发酵豆粕对断奶～2月龄肉兔生长发育、血清生化及肠道发育的影响

孙海涛+杨丽萍+姜文学+麻名文+孙作为+白莉雅+高淑霞

摘要：为研究饲粮不同发酵豆粕水平对断奶～2月龄肉兔生长性能、血清指标及肠道发育的影响，选用平均体重为（748±50）g的断奶肉兔150只，随机分成5组，各组间初始体重无显著差异，分别饲喂在基础饲粮中添加0（对照）、3%、6%、9%和12%发酵豆粕的试验饲粮，预试期7 d，正试期23 d。结果表明：饲粮发酵豆粕添加水平对平均日采食量（ADI）、平均日增重（ADG）、料肉比（F/G）无显著影响（P>0.05）。对血清总蛋白、碱性磷酸酶含量无显著影响（P>0.05），但血清尿素氮含量有下降趋势（P=0.0562），对血清胆固醇含量影响显著（P<0.05）。饲粮发酵豆粕添加水平对十二指肠绒毛高度、肥大细胞数量及乳酸菌、大肠杆菌含量影响显著（P<0.05）。综合本试验测定指标，饲粮不同发酵豆粕水平对断奶～2月龄肉兔的生长发育无显著影响，但能显著促进其肠道发育，改善盲肠微生物菌群。

关键词：肉兔；发酵豆粕；生长性能；血清指标；肠道发育

中图分类号：S829.15 文献标识号：A 文章编号：1001-4942（2017）08-0131-05

Abstract This experiment was conducted to research the effects of fermented soybean meal on growth performance， serum biochemistry and intestinal development of weaner to 2-month-old growing meat rabbits. One hundred and fifty weanling meat rabbits with average body weight of （748±50） g were randomly divided into 5 groups. The rabbits in the 5 groups were fed experimental diets containing 0， 3%， 6%， 9% and 12% fermented soybean meal respectively. The experiment included a pretrial period of 7 days and an experimental period of 23 days. The results were as follows： dietary fermented soybean meal level had no significant influence on average daily feed intake （ADI）， average daily gain （ADG） and ratio of feed to gain （F/G）. Dietary fermented soybean meal level significantly affected the contents of serum cholesterol （CHO） （P<0.05）， but had no significant influence on total protein （TP） and alkaline phosphatase （AKP） （P>0.05）. With the increase of fermented soybean meal level， the serum urine nitrogen （SUN） showed a down trend （P=0.0562）. The dietary fermented soybean meal level also had significant effect on villous height of duodenum， mast cell number， lactobacillus and colibacillus （P<0.05）. In conclusion， the dietary fermented soybean meal level had no significant influence on growing performance， but could promote the intestine development and improve the microbial population status of weaner to 2-month-old meat rabbits.

Keywords Meat rabbit； Fermented soybean meal； Growing performance； Serum index； Intestinal development

作為主要植物性蛋白质原料的豆粕，含有多种抗营养因子，影响其营养物质的吸收利用。发酵豆粕利用现代生物工程技术，将豆粕中大分子蛋白质酶解成多肽、小肽及游离氨基酸，并可产生大量的益生菌、寡肽、乳酸、谷氨酸、维生素以及未知生长因子等物质，某些小肽还具有特殊的生理作用[1]。目前，发酵豆粕对提高仔猪及肉仔鸡的生产性能和养分消化率、改善微生态菌群、提高抗氧化能力等方面的报道较多，但发酵豆粕对于幼龄肉兔生长发育各方面影响的研究鲜见报道。本试验旨在通过肉兔饲粮添加不同水平发酵豆粕，研究其对断奶～2月龄肉兔生长性能、血清指标及肠道发育方面的影响。

1 材料与方法

1.1 试验饲粮

基础饲粮参照NRC（1977）肉兔饲养标准配制而成，饲粮组成及营养水平见表1。在基础饲粮中分别添加0（对照）、3%、6%、9%和12%发酵豆粕（由山东和实集团公司提供，粗蛋白≥48%，水溶蛋白≥10%，有机酸≥3.5%），制成5种试验饲粮。

1.2 试验设计及饲养管理endprint

选用150只体重（748±50） g的断奶伊拉肉兔，随机分为5组，各组间体重差异不显著，每组15个重复，每个重复2只兔子，分别饲喂以上5种试验饲粮，预试期7 d，正式期23 d。试验兔每笼2只进行饲养，自由采食、饮水，常规免疫程序，自然采光、通风。

1.3 样品的采集与制备

试验开始后第30 d早晨空腹称重后每组选取6只试验兔心脏采血10 mL，室温避光静置30 min后，3 000 r/min离心10 min，分离所得血清分装于Eppendorf管中，置于-20℃冷冻保存待测。试验兔采血后屠宰取胸腺及脾脏并称重。取盲肠内容物称重，并取部分内容物于冻存管中液氮冷冻备测。

