冠心静胶囊对心梗后抑郁模型大鼠行为学表现及5-HT的影响

佟 彤 李爱勇 龚 稻 廖 磊 刘红旭

(1 首都医科大学附属北京中医医院心血管科，北京，100010； 2 北京市临床药学研究所，北京，100035)

冠心静胶囊对心梗后抑郁模型大鼠行为学表现及5-HT的影响

佟 彤1李爱勇1龚 稻2廖 磊2刘红旭1

(1 首都医科大学附属北京中医医院心血管科，北京，100010； 2 北京市临床药学研究所，北京，100035)

目的：观察冠心静对心梗后抑郁模型大鼠行为学的影响。方法：通过冠状动脉结扎后进行慢性轻度不可预见性刺激制造心梗后抑郁模型，测定治疗前后大鼠行为学指标以及5-羟色胺(5-hydroxytryptamine，5-HT)变化。结果：模型组大鼠治疗后水平及垂直运动分值、体重、液体消耗及糖水偏爱,5-羟色胺水平均明显低于空白对照组(P<0.01)，与模型组比较，冠心静组及氟西汀组均能改善大鼠的旷场试验评分，增加体重，提高糖水偏爱得分及5-HT水平(P<0.05)，2组间比较无明显统计学意义。结论：冠心静胶囊可以改善心梗后抑郁大鼠的行为学表现及5-HT水平，其治疗双心疾病的作用值得进一步研究。

冠心静胶囊；双心疾病；行为学；5-羟色胺

急性心肌梗死(Acute Myocardial Infarction，AMI)是冠状动脉粥样硬化性心脏病的危重症。随着AMI治疗措施的不断进步，患者病死率逐步下降，AMI患者易出现抑郁情绪引起了临床医生的注意。诸多研究已证实，冠心病与抑郁状态紧密相关，冠心病患者易出现抑郁情绪，同时抑郁状态也是冠心病的高位因素之一。“双心疾病”(冠心病及心理疾病)越来越受到人们的重视[1-2]。中成药冠心静胶囊具有活血化瘀、通络止痛、解郁除烦、养心安神的功效，既往临床研究发现，冠心静联合常规治疗为主导的治疗组，患者心绞痛及抑郁症状明显改善[3]。本文从基础研究角度出发，旨在探讨其对心梗抑郁模型大鼠行为学及5-HT的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 SPF级雄性大鼠40只，体质量(200±20)g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司。合格证号：SCXK(京)2007-0001。

1.1.2 药物 冠心静胶囊(保定中药制药有限公司生产，生产批号140520)。盐酸氟西汀分散片(简称氟西汀)(PATHEON FRANCE公司生产，生产批号3081A)。

1.1.3 仪器 Powerlab数据采集分析系统，型号：MI870；动物用生物电放大器，型号：ML136；小动物呼吸机：上海奥尔科特生物科技有限公司，型号ALC-V8；Thermo MULTISKAN MK3。

1.2 方法

1.2.1 分组与模型制备 大鼠腹腔注射3%戊巴比妥钠麻醉，连接小型动物呼吸机行人工呼吸，呼吸频率90次/min，潮气量(10～12)mL，呼吸比设为1:1。胸骨左旁第3～4肋间切开皮肤，逐层钝性分离皮下组织、肌肉，暴露心脏及大血管根部，剪开心包，用6-0 Prolene线结扎前降支血管。结扎部位以下心肌变白搏动减弱，且心电图II导联出现ST段弓背向上明显抬高为造模成功标志。将手术成功的动物随机分为空白对照组，模型组，冠心静组和氟西汀组。

除空白对照组除外，其余各组大鼠连续10 d每天给予给中慢性轻度不可预见性刺激，第1天160 HZ频率摇晃5 min；第2天禁食24 h；第3天夹尾1 min；第4天禁水24 h；第5天160 HZ频率摇晃5 min；第6天4 ℃冰水游泳5 min；第7天行为限制2 h；第8天40 ℃热应激刺激3 min；第9天昼夜颠倒24 h；第10天夹尾1 min。

