依地酸二钠钙联合水溶性维生素对职业性铅中毒患者血清T淋巴细胞及氧化应激的影响

张 力, 张恒东

(江苏省疾病预防控制中心职业病防治所, 江苏 南京, 210000)

依地酸二钠钙联合水溶性维生素对职业性铅中毒患者血清T淋巴细胞及氧化应激的影响

张 力, 张恒东

(江苏省疾病预防控制中心职业病防治所, 江苏 南京, 210000)

目的 探讨依地酸二钠钙联合水溶性维生素对职业性铅中毒患者血清T淋巴细胞及氧化应激的影响。方法 选取职业性铅中毒患者140例，随机分为对照组70例，予以水溶性维生素治疗，研究组70例在对照组基础上予以依地酸二钠钙联合治疗。比较2组T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+活性; 比较2组超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平、尿铅、血铅浓度; 比较2组临床疗效及不良反应。结果 对照组治疗有效率75.61 %, 显著低于研究组的92.86 %(P<0.05); 与对照组比较，研究组患者CD4+活性较低, CD8+活性较高, CD4+/CD8+较低，SOD、MDA水平较高，尿铅浓度、血铅浓度较低，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 依地酸二钠钙联合水溶性维生素能有效改善职业性铅中毒患者血清T淋巴细胞及氧化应激，降低尿铅浓度、血铅浓度。

依地酸二钠钙; 水溶性维生素; 职业性铅中毒; 血清T淋巴细胞; 氧化应激

职业性铅中毒是指铅及其化合物的蒸汽、烟和粉尘以呼吸道侵入人体造成机体损伤的一种疾病[1]。临床上将职业性铅中毒分为急性职业性铅中毒和慢性职业性铅中毒，大多数发病患者均为慢性职业性铅中毒[2]。水溶性维生素是能在水中溶解的一组维生素，主要包括维生素B1、维生素B2和维生素C等[3-4]。依地酸二钠钙临床上主要用于治疗铅中毒，能与多种二价、三价金属螯合形成稳定的金属络合物，经肾脏随尿排出[5]。本研究探讨依地酸二钠钙联合水溶性维生素对职业性铅中毒患者血清T淋巴细胞及氧化应激的影响，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年4月—2016年8月本院治疗的职业性铅中毒患者140例，经本院伦理委员会审核通过，患者或家属签订知情同意书，积极配合此次研究。按随机数字表法分为2组。对照组70例，男37例，女33例，年龄23～53岁，平均(35.46±5.05)岁，工龄1～9年，平均工龄(4.65±0.65)年。研究组70例，男34例，女36例，年龄25～54岁，平均年龄(36.47±5.14)岁，工龄1～10年，平均工龄(4.71±0.66)年。2组一般资料比较无显著差异(P>0.05)。诊断标准参照GBZ37-2002《职业性慢性铅中毒诊断标准》[6]中职业性铅中毒的诊断标准，尿铅≥0.58 μmol/L或血铅≥2.9 μmol/L, 患者出现食欲减退、腹胀、腹部隐痛、便秘，伴有或不伴有全身症状，出现头昏、乏力、失眠、多梦、健忘等症状，患者伴或不伴有四肢远端手套样、袜套样痛触觉、感觉障碍。纳入标准: ① 患者均符合诊断标准; ② 患者对研究中的药物不过敏; ③ 患者尿铅≥0.58 μmol/L或表现为血铅≥2.9 μmol/L; ④ 患者治疗前未服用影响研究的药物; ⑤ 年龄大于18岁; ⑥ 自愿参加，并签署研究知情同意书。排除标准: 排除合并有肝、肾、造血系统和内分泌系统等严重性疾病的患者; 排除对本次研究中药物过敏的患者; 排除妊娠期妇女患者; 排除具有传染性疾病的患者; 排除患有严重电解质紊乱、恶性肿瘤、严重瓣膜病患者; 排除患有自身免疫性疾病患者。

1.2 治疗方法

2组患者均予以改善体内水电解质、酸碱平衡，改善患者营养状况等治疗。对照组在此基础上予水溶性维生素(重庆药友制药有限责任公司，国药准字H50020795), 2 支/次, 1次/d; 研究组在对照组基础上给予依地酸二钠钙(北京紫竹药业有限公司，国药准字H11021376)联合治疗，静脉滴注初始缓慢滴药，约30滴/min, 逐渐增加滴药速度以减少不良反应发生，与患者及其家属说明药物注意事项。依地酸二钠钙1.0 g加入5 %葡萄糖液250 mL中静脉滴注, 1次/d, 连用3 d停药, 4 d为1个疗程。停药后观察患者临床症状，同时对比患者尿铅含量及排铅反应，若患者24 h尿铅降至1.45 μmol/L以下，则终止治疗，相反则继续治疗。

