咳喘宁糖浆的质量控制及疗效观察

董慧珍

咳喘宁糖浆的质量控制及疗效观察

董慧珍

目的 制备咳喘宁糖浆，建立质量标准，并观察其临床疗效。方法 采用薄层色谱法对制剂中的鱼腥草、麻黄、甘草进行定性鉴别。采用高效液相色谱法对制剂中的盐酸麻黄碱进行含量测定。将260例咳喘患者随机分为治疗组和对照组，每组130例。治疗组口服咳喘宁糖浆，对照组口服急支糖浆。结果 治疗组总有效率(96.8%)高于对照组(73.5%)，差异有统计学意义(P<0.01)。结论 该制剂制备工艺简单，质量可控，临床疗效较好。

咳喘宁糖浆；制备；质量控制；临床疗效

0 引言

咳喘宁糖浆是一种纯中药制剂，善治肺中痰热而降气平喘，对于外感风热所致的咳喘症状，功效甚佳。本研究对其配制方法、工艺流程、检验方法以及病例治疗效果进行总结，现报道如下。

1 设备与试剂

828型湿度计(美国奥立龙)；超声波清洗器100-500E(昆山市超声仪器有限公司)；MQK-WFH-203三用紫外分析仪(上海米青科实业有限公司 )；AE-240型电子天平(梅特勒-托利多)；Agilent1200型高效液相色谱仪；80-1型离心机(上海手术器械厂)。

硅胶G(南京盛庆和化工有限公司供应)，鱼腥草油对照品(批号：121046-201105)；盐酸麻黄碱对照品(714-9903)由中国食品药品检定研究院提供。甘草酸对照品(1449-05-04)由上海金穗生物科技有限公司生产，乙腈、甲醇为色谱纯，水为纯化水，其余试剂为分析纯。

2 处方与制备方法

2.1 处方 鱼腥草750 g，川贝母1 500 g，杏仁1 500 g，紫菀750 g，桔梗750 g，麻黄450 g，法半夏 450 g，陈皮750 g，四季青2 250 g，石膏450 g，大枣1 500 g，甘草1 500 g，枇杷叶1 200 g，蔗糖9 000 g，苯甲酸8 g，山梨酸钾5 g，纯化水适量共制成15 000 mL。

2.2 配制 按处方量称取鱼腥草、川贝母、杏仁、紫菀、桔梗、麻黄、法半夏、陈皮、四季青、石膏、大枣、甘草、枇杷叶，加适量纯化水浸渍1 h，依次蒸煮2次，第1次1 h，第2次30 min，合并蒸煮液，静置过滤，滤液浓缩至与药材比例1∶1，静置24 h，滤过，分离杂质，加入蔗糖9 000 g及处方量的防腐剂，加热使溶解，放冷后，浓缩至6 000 mL，加入纯化水，混匀，共制成糖浆剂15 000 mL，用枸橼酸调节pH值为3.5～4.0，即得，制成最小包装250 mL/瓶，封口，流通蒸汽灭菌30 min，即得。

3 质量控制[1]

3.1 性状 本品为深棕色的黏稠液体，味微甜，酸涩、气芳香。

3.2 TLC鉴别

3.2.1 鱼腥草TLC鉴别 取本品30 mL，加水10 mL，加醋酸乙酯1 mL，超声处理约20 min，分取醋酸乙酯层液作为供试品的样品[2-3]。取鱼腥草对照药材1 g，醋酸乙酯10 mL，超声处理20 min，同法制成对照药材溶液。再取鱼腥草油对照品按相同方法制成对照品溶液。取不含鱼腥草的处方成分，按处方配比，按相同方法制成阴性对照液[4]。参照文献方法[1]进行薄层鉴别，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应该显示3个相同颜色的主斑点。阴性对照液无此斑点。结果见图1。

图1 鱼腥草TLC图

3.2.2 麻黄TLC鉴别 取本品15 mL，加入氯仿30 mL，混匀，加热回流30 min，放冷，滤过，滤液浓缩至2 mL，作为供试品溶液。取盐酸麻黄碱对照品，精密称定，制成每1 mL含3 mg的甲醇溶液，作为对照品溶液，取不含麻黄的处方成分，按处方配比，采用相同方法制成阴性对照液[4]。参照文献方法[1]进行薄层鉴别，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，结果见图2。

图2 麻黄TLC图

3.2.3 甘草TLC鉴别 取本品30 mL，加石油醚25 mL，醋酸5 mL，在蒸馏装置中回流2 h，滤过，加热挥发石油醚，得残渣，加甲醇5 mL溶解，作为供试品溶液[5]。另取甘草酸对照品，加无水甲醇，使每1 mL含2 mg的甘草酸，作为对照品溶液。取不含甘草的处方成分，按处方配比，相同方法制成阴性对照液。吸取上述3种溶液各5 μL，在用1%氢氧化钠制备的硅胶G薄层板上，依次点上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15∶1∶1∶2)为展开剂，展开，喷以10%盐酸乙醇溶液，加热控制在105 ℃，至斑点显色。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上显相同颜色斑点，阴性对照液无此斑点。结果见图3。