1.2.2 给药方法 术后第2天开始各组动物给药。空白对照组正常喂养，不孤养，每日灌胃给予蒸馏水5 mL/kg。模型组、冠心静组和氟西汀组均孤笼饲养，模型组按体重灌胃给予蒸馏水，冠心静组按0.378 g/kg、氟西汀组按2.1 mg/kg灌胃给药，连续给药10 d。

1.2.3 检测指标与方法 行为学测定：实验结束并进行24 h的禁食禁水后，进行动物的基础/纯水消耗试验，同时给予每只大鼠事先定量好的2瓶水：1瓶1%蔗糖水，1瓶纯水。60 min后，取两瓶水定量，计算动物的总液体消耗、糖水消耗、纯水消耗、糖水偏爱(糖水偏爱=糖水消耗/总液体消耗×100%)。液体消耗实验后再次用敞箱试验对各组动物进行行为学评分。敞箱装置由木板制成，底面为75 cm×75 cm的正方形并被等分为25个等边方格，周围有高40 cm的墙壁，内面用黑漆涂满。7:30～12:00之间在安静的房间内进行此项观察。将大鼠置于中心方格内，观察大鼠在5 min水平穿越格数(4爪均进入的方格方可记数)记为水平运动得分、竖立次数(两前爪腾空或攀附墙壁即可记数)为垂直运动得分。彻底清洁敞箱后再进行下1只大鼠的观察。通过比较大鼠水平运动和竖直运动评分。

5-HT水平的测定：大鼠麻醉后心脏取血5 mL置于EP管重静置30 min，2 000 r/min离心5 min分离血清，-80 ℃冻存备用，酶联免疫吸附法测定血清中5-HT的含量。

1.3 统计学方法 数据采用SPSS 15.0统计软件包(PN：32119001，SN：5045602)进行分析。实验结果以均数±标准差表示，使用student-Newman-Keuls Test法进行组间差异性比较。以P<0.05为差异有统计学意义，以P<0.01为差异有显著统计学意义。

2 结果

2.1 冠心静对心梗抑郁模型大鼠旷场试验评分的影响 实验显示，模型组大鼠治疗后水平及垂直运动分值明显低于空白对照组(P<0.01)，与模型组比较，冠心静组及氟西汀组均能改善大鼠的水平和垂直运动得分(P<0.05)，2组间比较无统计学意义。见表1。

表1 冠心静对心梗抑郁模型大鼠旷场试验评分的影响(分

注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.05；与空白对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01

2.2 冠心静对心梗抑郁模型大鼠体重及糖水偏爱的影响 实验显示，模型组大鼠治疗后第8天及第11天测量体重均低于空白对照组(P<0.01)，且总液体消耗及糖水偏爱也显著低于空白对照组(P<0.01)。冠心静组及氟西汀组在模型大鼠体重增长方面优于模型组(P<0.01)，且2组大鼠的糖水偏爱得分均高于模型组(P<0.05)。2组间比较无统计学意义。见表2。

2.3 冠心静对心梗抑郁模型大鼠血清中5-HT的影响 实验显示，模型组大鼠血清中5-HT显著下降，与空白对照组比较具有统计学意义。经过冠心静及氟西汀干预后，大鼠血清中5-HT均有不同程度的升高，与模型组有显著统计学意义(P<0.01)，但2组间无统计学意义。

表2 治疗前后各组大鼠体重、液体消耗及糖水偏爱的比较

注：给药组与模型组比较，*P<0.05，**P<0.05；与空白对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01

