不同剂量N—乙酰半胱氨酸对不同病期慢性阻塞性肺疾病患者氧化应激及炎性反应介质和免疫功能的影响

肖伟峰+苗虎+范元

[摘要] 目的 探討不同剂量N-乙酰半胱氨酸对不同病期慢性阻塞性肺疾病患者氧化应激及炎性反应介质和免疫功能的影响。方法 根据入选及排除标准分为急性加重期组与稳定期组，再依据住院尾号单双数分为大剂量组或常规治疗组。各组患者均不限制常规药物治疗。大剂量组（观察组）予NAC 600mg，3次/d，常规治疗组予NAC 600mg，2次/d，疗程8周。观察各组在应用N-乙酰半胱氨酸8周后氧化应激指标（MDA、SOD）和炎性介质（CRP、IL-6、IL-8）水平及T淋巴细胞亚群 CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+的变化。结果 在急性加重期与稳定期两组治疗后数据显示，SOD均较同组治疗前明显升高，与治疗前相比，MDA及各项血清炎性因子水平均明显降低，差异有统计学意义，且与对照组相比，观察组治疗后SOD水平显著增高，MDA与各项血清炎性因子水平均显著低于对照组治疗后（P<0.05）。与治疗前相比，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均明显升高，CD8+明显降低，差异有统计学意义；且与对照组相比，观察组治疗后的 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平明显增高，CD8+亦明显降低。结论 大剂量N-乙酰半胱氨酸在治疗COPD患者时增加机体抗氧化应激能力，减少炎性细胞因子及调节T淋巴细胞亚群水平，增强细胞免疫功能方面优于常规量治疗，且临床应用安全可靠。

[关键词] N-乙酰半胱氨酸；慢性阻塞性肺病；氧化应激；炎性介质；免疫功能

[中图分类号] R563 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2017）13-17-05

[Abstract] Objective To explore the influence of different doses of N- acetyl cysteine to oxidative stress and inflammatory response mediators and immune function of patients with chronic obstructive pulmonary disease at different stages of disease. Methods According to the inclusion and exclusion criteria， they were divided into two groups： acute exacerbation group and stable stage group. According to length of single and double tail number， they were divided into large dose group and conventional treatment group. Patients in each group were not restricted to conventional medication. Patients in large dose group（observation group） were treated with NAC600mg， 3 times per day， and the routine treatment group was given NAC600mg， 2 times per day， course of treatment 8W. The levels of oxidative stress（MDA， SOD） and inflammatory mediators （CRP， IL-6， IL-8） were measured after the application of N- N-acetylcysteine 8W and change of T lymphocyte subsets CD3+， CD4+， CD8+ and CD4+/CD8+ of each group were observed. Results In the acute exacerbation phase and the stable stage after treatment， the data showed that SOD was significantly higher than that of the same group before treatment， compared with before treatment， MDA and serum inflammatory factors were significantly lower， the difference was statistically significant， compared with the control group， the level of SOD in the observation group was significantly increased， the levels of MDA and serum inflammatory factors were significantly lower than those of the control group（P<0.05）. Compared with before treatment， CD3+， CD4+， CD4+/CD8+ after treatment were significantly increased， CD8+ were significantly decreased， the difference was statistically significant. And compared with the control group， CD3+， CD4+， CD4+/CD8+ of observation group were significantly increased， CD8+ were significantly decreased， the difference was statistically significant. Conclusion Large doses of N-acetylcysteine can increase antioxidant stress in patients with COPD， reduce inflammatory cytokines and regulate the level of T lymphocyte subsets. Enhancing cellular immune function is superior to routine dose therapy. And the clinical application is safe and reliable.