图3 甘草TLC图

3.3 检查 pH值应为4.0～5.5。相对密度应不低于1.31。其他应符合糖浆剂项下的有关规定。

3.4 含蔗糖量 应不低于65% (g/mL)。

3.5 稳定性试验 按照售出包装，上述样品取3批，在(25±2) ℃、相对湿度60%±10%条件下放置12个月，每3个月取样1次，分别于0、3、6、9、12个月按稳定性重点考察项目进行检测，考察其性状、检查、鉴别等项目，将其结果分别与0个月比较，均无任何变化。

3.6 含量测定方法与结果

3.6.1 色谱条件 色谱柱：InertsilODS-3 (250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相：乙腈-水(16∶75)；流速：1.0 mL/min；检测波长：218 nm；柱温：30 ℃；进样量：20 μL。

3.6.2 溶液的制备 ①对照品溶液的制备：准确称取盐酸麻黄碱对照品，以甲醇为溶剂，制成每1 mL含盐酸麻黄碱20 μg的溶液。②供试品溶液的制备：精密量取本品5 mL，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，准确称重，超声处理30 min，取出放冷，用甲醇补足损失重量，摇匀，滤过，精密量取续滤溶液10 mL，回收溶剂，残渣加50%甲醇溶液，置5 mL容量瓶中，加盐酸1滴，用甲醇稀释至刻度，用微孔滤膜(0.45 μm)过滤，即得。③阴性对照溶液的制备：取不含盐酸麻黄碱的处方成分，按相同的方法制成无盐酸麻黄碱的阴性对照溶液，按“3.2.2”项下的方法制取，即得。色谱图见图4。

3.6.3 线性关系的考察 精密量取盐酸麻黄碱对照品10.0 mg，置50 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，各精密量取0.25、0.5、1.0、2.0、2.5 mL，分别加入25 mL量瓶中，加流动相至刻度，各量取10 μL，依次进样，按以上规定的色谱条件，以峰面积(Y)为纵坐标、进样量(X)为横坐标进行回归，回归方程：Y=6.92×106X-6.32×104(r=0.999 9)，在0.063 43～0.634 3 μg范围内呈良好的线性关系。

图4 咳喘宁糖浆色谱图

3.6.4 精密度试验 精密量取对照品溶液10 μL，重复进样6次，测定峰面积，盐酸麻黄碱的峰面积平均值为299 353，RSD为0.25%。

3.6.5 稳定性试验 取同一批供试品，按“3.6.2”项下的溶液制备方法，制备供试品溶液，分别精密量取10 μL，在上述规定的色谱条件下，在0、1、2、6、12 h测定，结果表明，供试品在12 h内稳定，RSD为0.36%。

3.6.6 重复性试验 取同一批样品，按“3.6.2”项下方法制备供试品溶液，依次测定6次，盐酸麻黄碱平均含量为3.957 5 mg/g，RSD为0.45%。

3.6.7 回收率试验 取同一批号的已知含量的样品9份，各约0.15 g，精密测定，分别准确加入一定量的盐酸麻黄碱对照品，按供试品溶液的制备方法制得供试液，按“3.6.1”项下色谱条件进样10 μL测定，结果显示，回收率为101.25%，RSD为0.51%，按照回收率公式计算。见表1。

3.6.8 样品含量测定 按照“3.6.2”项下方法，取3批样品，制成供试品溶液，各取10 μL，进样测定，计算3批样品的盐酸麻黄碱含量，结果见表2。

表1 回收率测定结果

表2 含量测定结果

4 临床疗效观察

4.1 临床资料 从我院收治的咳喘患者中选取研究对象260例，男109例，女151例，年龄18～60岁。参照中医药行业标准《中医病证诊断疗效标准》(ZY/T001.1-94)的相关规定，按照关于痰热犯肺以及风热咳喘辨证标准，将证候分为如下类型。①咳嗽兼喘型。寒偏重：外感风寒束卫犯肺；肺虚伤寒；久寒肺胃郁热；脾肺虚寒。热偏重：感寒化热；风热燥邪；百日咳者。②喘息兼咳型。寒偏重：轻浅者，低热气喘，咳声重，痰鸣；表解寒散，痰创仍甚；形寒痰盛喘咳面白手足不温，外寒，内有伏饮；脾虚气伤，虚实夹杂，喘咳反复不已。热偏重：起病急，高热灼津变生风痰，阻滞气道而喘满；若热之不高或退热后，痰浊壅滞仍甚，证见气急鼻翼煽动，指纹青粗；虚痰者气短似喘，面唇发白，或手足不温。