1.3 T淋巴细胞、氧化应激及尿铅、血铅浓度

检测方法

由专业人员于治疗前后空腹采取外周静脉血5 mL, 注入EDTA-K2真空抗凝管中，在25℃下, 3 h内检测完毕, CD3+、CD4+、CD8+活性采用单克隆抗体间接免疫荧光法检测，应用广州市华粤瑞科科学器材有限公司提供的Vidas系列全自动荧光免疫分析仪，同样方式取血, 3 000 r/min, 离心10 min, 取上层血清液待检，于-20℃冻存，且只能冻融1次。血清SOD活力采用黄嘌呤氧化酶法测定; 血清丙二醛(MDA)采用硫代巴比妥酸(TBA)比色法测定，应用上海启文生物科技有限公司提供的BioDrop-Duo超微量蛋白核酸分析仪进行检测; 尿铅浓度: 治疗第3天后留24 h尿量，摇匀后从中取20 mL用于检测; 血铅浓度运用原子光谱检测仪(北京博辉创新科技光电公司，型号BH2100)检测，试剂盒由南京君澜生物科技有限公司提供，操作步骤均严格按照《全国临床检验操作规程》和试剂盒各自附带的说明书[7]的要求进行。

1.4 疗效评定标准

疗效标准参照《职业性慢性铅中毒诊断标准》。痊愈: 患者尿铅浓度小于 1.45 μmol/L, 血铅浓度小于1.9 μmol/L, 临床症状消失; 有效: 患者血铅和尿铅浓度低于入院前水平，临床症状基本消失; 无效: 患者血铅和尿铅浓度不变或增加，临床症状不变或加重。

记录患者每2周复诊的血常规、血脂、肝功能及肾功能情况。治疗期间观察并记录所有患者药物副反应发生情况。

1.5 统计学分析

采用SPSS 17.0软件包分析数据，符合正态性的计量资料采用均数±标准差表示，两组患者治疗前后各项指标状况对比予以配对样本t检验，两组间各项指标状况对比予以独立样本t检验，临床疗效及不良反应状况采用百分率(%)表示，予以RxC卡方检验,P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 2组患者临床治疗效果分析

对照组患者治疗后的总有效率为75.61 %, 研究组治疗后总有效率为92.86 %, 研究组总有效率显著高于对照组(P<0.05)。见表1。

表1 2组患者治疗后临床治疗效果分析[n(%)]

与对照组比较, *P<0.05。

2.2 2组患者CD3+、CD4+、CD8+活性对比

2组患者CD3+活性相比无显著差异(P>0.05); 与对照组比较，研究组患者CD4+活性较低, CD8+活性较高, CD4+/CD8+较低，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 2组患者CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+对比 %

与对照组比较, *P<0.05。

2.3 2组患者治疗前后氧化应激水平比较

与治疗前比较，2组患者治疗后SOD、MDA水平显著升高，且研究组治疗后SOD、MDA水平显著高于对照组(P<0.05)。见表3。

表3 2组患者治疗前后氧化应激水平比较

与治疗前比较, *P<0.05; 与对照组比较, #P<0.05。

2.4 2组患者治疗前后尿铅及血铅浓度状况对比

与治疗前比较, 2组患者治疗后尿铅浓度升高，血铅浓度降低，且研究组治疗后尿铅浓度、血铅浓度显著低于对照组(P<0.05)。见表4。

表4 2组患者治疗前后尿铅及血铅浓度状况对比

与治疗前比较, *P<0.05; 与对照组比较, #P<0.05。

2.5 安全性分析

2组患者均未出现严重不良反应。研究组出现不良反应4例(5.71%), 其中头痛2例，恶心呕吐2例，停药后症状消失; 对照组出现不良反应5例(7.14%), 其中口渴2例，头晕头痛3例，停药后症状消失, 2组不良反应发生率无显著差异(P>0.05)。

3 讨 论

职业性铅中毒是临床上较为常见的职业病之一[8]。临床上依地酸二钠钙主要由静脉或肌肉给药，有效成分主分布于细胞外液，促进细胞外液的铅迅速排出，但细胞内铅排出缓慢[9]。

人体内铅含量增加会导致人体免疫力降低及功能紊乱。T淋巴细胞来源于骨髓的多能干细胞。在人体胚胎期和初生期，骨髓中的一部分多能干细胞或前T细胞迁移到胸腺内，在胸腺激素的诱导下分化成熟，成为具有免疫活性的T细胞[10-11]。铅中毒时, T淋巴细胞活性下降，进而影响到细胞免疫功能[12]。本研究对照组总有效率为75.61%, 显著低于研究组92.86 %; 研究组患者CD4+活性较高, CD8+活性较低，CD4+/CD8+较高，差异有统计学意义(P<0.05)。表明依地酸二钠钙联合水溶性维生素能有效改善患者T淋巴细胞活性。

