抗-HCV、HCV-RNA及丙氨酸氨基转移酶联合检测在丙型肝炎诊断中的价值

卢丰才，彭文晖

(济南市长清区人民医院 检验科，山东 济南250399)

抗-HCV、HCV-RNA及丙氨酸氨基转移酶联合检测在丙型肝炎诊断中的价值

卢丰才，彭文晖

(济南市长清区人民医院 检验科，山东 济南250399)

丙型肝炎是由于感染丙型肝炎病毒(hepatic C virus，HCV)所引起的肝脏损害，该病为传染病，主要通过血液和体液传播。据世界卫生组织(WHO)统计显示，全球感染HCV的患者约有1.7亿[1]，我国HCV感染率为3.2%，严重影响着人类的健康[2]。早期丙型肝炎的临床表现不十分典型，基本与乙型肝炎相类似，症状比较轻，难以早期发现。但是，与乙肝相比，丙型肝炎早期更加容易出现肝硬化，导致肝癌的发生，病死率也较高[3]。目前，临床上主要依靠检测抗丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)和丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)来诊断丙型肝炎，丙氨酸氨基转移酶(alanine amino acid trans-fer，ALT)也是反映肝脏损伤灵敏的指标之一。本研究探讨了联合检测血清HCV抗体、HCV-RNA以及ALT在早期诊断丙型肝炎中的临床应用价值，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2013年1月至 2016年6月到本院就诊的疑似丙型肝炎患者120例。其中男79例，女41例；年龄21-75岁，平均年龄(60.2±11.4)岁。所有患者均排除甲型肝炎、乙型肝炎以及戊型肝炎等其它类型的病毒性肝炎。

1.2 检测方法

1.2.1 血清HCV-RNA检测采用美国SLAN Real Time PCR Detection System7300荧光定量检测仪并应用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)检测HCV-RNA，试剂购自上海科华生物有限公司，阳性结果为HCV-RNA超过103IU/ml。

1.2.2 血清抗-HCV检测采用上海新波生物技术有限公司ANYTEST型时间分辨荧光分析仪并应用免疫荧光法检测抗-HCV，试剂为原装配套试剂，按照说明书进行操作。阳性为抗-HCV抗体为≧1PEIU/ml，反应性为0.04-1.0 PEIU/ml，阴性为0-1.0 PEIU/ml；如果检测结果为反应性，则再次进行检测，如果结果仍然为反应性，则按阳性结果计算。

1.2.3 肝功能生化指标ALT检测使用西门子Dimension RxL Max全自动生化分析仪采用双试剂速率法检测，试剂购自温州东瓯津玛生物科技有限公司。ALT超过50 U/L为异常。

1.3 统计学处理

2 结果

2.1 疑似HCV感染者血清HCV-RNA含量与抗-HCV及ALT检测结果关系

120例标本中HCV-RNA阳性者75例，阳性率为62.50%；抗-HCV阳性者91例，阳性率为75.83%；ALT异常者63例，异常率为52.50%，三者比较差异具有统计学意义(χ2=14.21，P<0.05)。

相关分析显示，HCV-RNA含量与抗-HCV阳性率及S/CO值均呈正相关(r=0.528，r=0.246，P均<0.001)；HCV-RNA含量与ALT异常率呈线性正相关(r=0.401，P<0.001)；而与ALT的活性值无明显相关(r=0.046，P=0.375)，详见表1。

表1 疑似HCV感染者血清HCV-RNA含量与抗-HCV及ALT检测结果关系

2.2 血清HCV-RNA、抗-HCV与ALT联合检测结果分析

抗-HCV(+)且HCV-RNA(+)者ALT异常率明显高于其他三组(P<0.05)。抗-HCV(+)且HCV-RNA(+)者ALT的活性值明显高于抗-HCV(-)且HCV-RNA(-)者、抗-HCV(+)而HCV-RNA(-)者(P<0.05)，但明显低于抗-HCV(-)而HCV-RNA(+)者(P<0.05)，详见表2。