将260例患者随机分配至治疗组和对照组，每组130例。两组在性别、年龄、病史等方面差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。观察病症的发展、迁延、变化、痊愈情况，记录其他治疗措施及不良反应情况。

4.2 用药方法 治疗组：口服咳喘宁糖浆，30 mL/次，3次/d，重症者40 mL/次，4次/d，连续服用5～7 d。对照组：口服急支糖浆(太极集团重庆涪陵制药厂)，30 mL/次，3次/d，重症者40 mL/次，4次/d，连续服用5～7 d。在并发炎症感染时，两组均可以进行抗菌治疗，不联用其他止咳化痰药物。两种疗程均为7 d[6]。

4.3 疗效评定标准

4.3.1 中医疗效评价 依照中医咳喘辨证，诊断所有患者的外感内伤和证候虚实，疗效标准如下。痊愈：咳喘、咳痰及临床体征消失；有效：咳喘减轻，痰量减少；无效：症状无明显改变。以痊愈和有效计算总有效率。

4.3.2 血清ECP值、IgE值评价 血清ECP正常参考值<8，正常成人血清IgE为20～200 IU/mL。显效：血清ECP、IgE值恢复正常；有效：血清ECP、IgE值下降，但未恢复正常，或有1项恢复正常；无效：血清ECP、IgE值无明显变化或增高，或有1项增高。

4.3.3 肺功能评价 FEV1(第1秒用力呼气容积)，FVC(肺活量)。显效：FVC>80%，FEV1>70%；有效：FVC<80%，其他值正常，诊断限制性通气；无效：FVC <70%，FEV1<70%，诊断为阻塞性通气障碍。

5 结果

5.1 药物治疗情况 1个疗程后，治疗组总有效率高于对照组(P<0.05)。见表3。

5.2 血清ECP值、IgE值评定 治疗组在血清ECP、IgE改善方面的有效率明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表4。

表3 两组疗效比较(例)

注：与对照组比较，*P<0.01

表4 两组血清ECP、IgE改善的有效率比较(例)

注：*与对照组比较，P<0.01

5.3 肺功能的评定 治疗组肺功能的改善情况优于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表5。

表5 两组肺功能改善的有效率比较(例)

注：*与对照组比较，P<0.01

6 讨论

咳喘宁糖浆配方是根据辨病施治、辨证论治的方剂组成原则发展而来的。其中的麻黄发汗解表，宣肺平喘，利水消肿。鱼腥草清热解毒，排脓消痈，利尿通淋。杏仁祛痰止咳，平喘，润肠，下气开痹。石膏清热泻火，除烦止渴，收湿敛疮。甘草宣泄郁热，清肺平喘。川贝母清热润肺，散结消痈。四季青清热解毒，消肿祛瘀。紫宛润肺下气，消痰止咳。桔梗宣肺祛痰，利咽排脓。法半夏燥湿化痰。枇杷叶清肺止咳，降逆止呕[7]。纵观全方，具有很好的清热、宣肺、平喘、止咳化痰功效。

本文采用HPLC法对盐酸麻黄碱进行定量。盐酸麻黄碱在甲醇中的提取率比水中高，因此，选用甲醇提取样品，使得盐酸麻黄碱的谱峰与其他组分具有较好的分离。同时，分别考察了超声提取15、30、45 min对结果的影响，结果表明，超声提取30 min效果最好[8]。取样品、对照品溶液在200～300 nm处扫描，结果在218 nm处有最大吸收，而阴性对照品溶液在此处无吸收，因此，选择218 min为测定波长。

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Quality control and clinical efficacy of Kechuanning syrup

DONG Hui-zhen

(General Hospital of Yima Coal Group,Yima 472300,China)

Objective To prepare the Kechuanning syrup,set up the quality control standard,and observe the clinical effect.Methods Houttuynia,ephedra and licorice were identified by TLC.The content of ephedrine hydrochloride in Kechuanning syrup was determined by HPLC.Totally 260 cases of asthma patients were randomly divided into 2 groups,patients in treatment group (n=130)

Kechuanning syrup orally,while patients in control group (n=130) received acute bronchitis syrup orally.Results The total effective rate in treatment group was statistically higher than that of control group (96.8% vs. 73.5%,P<0.01).Conclusion The preparation technique is simple,and the quality is under control.The clinical efficacy of Kechuanning syrup prepared by the technique is good.

Kechuanning syrup;Preparation;Quality control;Clinical curative effect

2017-01-01

河南省义马市义煤集团总医院，河南 义马 472300

10.14053/j.cnki.ppcr.201708018