[Key words] N-acetyl cysteine； Chronic obstructive pulmonary disease； Oxidative stress； Inflammatory mediators； Immune function

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）是具有气道阻塞特征的慢性支气管炎和（或）肺气肿。其患病数多，而且，病程长、迁延不愈，嚴重降低患者的生活质量，给患者的工作和生活带来较大影响[1-2]。本项目拟探讨不同剂量N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine，NAC）对不同病期慢性阻塞性肺疾病患者的氧化应激及炎性反应介质，以及免疫功能的影响，并对其对比分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年8月～2016年12月期间我院呼吸内科及老年病科收治的207例COPD患者，均符合2013 年《慢性阻塞性肺疾病诊治指南（修订版）》中的相关标准，将其分为急性加重期组（咳嗽、咳痰等症状暂时性加重，痰量增多且呈脓性或黏液脓性，伴体温升高等炎症加重体征）与稳定期组（咳嗽、咳痰、气短等症状稳定或症状轻微），再依据住院尾号单双数分为大剂量治疗组（观察组）或常规治疗组（对照组）。急性加重期组共89例，其中观察组39例，男24例，女15例，年龄 53～81岁，平均（57.6±13.3）岁； 对照组50例，男27例，女23例，年龄 43～78岁，平均（58.4±14.2）岁；稳定期组共118例，其中观察组62例，男36例，女26例，年龄51～86岁，平均（56.4±11.4）岁； 对照组56例，男28例，女28例，年龄46～83岁，平均（57.3±12.3）岁。观察组与对照组患者一般资料比较，差异无统计学意义，具有可比性。排除其他慢性肺部疾病、严重心脑肝肾功能障碍、严重血液系统疾病、结缔组织病患者。所有诊断、治疗及分组方法均得到本院伦理委员会批准，并签署知情同意书。

1.2 方法

患者入院后均给予慢性阻塞性肺疾病常治疗，包括氧疗、吸入β2-受体激动剂和（或）胆碱能受体阻滞剂、营养支持及维持水电解质平衡等治疗，并根据病情及病原体检测结果给予有效抗菌药物治疗等。观察组口服N-乙酰半胱氨酸泡腾片（NAC浙江金华康恩贝生物制药有限公司，H20057334）600mg ，3次/日；对照组予NAC 600mg，2次/d，温开水冲服。疗程8周。

1.3 观察指标

观察各组在应用N-乙酰半胱氨酸前后氧化应激指标（MDA、SOD）和炎性介质（CRP、IL-6、IL-8）水平及T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/ CD8+的变化。

1.4 检测方法

于患者入院次日及治疗后第8周，清晨空腹抽取静脉血液，离心、分离血清，-70℃冰箱保存备用。分别利用黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸比色法、酶联免疫吸附法（ELISA），检测超氧化物岐化酶（SOD）水平、血浆丙二醛（MDA）含量，以及白介素-6（IL-6）、白介素-8（IL-8）等炎性因子水平，另外利用免疫比浊法，检测超敏C反应蛋白（hs-CRP）水平；借助流式细胞仪，检测T淋巴细胞亚群 CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+的表达情况；

1.5 统计学方法

采用SPSS18.0统计软件，计量资料以（）表示，组间及组内分析均采用t检验，以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组治疗前后氧化应激指标及血清炎性因子水平对比分析

本研究结果显示，在急性加重期与稳定期两组中，其观察组与对照组在患者治疗前 MDA、SOD等氧化应激指标和IL-6、IL-8、CRP等血清炎性因子水平相比较均不存在显著性差异（P>0.05）。而治疗后数据显示，SOD均较同组治疗前明显升高，MDA与各项血清炎性因子水平均较同组治疗前明显降低，差异有统计学意义，且与对照组相比，观察组治疗后SOD水平明显增高，MDA与各项血清炎性因子水平均显著低于对照组治疗后（P<0.05）。显示大剂量应用效果明显优于常规治疗剂量。见表1、2。

2.2 治疗前后T淋巴细胞亚群变化比较

本研究结果显示，在急性加重期与稳定期两组中，其观察组与对照组在患者治疗前 CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/ CD8+等免疫指标相比较均不存在显著性差异（P>0.05）。而治疗后数据显示，与治疗前相比，治疗后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均明显增高，而CD8+水平却明显降低，差异有统计学意义，且与对照组相比，观察组治疗后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均明显增高，而CD8+亦显著降低，差异有统计学意义。显示大剂量NAC临床应用在免疫调节方面优于常规剂量使用。见表3、4。