表3 实验各组大鼠血清5TH含量比较

注：给药组与模型组比较，**P<0.01；模型组与空白对照组比较，△△P<0.01

3 讨论

冠心病与抑郁症之间有着紧密的联系，许多心血管疾病的患者合并心理问题，特别是冠心病、心绞痛合并情绪障碍的患者具有较高的死亡率和较差的预后[4]。有资料显示，心血管疾病并发情绪障碍的概率为8%～44%[5]，而在心肌梗死后，合并抑郁的发生率则可达到45%左右[6]，且抑郁程度与死亡率之间存在线性关系[7]，数据显示，心梗后合并有抑郁症的患者24个月内风险较正常人提高1.6～2.7倍[8]。但多年来该症始终未受到充分重视，发病机理尚不明确，这在一定程度上影响了冠心病合并抑郁疾病治疗策略的制定[3,9]。

冠心静胶囊由丹参、赤芍、川芎、红花、玉竹、三七、人参、苏合香及冰片9种中药组成。临床证明其可以明显改善冠心病常见症状，包括胸闷、胸痛、心悸、气短、心烦、失眠等心脏和心理症状，起到调神和调心双重治疗作用[10]。其中丹参为君药，有活血化瘀、清心除烦、养血安神之功；川芎、赤芍、红花、三七、人参共为臣药，起到活血化瘀、通络止痛、补气生津之效；佐药玉竹有清热养阴之功；使药为苏合香及冰片，两药可解郁开窍止痛。诸药合用，共奏活血化瘀、通络止痛、解郁除烦、养心安神的作用。现代研究证明，冠心静胶囊治疗“双心疾病”的作用机理主要是改善心肌供血和镇静抗抑郁作用[10]。

慢性不可预见性温和应激模型与人类抑郁症临床特征相似，被广泛应用为抑郁动物模型[11]。本实验通过冠状动脉结扎法制作心肌梗死模型，并通过慢性轻度不可预见刺激模型模拟心梗后抑郁状态。通过冠心静进行药物干预，观察模型大鼠的行为学变化，采用旷场实验评分，糖水偏爱观察评价大鼠心肌梗死后行为学变化情况。糖水偏好可以反映动物的奖赏反应程度，糖水偏爱降低是衡量快感缺乏的有效客观指标。水平活动得分反映动物的活动度，垂直活动则反映动物对新鲜环境的好奇程度。3者是对动物行为学评价的重要指标[12]。1965年Schildkraut JJ首次提出抑郁症发病的单胺递质学说以来，5-HT被认为是与抑郁症发生关系最为密切的脑内单胺神经递质，其具有调节情感、睡眠、记忆、食欲、体温、下丘脑-垂体-内分泌等多种功能。在5-HT的合成，释放，转运，再摄取过程中的任何一个环节出现异常都会导致抑郁症的发生，脑内5-HT的减少直接与精神及情绪变化有关，它还可以通过影响其他递质的活动诱发抑郁症[13]。

实验结果显示与模型组大鼠水平及垂直运动分值明显低于对照组，且体重下降，总液体消耗及糖水偏爱也较对照组降低，表明心梗后大鼠活动度以及对外界新鲜环境的好奇程度下降，快感缺乏，说明大鼠出现了心梗后抑郁状态。比较之下，冠心静可以显著改善心梗抑郁大鼠的旷场水平及垂直运动得分，增加大鼠体重，增加糖水偏爱得分，大鼠的行为学表现显著得到改善。同时，大鼠的血清中5-HT水平也显示，在模型组中大鼠5-HT水平显著下降，与行为学的变化相吻合，而冠心静及氟西汀组大鼠血清中的5-HT含量则高于模型组，2组间未见显著统计学意义，提示冠心静可以改善心梗后抑郁状态从而改善预后，而其作用机理值得进一步研究。

[1]黄子菁，陈康.急性心肌梗死合并抑郁症的相关性研究进展[J].实用心脑肺血管病杂志，2015,22(2):1-3.

[2]石卫晨，吴蓉，蔡利红.浅谈“双心”疾病的研究现状及方向[J].现代临床医学，2015,40(3):230-232.