1.4 测定指标和方法

1.4.1 生产性能指标 测定断奶和饲养试验结束时试验兔体重，并统计断奶～2月龄试验兔的采食量，计算平均日采食量（ADI）、平均日增重（ADG）和料肉比（F/G）。

1.4.2 血清生化指标的测定 血清中碱性磷酸酶（AKP）、白蛋白（ALP）、总蛋白（TP）、尿素氮（BUN）和胆固醇（CHO）的测定采用日本和光提供的试剂盒检测，按说明书操作，测定仪器采用日立7020型全自动生化分析仪。

1.4.3 肠道发育指标 ①十二指肠切片制作与观察：统一取幽门下5 cm处十二指肠，磷酸盐缓冲液洗干净，置于固定液[卡诺氏（Carnoys）]中固定4 h，经脱水、透明、石蜡包埋，切片4～6 μm；采用苏木精-伊红（HE）染色观察十二指肠绒毛高度，采用甲苯胺蓝染色观察肥大细胞数量。显微镜观察并拍照，应用Image-Pro Plus 6.0软件对每张照片进行分析得出每张照片上十二指肠绒毛高度及对应绒毛上肥大细胞数量。

②盲肠微生物培养试验：无菌取盲肠内容物1 g于装有99 mL灭菌生理菌水及玻璃珠的锥形瓶中，稀释均匀后取该稀释液0.5 mL加入盛有4.5 mL灭菌生理盐水的试管中，依次进行10-3～10-7稀释。乳酸菌和大肠杆菌经实验室培养后采用平板计数法进行计数。

1.5 数据处理

采用SAS 9.4统计软件中的GLM进行方差分析，分别以P<0.05和P>0.05作为差异显著和不显著的判断标准。

2 结果与分析

2.1 饲粮发酵豆粕水平对断奶～2月龄肉兔生长性能的影响

由表2可知，在初始体重无显著差异的情况下，饲粮中不同发酵豆粕水平对断奶～2月龄伊拉肉兔平均日采食量（ADI）、平均日增重（ADG）及料重比（F/G）影响均不显著（P>0.05）。

2.2 饲粮发酵豆粕水平对断奶～2月龄肉兔血清指标的影响

由表3可知，饲粮不同发酵豆粕水平对断奶～2月龄肉兔的血清总蛋白（TP）及碱性磷酸酶（AKP）含量的影响差异不显著（P>0.05）；对断奶～2月龄伊拉肉兔的血清胆固醇（CHO）含量影响显著（P<0.05）， 9%和12%发酵豆粕添加组CHO水平显著低于对照组并在12%添加组水平达到最低；饲粮不同发酵豆粕水平对断奶～2月龄伊拉肉兔的血清尿素氮（SUN）含量影响不显著（P=0.0562），但随着发酵豆粕添加水平的提高，尿素氮含量呈下降趋势。

2.3 饲粮发酵豆粕水平对断奶～2月龄肉兔肠道发育的影响

由表4可知，饲粮不同发酵豆粕水平对断奶～2月龄肉兔的十二指肠绒毛高度影响显著（P<0.05），其中6%、9%和12%发酵豆粕组显著高于对照组；对肥大细胞数量影响显著（P<0.05），其中9%及12%发酵豆粕组肥大细胞数量显著高于对照组，并在9%发酵豆粕添加组数量达到最大。

2.4 饲粮发酵豆粕水平对断奶～2月龄肉兔盲肠微生物的影响

由表5可知，饲粮不同发酵豆粕水平对断奶～2月龄肉兔的盲肠内容物大肠杆菌含量影响差异显著（P<0.05），6%、9%及12%发酵豆粕添加组盲肠大肠杆菌含量显著低于对照组；对盲肠内容物乳酸菌含量影响差异显著（P<0.05），随着发酵豆粕添加水平的提高，乳酸菌含量升高，3%和6%发酵豆粕添加组显著高于对照组，9%及12%发酵豆粕添加组显著高于对照组、3%和6%添加组。

3 讨论

3.1 发酵豆粕水平对断奶～2月龄肉兔生长性能的影响

豆粕是一种植物性蛋白饲料，被广泛用于工业中，但其中存在许多抗营养因子，会降低动物对其营养物质的吸收和利用。相比豆粕，发酵豆粕不仅能够降低豆粕中存在的抗营养因子如大豆抗原、蛋白酶抑制因子的含量；而且豆粕经微生物发酵后酶解成小分子蛋白质、肽类和氨基酸等营养物质，能提高机体蛋白质的合成和饲料氨基酸的利用率。研究发现，仔猪饲料中添加发酵豆粕能促进仔猪生长[2]。而李云兰等[3]发现，发酵豆粕替代豆粕饲喂鲤鱼后对鲤鱼的饲料系数和特定生长率都没有产生显著影响，表明豆粕发酵后对鲤鱼的生长性能没有明显的促进作用。本试验研究表明，3%、6%、9%和12%的发酵豆粕替代豆粕对断奶～2月龄肉兔的ADI、ADG和F/G均无显著影响，3%、6%、9%和12%的发酵豆粕替代比例对断奶～2月龄肉兔生长性能没有明显的促進作用。