表2 血清HCV-RNA、抗-HCV与ALT联合检测结果分析

3 讨论

HCV是导致人类发生丙型病毒性肝炎(简称丙肝)的病原体，当机体感染HCV后，仅有15%-25%的患者可以自动将病毒清除，绝大多数的患者将转为慢性肝病，进而发展为肝纤维化，部分患者甚至进展为肝癌，危及患者的生命[4，5]。因此，早期诊断和治疗丙肝可以延缓或终止病情的进展，改善患者的预后。目前，临床上诊断丙肝的指标主要包括抗-HCV，HCV-RNA以及肝功能相关指标的检测。关于HCV-RNA载量与抗-HCV定量以及生化指标ALT之间的相关性目前仍然存在着争议[6]，联合检测HCV感染患者血清中的HCV-RNA载量、抗-HCV以及ALT的活性的报道则更少。

在机体感染HCV 3-4周内，采用生物学检测方法可以检测到抗-HCV，但是，抗体检测存在着一些不足之处[7-9]，主要有以下几点：一是由于使用HCV基因重组抗原的质量以及各抗原片段包被的比例不同，各试剂生产厂家试剂的灵敏度和特异性也存在着一定的差异，导致结果出现差异性；二是HCV-Ab产生存在窗口期，大约为70 d左右，因此，即使是抗-HCV阴性也不能够排除携带HCV且具有传染性的可能；三是在检测抗-HCV的免疫荧光法试剂盒中，由于标记抗体是广谱的抗人IgG抗体，或单克隆抗体纯度不高等因素，因此，使得检测的特异性明显的降低。HCV RNA是HCV的核心成分，检测HCV RNA被认为是诊断HCV感染的“金标准”[10]。研究表明[11]，当机体感染HCV后，血液中HCV浓度约为102-108/ml，在感染后的第一周即可以在血液中检测到HCV-RNA。但是，由于感染后的病毒血症分为三种模式，即持续性、一过性和间隙性，因此，有时的检测结果可以是假阴性。另外，由于某些晚期肝病患者的病毒载量太低，导致无法检测出，也使得出现阴性的结果。因此，需要联合检测抗-HCV以及HCV-RNA，来有效的防止窗口期为产生抗体以及抗体产生后的长期存在，导致难以判断患者是近期感染还是既往感染的缺陷，还可以减少慢性丙肝患者HCV-RNA的间歇性出现导致的误差，避免漏诊和误诊[12]。感染HCV后，肝细胞受到严重的损害，存在于肝细胞的胞质中的ALT被释放入血中，导致血清ALT水平的升高。但是，单纯检测ALT也不能完全反映肝组织的损害程度，仍然有44%的HCV RNA阳性患者的ALT水平处于正常水平，但是，肝脏活组织检查结果却显示有明显的肝纤维化、肝硬化的病理改变[13，14]。

本次研究结果显示，随着HCV-RNA含量的增加，抗-HCV的阳性率也随之增加，且ALT的异常率也明显的升高，相关分析显示均呈正相关(P均<0.001)。说明丙肝患者抗-HCV的变化趋势以及肝细胞的损伤程度与HCV病毒载量的变化趋势均有着一定程度的同步性。但是，HCV-RNA阳性率(62.50%)低于抗-HCV的阳性率(75.83%)(P<0.05)，分析认为可能是由于丙型肝炎恢复期的患者，机体内HCV病毒的复制减少或消失，导致水平低于检测下限，但是抗-HCV仍然持续存在，而HCV-RNA的阳性率(62.50%)高于ALT的异常率(52.50%)(P<0.05)。目前的研究认为，HCV的发病机制不仅是由于HCV在肝细胞内复制，导致肝细胞受到严重的破坏，还有宿主自身免疫应答反应所引起的肝细胞炎症反应和损伤[15]。因此，ALT浓度变化还与患者个体差异、自身免疫功能以及肝细胞再生等因素有着密切的关系。在感染HCV的患者中，抗-HCV阳性且HCV-RNA阳性的患者最多，同时，患者的ALT异常率也最高，此种类型的受检者在临床上可以确诊为HCV感染；而抗-HCV阳性而HCV-RNA阴性的患者可能是由于虽然体内HCV-RNA已经被清除，但是抗-HCV仍然存在；抗-HCV阴性而HCV-RNA阳性的患者可能是因为患者处于急性丙肝感染的早期，抗-HCV处于窗口期，因此，ALT的异常率也最低。

综上所述，联合检测HCV患者血清中抗-HCV、HCV-RNA载量以及ALT活性浓度可以了解HCV在体内的复制状况以及肝脏的炎症状态，对提高丙肝的临床诊断率具有十分重要的临床意义。

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1007-4287(2017)08-1353-03

卢丰才(1962-)，男，山东省济南市人，本科，副主任医师，研究领域:医学检验。

2016-09-21)