[3]姜俊玲,李新军.冠心静治疗冠心病抑郁症的疗效观察[J].中国中医药科技,2014,20(3):316-317.

[4]胡大一.心血管疾病和精神心理障碍的综合管理-“双心医学”模式的探索[J].中国临床医生,2006,34(5):2.

[5]Fleetrp,Beitman BD.Cardiovascular death from panic disorder.a critical review of the literature[J].J Psychosom Res,1999,44(1)：71-80,16-317.

[6]王悦芬,徐雅,卢小芳,等.心肌梗死后大鼠行为学变化的特征分析[J].世界中医药,2013,8(12):1465-1466，1470.

[7]Watkins L L，Grossman P.Association of depressive symptoms with reduced baroreflex cardiac control in coronary artery disease.[J].American Heart Journal，1999，137(3):453-457.

[8]Meijer A，Conradi H J，Bos E H，et al.Prognostic association of depression following myocardial infarction with mortality and cardiovascular events：a meta-analysis of 25 years of research[J].Psychosomatic Medicine，2013，66(6):814-22.

[9]胡大一，丁荣晶.关注心血管疾病患者精神心理卫生的建议[J].中华心血管病杂志，2012，40(2):89-91.

[10]袁曙光,陈儒.冠心静胶囊治疗“双心疾病”机理初探[J].新中医,2013,45(12):176-178.

[11]Grippo A J，Beltz T G，Johnson A K.Behavioral and cardiovascular changes in the chronic mild stress model of depression[J].Physiology & Behavior，2003，78(4-5):703-10.

[12]袁晓冉,石少波,王芳,等.舍曲林对心梗后抑郁大鼠行为学及海马NR1表达的影响[J].武汉大学学报:医学版,2014，35(1):56-59.

[13]安书成,安锋利.5-羟色胺与应激反应及其抑郁症的关系[J].陕西师范大学继续教育学报，2006，23(1):122-124.

(2016-08-19收稿 责任编辑：徐颖)

Effects of Guanxinjing Capsule on Behavioral Manifestations And Level of 5-hydroxytryptamine in Post-myocardial Infarction Depression Model Rats

Tong Tong1, Li Aiyong1, Gong Tao2, Liao Lei2, Liu Hongxu1

(1BeijingHospitalofTraditionalChineseMedicine,AffiliatedwithCapitalMedicalUniversity,departmentofcardiology,Beijing100010,China; 2BeijingInstituteofTraditionalChineseMedicine,Beijing100035,China)

Objective:To observe the effects of Guanxinjing(GXJ) capsule on behavioral phenomenon of post-myocardial infarction depression model rats. Methods:Model was induced by chronic mild and unpredictability stress after coronary artery ligation in rats, and behavior index of rats as well as the level of 5-HT before and after treatment was measured respectively. Results:The score of horizontal and vertical motion score, weight, rate of liquid consumption, sucrose preference test score and level of 5-HT in model group were significantly lower than blank control group(P<0.01). Compared with model group, the GXJ capsule group and fluoxetine group can improve the score of open field test, increase the body weight of rats, and improve the sucrose preference test score as well as the level of 5-HT(P<0.05). There was no significant difference between the two groups. Conclusion:GXJ capsule can improve behavioral manifestations and 5-HT level of post-myocardial infarction depression model rats. Further study on GXJ capsule treating psycho-Cardiological disease is worthy to go on.

Guanxinjing capsule; Psycho-Cardiological disease; Behavioral manifestations; 5-hydroxytryptamine

佟彤(1986.07—)，女，硕士，主治医师，研究方向：心血管疾病中西医结合治疗研究，Tel：(010)52176633，E-mail：tongtong7200@163.com

刘红旭(1963.01—)，男，本科，主任医师，研究方向：心血管疾病中西医结合治疗研究，Tel：(010)52176633，E-mail：lhx_@263.net

R277.7；R242

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2017.08.040