3.2 发酵豆粕添加水平对断奶～2月龄肉兔血清指标的影响

血清生化指标是评定畜禽营养物质消化代谢及其机能的重要指标[4]。血清总蛋白含量是对动物机体蛋白质代谢状况的有效反映，血清总蛋白含量高则说明蛋白在体内的沉积较多，可供给动物机体的蛋白质也多。发酵豆粕完全代替普通豆粕配制肉鸡饲料，结果血清总蛋白并无显著差异[5，6]。这与本试验的结果相一致，本试验中，不同添加比例发酵豆粕饲喂的肉兔各组血清总蛋白含量无显著差异。

作为衡量饲粮氨基酸平衡的一个风向标，血清尿素氮直接反映了机体蛋白质分解代谢和营养水平[7]。血清尿素氮水平越高则表明蛋白质分解加强，氮的利用率越低；血清尿素氮水平越低则表明蛋白质分解减弱，机体内氮的利用率越高。 本试验中，各处理组间血清尿素氮差异不显著但与对照组相比，随着发酵豆粕替代水平的升高，尿素氮呈下降趋势，表明发酵豆粕在一定程度上可以提高肉兔的氮利用率。endprint

碱性磷酸酶與动物成骨细胞活性的高低有着密切关系，碱性磷酸酶活性高则可促进骨胶原蛋白和骨盐沉积，进而促进动物的生长发育。本试验中，各试验组碱性磷酸酶活性与对照组相比均无显著差异。

血清胆固醇反映了机体对脂类的利用情况，胆固醇水平越低则表明机体对脂肪的利用率越高[8]，本试验结果发现添加发酵豆粕能降低血清中胆固醇含量，表明发酵豆粕能降低血清胆固醇含量，提高肉兔机体对脂肪的利用率。

3.3 发酵豆粕水平对断奶～2月龄肉兔肠道发育影响

作为养分吸收的主要场所，小肠绒毛结构良好是养分消化吸收和动物正常生长的生理学基础[9]。小肠绒毛高度与绒毛上细胞数量呈显著正相关，绒毛越高成熟细胞越多，而只有成熟的绒毛细胞才具有吸收养分的功能，所以绒毛越高则说明机体对养分的吸收能力越强[10]，绒毛高度下降则说明吸收功能降低[11]。发酵豆粕能提高小肠绒毛高度，有效改善仔猪小肠绒毛结构[12，2]。本试验中，6%、9%和12%发酵豆粕替代组的绒毛高度显著高于对照组，说明发酵豆粕能够提高绒毛高度，有效改善肉兔小肠绒毛结构。

肥大细胞遍布在所有组织中[13]，其在炎症反应和速发型过敏反应中扮演重要角色[14，15]，同时还参与抵御细菌感染的免疫反应并且与病毒感染有直接关系[16]。正常剂量的锌硒对照组中肉鸡肠道黏膜结构完整且肥大细胞数量较多，而过高或过低的锌硒处理组肉鸡肠道黏膜结构受损且肥大细胞数量减少[17]。王文利等[18]发现，大蒜溶液饲喂小鼠能够增加小鼠肠道肥大细胞数量。本试验结果表明，9%和12%发酵豆粕替代组的肉兔肠道肥大细胞数量显著高于对照组，说明提高肉兔饲料中发酵豆粕的比例可显著提高肠道中肥大细胞的数量，从而改善肉兔的肠道免疫功能。

3.4 发酵豆粕水平对断奶～2月龄肉兔盲肠微生物的影响

动物体内最大和最复杂的微生态系统是胃肠道微生物生态系统，随着动物年龄的增长、营养变化等因素的影响，胃肠道微生物菌群发生着不同变化，健康动物胃肠道菌群自身以及与动物机体之间始终处于一种动态平衡中。动物胃肠道菌群的稳定和平衡对动物机体的生理功能具有重要作用，对宿主健康具有深远影响[19]。动物胃肠道菌群大体可以分为有益菌、有害菌和条件致病菌三大类。当有益菌和有害菌数量在比例范围内存在于胃肠道部位时则不会引起疾病，此情况下有益菌和有害菌属于肠道正道菌群[20]，肠道微生物菌群的稳定对宿主健康有着重要作用[21]，当发生食物过敏或腹泻时，肠道菌群中乳酸菌会减少，而肠杆菌会增多[22]。研究发现，发酵豆粕能改善黄羽肉鸡的肠道微生物菌群和肠道粘膜免疫功能[23]。本试验结果表明，随着发酵豆粕替代水平的提高，肉兔盲肠微生物中乳酸菌含量显著增加，而大肠杆菌含量显著减少，表明发酵豆粕能促进肉兔盲肠中乳酸菌的生长而抑制大肠杆菌的生长。

4 结论

不同发酵豆粕水平对断奶～2月龄肉兔的生长发育无显著影响，但能显著促进伊拉肉兔的肠道发育，改善盲肠微生物菌群。

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