氧化应激是指机体在遭受各种有害刺激时，体内氧化与抗氧化作用失衡，倾向于氧化，如反应性氧化物和活性氮簇的产生过多或消除减少，从而导致组织损伤[13]。SOD是一种糖蛋白，可清除氧自由基及其分解产物，对细胞生物膜具有保护作用[14]。MDA是脂质过氧化的产物，其高低可间接反映机体细胞受氧自由基损伤的程度，目前多采用脂质过氧化产物MDA来间接反映氧自由基水平。研究[15]表明，氧自由基在生理情况下可被SOD清除，增加黏膜通透性，且因结肠黏膜中SOD抗氧化活性会在铅中毒发生时下降，因此氧自由基的损伤加重了铅中毒的病情。本研究中，研究组治疗后SOD、MDA水平较高，尿铅浓度、血铅浓度较低，与对照组比较有显著差异(P<0.05), 表明依地酸二钠钙联合水溶性维生素可有效提高SOD、MDA水平，降低尿铅浓度、血铅浓度，效果显著。

[1] 罗晴. 依地酸钙钠治疗职业性慢性铅中毒的临床观察与护理[J]. 工业卫生与职业病, 2014, 40(6): 480-480.

[2] 李志恒. 职业性慢性铅中毒41例临床分析[J]. 中国实用医药, 2011, 06(28): 71-72.

[3] 李源. 水溶性维生素致儿童不良反应六例报告[J]. 临床合理用药杂志, 2012, 05(21): 100-100.

[4] 李强, 李挥, 庞坤, 等. 功能性饮料中11种水溶性维生素的高通量检测技术研究[J]. 河北省科学院学报, 2012, 29(3): 44-48.

[5] 朱婵艳. 慢性铅中毒患者驱铅治疗的护理[J]. 工企医刊, 2012, 25(5): 64-64.

[6] 肖雄斌, 赖燕, 李颖, 等. 职业性慢性铅中毒早期诊断指标的研究[J]. 实用预防医学, 2010, 17(7): 1269-1271.

[7] 中华人民共和国卫生部医政司. 全国临床检验操作规程 [M]. 3版. 南京: 东南大学出版社, 2006: 1.

[8] 宋宇. 职业病慢性铅中毒82例临床分析[J]. 职业卫生与病伤, 2004, 19(4): 267-268.

[9] 邓仕华. 依地酸二钠钙驱铅联合营养干预治疗儿童中度铅中毒的临床效果观察[J]. 中国实用医药, 2014(18): 188-189.

[10] 冯俊燕, 牛俊奇, 姜艳芳. 滤泡性辅助性T细胞(Tfh)的研究进展[J]. 中国免疫学杂志, 2010, 26(8): 754-757.

[11] 张翠芳. T淋巴细胞在临床疾病发病与诊治中的作用探讨[J]. 中国中医药咨讯, 2011, 03(19): 219-219.

[12] 蒋玉红, 刘凯, 王涛, 等. 铅中毒儿童外周血T淋巴细胞免疫活性改变及临床意义[J]. 中国儿童保健杂志, 2006, 14(5): 520-521.

[13] 王永闯, 肖兴军. 氧化应激在周围神经病变发病机制中的作用[J]. 卒中与神经疾病, 2016, 23(1): 73-74.

[14] 王亮. 硫氧还蛋白及超氧化物歧化酶在溃疡性结肠炎中的表达及作用[D]. 河北医科大学, 2015.

[15] 刘富萍, 张琦, 谷楠, 等. 谷胱甘肽及丙二醛在炎症中表达的研究进展[J]. 健康导报: 医学版, 2015, 24(6): 1001-1002.

Effects of calcium disodium and water-soluble vitamins on serum T lymphocytes and oxidative stress in patients with occupational lead poisoning

ZHANG Li, ZHANG Hengdong

(Occupational Disease Prevention and treatment Institute, Occupational Disease Prevention and Control Center in Jiangsu Province, Nanjing, Jiangsu, 210000)

Objective To investigate the effects of calcium disodium and water-soluble vitamins on serum T lymphocytes and oxidative stress in patients with occupational lead poisoning. Methods A total of 140 occupational lead poisoning patients in our hospital were randomly divided into control group with 70 cases treated by water soluble vitamins and study group with 70 cases treated with calcium disodium on the basis of the control group. The CD3+, CD4+and CD8+activity of T lymphocytes subsets were compared, superoxide dismutase (SOD) and malondialdehyde (MDA) levels, and lead concentration in urine and blood were determined. Meanwhile, the clinical outcomes and adverse reactions of two groups were compared. Results The effective rate of the control group was significantly lower than that of the study group (75.61% vs. 92.86%,P<0.05). Compared with the control group, the patients in the study group had lower CD4+activity, higher CD8+activity, lower CD4+/CD8+activity, higher levels of SOD and MDA, and lower lead concentrations in urine and blood, and the differences were statistically significant(P<0.05). Conclusion Calcium disodium and water-soluble vitamins can effectively improve the level of serum T lymphocytes and oxidative stress, decrease the concentration of lead in urine and blood.

calcium disodium; water-soluble vitamin; occupational lead poisoning; serum T lymphocytes; oxidative stress

2017-02-16

江苏省科技计划项目(SBL2014040115)

张恒东

R 135.1

A

1672-2353(2017)15-034-03

10.7619/jcmp.201715009