2.3 治疗期间不良反应

在急性加重期间，观察组有2例退出实验（1例胃部不适、1例失访），而在稳定期期间，对照组有2例退出实验（2例均为失访）。显示，大剂量NAC临床应用是安全的。

3 讨论

慢性阻塞性肺疾病（COPD）是一种常见的呼吸系统疾病，目前，对其发病机制还不是很清楚，在其发生发展中，氧化机制同炎症机制一样起着重要的作用，因而在COPD发病的病理生理机制研究中，氧化/抗氧化失衡及其针对性的临床干预方面得到普遍关注[3-4]。也有文献称，COPD 产生、进展与肺实质和气道中T 淋巴细胞的异常浸润有关[5]，CD3+、CD4+表达降低可能是诱发老年 COPD患者免疫功能紊乱的主要因素， 其降低程度与疾病严重程度呈正比[6]。CD8+过度表达也会对机体免疫功能产生一定损伤[7]。

有研究发现[8]，像NAC的含巯基类药物，能够溶解痰液、较强抗氧化、细胞保护等多种临床作用，而近来还被证实[9]，NAC能有效抑制COPD 患者IL-8及TNF-α的合成及表达水平，大幅提高老年肺炎患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+T细胞水平，从而发挥一定的免疫调节功能[10]，通过清除自由基、增高总超氧化物歧化酶的活性[11]，增加抗氧化能力，但是，体内缺乏抗氧化剂往往会导致机体出现严重的免疫系统功能障碍，可能引发严重感染，这也是老年 COPD 患者致死的主要原因[12]。

現代药理学研究表明[13]，口服NAC 600mg ，一日一次，服用1.5h后，机体血浆半胱氨酸浓度会逐渐升高，而在服用4h后，基本恢复至基线，同时，谷胱甘肽（GSH）浓度也出现较大波动，其间接抗氧化作用是通过作为谷胱甘肽（GSH）的前体来实现的[14]。而口服 NAC 600mg，一日3次，服用12h内，机体血浆GSH浓度逐渐升高，并在服用5d后浓度维持恒定，因此，小剂量NAC可能不能较好地发挥抗氧化作用。

本研究结果显示，使用大剂量NAC治疗后，在急性加重期与稳定期两组中，其观察组与对照组SOD均较同组治疗前明显升高，MDA与各项血清炎性因子水平均较同组治疗前明显降低，差异有统计学意义，且与对照组相比，观察组治疗后SOD水平明显增高，MDA与各项血清炎性因子水平均显著低于对照组治疗后（P<0.05）。结果表明大剂量应用效果明显优于常规治疗剂量，而且，氧化应激及细胞炎性因子作为细胞因子网络中的重要成员，一定程度上反映机体系统性炎症及氧化/抗氧化水平，而治疗后氧化应激及细胞炎性因子水平的降低，表明N-乙酰半胱氨酸治疗从根本上解决了慢性阻塞性肺疾病的发病原因，达到了标本兼治的临床效果[15]。

本研究结果还显示，经过 NAC 的干预，在急性加重期与稳定期两组中，细胞因子CD8+的含量均明显降低， 而 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均明显增高， 表明NAC 可抑制介导炎症因子活性调节的T 淋巴细胞亚群功能，而大剂量NAC治疗后患者的 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+显著高于常规剂量治疗组，CD8+亦显著低于常规剂量治疗组（P<0.05）。结果表明大剂量NAC临床应用在免疫调节方面优于常规剂量使用，并且，大剂量NAC治疗可能通过干扰慢性阻塞性肺疾病中介导炎性反应细胞因子的活性调节T淋巴细胞亚群功能，发挥临床治疗作用。

本研究结果亦显示，NAC大剂量临床应用是安全的，与常规剂量无明显差异。结果表明N-乙酰半胱氨酸治疗不同病期慢性阻塞性肺疾病，具有较高的治疗安全性，值得临床广泛推广。

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（收稿日期：2017-04-10）