1-羟基-3，5，8-三甲氧基酮和1-羟基-3，5-二甲氧基酮的平均回收率(n=6)分别为103.10%、100.02%、95.10%，RSD 分别为1.25%、0.93%、2.62%，表明该方法准确度良好。具体数据见表1～3。

2.2.9 样品测定 取5批样品粉末，精密称定，按2.2.3项下方法制备供试品溶液，按2.2.1 项下述色谱条件进样10 μL，用外标法计算1，8-二羟基-3，5-二甲氧基酮、1-羟基-3，5，8-三甲氧基酮和1-羟基-3，5-二甲氧基酮的含量，结果见表4。

表1 1，8-二羟基-3，5-二甲氧基酮加样回收率实验结果

表2 1-羟基-3，5，8-三甲氧基酮加样回收率实验结果

表2 1-羟基-3，5，8-三甲氧基酮加样回收率实验结果

样品样品含量/mg加入对照品量/mg实测总量/mg回收率(%)平均回收率(%)RSD1007048006912013954999110002093%2007153006912013957984430070060069120139891010340070060069120139731007950070270069120139611003260070830069120139689961

表3 1-羟基-3，5-二甲氧基酮加样回收率实验结果

表3 1-羟基-3，5-二甲氧基酮加样回收率实验结果

样品样品含量/mg加入对照品量/mg实测总量/mg回收率(%)平均回收率(%)RSD100114300117700222692019510262%200116000117700230897543001137001177002282972840011370011770022729643500114001177002261952460011490011770022339209

表4 新疆假龙胆中3种酮类成分含量 %

3 讨论

本文将新疆假龙胆醇提物用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇进行梯度萃取，得到石油醚部分、乙酸乙酯部分、正丁醇部分和水部分，但本文只对其中的石油醚和乙酸乙酯极性部分进行了分离纯化，在接下来的实验中我们将利用现代先进的分离纯化及鉴定手段对正丁醇部分和水部分进行系统研究，全面阐明新疆假龙胆的化学组成，为进一步探索新疆假龙胆中药效学物质基础研究提供化学材料，这对于开发新疆假龙胆药用植物资源具有重要意义。

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StudyonChemicalCompositionandXanthonesContentDeterminationofGentianellaturkestanorum(Gand.)Holub

ZOUDezhi1,2,3，YANGDan1，WANGJianhua4，HANHuarui1，2,3，BAIXiaorong1,2,3，ZHANGChunhong1,2,3*，LIMinhui1,2,3,5*

(1.BaotouMedicalCollege，InnerMongolia，Baotou014060，China; 2.InnerMongoliaResearchCenterofCharacteristicMedicinalPlantsCultivationandProtectionEngineeringTechnology，Baotou014060，China; 3.InnerMongoliaKeyLaboratoryofCharactersticGeoherbsResourcesProtectionandUtilization，Baotou014060，China; 4.SchoolofPharmacy，InnerMongoliaMedicalUniversity，Hohhot010110，China; 5.InnerMongoliaInstituteofTraditionalChineseMedicine，Hohhot010020，China)

Objective：To preliminarily study on the chemical constituents ofGentianellaturkestanorum(Gand.) Holub and analyze the content of xanthones by HPLC for quantitative analysis.Methods：The herbal material ofG.turkestanorumwas reflux-extracted by 75% ethanol，the crude extracts were fractionated with petroleum ether，ethyl acetate，andn-BuOH，respectively.The petroleum ethert and ethyl acetate part were extracted by silica gel column chromatography and Sephadex LH-20 column chromatography gradually to obtain the purified compounds，which were identified by spectral data EI-MS，1H-NMR and13C-NMR.An HPLC method for the content determination of Xanthones compounds1-3was established.Results：Six compounds were isolated and identified fromG.turkestanorum.，respectively，swerchirin (1)，1-hydroxy-3，5，8-trimethoxyxanthone (2)，1-hydroxy-3，5- demethoxyxanthone (3)，luteolin (4)，daucosterol (5) andβ- sitosterol (6).The results showed that the conditions of the experiment exhibited better performance of separation for compounds1-3.Compounds1-3formed a good linear relationship at 35.7～713.4，32～1280，34.3～686 ng，respectively.Precision RSD were 0.31%，0.27%，0.25% and the stability experiments of RSD were 1.05%，1.33%，1.58%，respectively.Repeated experiments RSD were 2.48%，0.82% and 2.63%.Meanwhile，the recovery rat were 103.1%(RSD=1.25%)，100.02%(RSD=0.93%)，95.10%(RSD=2.62%)，respectively.The content of compounds1-3were 0.21%～0.28%，0.65%～0.77%，0.19%～0.15%，respectively.Conclusion：The chemical compositions ofG.Turkestanorumwere mainly flavonoids，xanthones and sterols.The established HPLC method is suitable for the determination of compounds1-3isolated fromG.turkestanorum.Moreover，the contents of compounds1-3were shown in the higher level.

Gentianellaturkestanorum；chemical composition；flavonoids；xanthones；determination

“十二五”国家科技支撑计划项目(2012BAI28B02)；国家自然基金项目(81060372)；内蒙古自治区科技计划项目(蒙药资源保护与开发利用科研创新平台)

] 张春红，教授，研究方向：中蒙药活性成分分析，E-mail：zchlhh@126.com；李旻辉，教授，研究方向：蒙药资源保护与利用，E-mail：li_minhui@aliyun.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2017.6.005

2016-01-05)

*[