育胎灵煎剂对脾肾亏虚型习惯性流产患者细胞因子的影响

胡晓华，冯 玉，陈 影，王娅丽，李艳青

(河南省中医院，郑州 450002)

【方药研究】

育胎灵煎剂对脾肾亏虚型习惯性流产患者细胞因子的影响

胡晓华，冯 玉，陈 影，王娅丽，李艳青△

(河南省中医院，郑州 450002)

目的：探讨育胎灵煎剂对脾肾亏虚型习惯性流产患者免疫功能的调节作用。方法：将符合纳入标准的60例患者按随机数字表法分为治疗组30例给予育胎灵煎剂，对照组30例给予孕康口服液，于治疗前后采用酶联免疫分析法检测血清中白细胞介素-2(IL-2)、 白细胞介素-4(IL-4)、 白细胞介素-12(I L-12)、白细胞介素-10(IL-10)水平。结果：治疗组及对照组各自与治疗前比较差异无统计学意义，具有可比性；治疗组与对照组治疗后比较治疗组优于对照组，差异有统计学意义。结论：育胎灵煎剂具有调节母体免疫功能、提高母胎免疫耐受，从而起到维持妊娠的作用。

习惯性流产； 育胎灵煎剂； 细胞因子； 中医药疗法

习惯性流产(habitual abortion,HA)属于中医“滑胎”范畴，占妊娠总数的10%～15%，其中早期流产占80%以上[1]。其病因较为复杂，严重影响妇女的身心健康，故对本病的研究已成为当今医学界的热门课题，对其防治也具有非常重要的现实意义。本研究选择60例HA患者，以检测治疗组和对照组治疗前后细胞因子IL-2、IL-4、IL-12、IL-10水平为指标，探讨育胎灵煎剂治疗HA的作用机理和优化治疗方案，让更多的患者减少痛苦。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2012年3月至2014年3月门诊就诊HA患者60例，按随机数字表法分为治疗组和对照组。治疗组30例中年龄最小23岁，最大35岁，平均年龄(29.57±2.98)岁；对照组30例中年龄最小24岁，最大35岁，平均年龄(29.07±3.2)岁；治疗组流产胎次最多6次，对照组流产胎次最多5次；2组在年龄构成、流产次数及治疗前血清中IL-2和IL-4含量、IL-12、IL-10含量等方面比较差异无统计学意义(P>0.05)，且治疗期间2组用药时间比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 诊断标准

1.2.1 西医诊断标准 依据《最新国内外疾病诊疗标准》及高等院校全国规划教材《妇产科学》[1]拟定诊断标准：育龄期妇女，3次或3次以上自然流产史发生在妊娠12周以内者；有停经史，尿妊娠试验阳性，B超检查孕囊或胚胎发育与孕周相符；排除遗传、感染因素及生殖器官解剖异常。

1.2.2 中医辨证标准 参照《中医病证诊断疗效标准》[2]及《中医妇科学》[3]修订，符合脾肾亏虚辨证标准。主症：曾有滑胎病史，孕后腰痛腹坠，舌淡苔白、脉沉而少力；兼症：阴道下血或畏寒或四末欠温或头晕耳鸣或小便频数。以上证候主症必备，另应具备次症1项或以上即可诊断。

1.3 纳入标准

符合上述西医诊断及中医脾肾亏虚辨证标准者；年龄在23～35岁；孕周≤12周；患者知情同意且易于随访。

1.4 排除标准

有遗传、内分泌、感染、生殖器官解剖异常等；有呼吸、消化、神经、心血管等系统的慢性疾患者；不符合纳入标准者。

1.5 治疗方法

治疗组育胎灵煎剂组成：菟丝子、桑寄生、党参、黄芪、白术、山药、杜仲、黄芩、砂仁、苏梗、旱莲草、仙鹤草、炙甘草，由河南省中医院制剂室制备，每袋200 ml，每次1袋，每日2次。对照组孕康口服液由浙江亚东制药有限公司生产(批号国药准字Z10970068)，每日3次，每次2支，服药时间均自妊娠第6周确诊为宫内孕开始至妊娠12周结束。

1.6 疗效判断标准

根据《中药新药临床研究指导原则》[4]制定。痊愈：妊娠超过12周，阴道出血停止，小腹疼痛及腰酸胀痛等症状消失，B超检查子宫大小、胚胎发育与孕周相符，各项检查证实为正常妊娠；有效：妊娠超过12周，阴道出血、小腹疼痛及腰酸胀痛等症状均改善，B超检查子宫大小、胚胎发育与孕周相符，各项检查证实为正常妊娠；无效：阴道出血或阴道出血增多，小腹疼痛及腰酸胀痛等症状无减轻或加重，B超检查子宫大小与孕周基本相符或小于孕周，胚胎发育不良或停止发育，再次流产。

1.7 观察指标

用酶联免疫分析法(ELISA)检测用药前后2组患者血清中细胞因子IL-2和IL-4、IL-12及IL-10水平的变化。实验设备使用帝肯InfiniteF50酶标仪，试剂由上海裕臣生物科技有限公司提供,测定过程均严格按照设备及试剂盒使用说明书操作。

1.8 统计学方法

2 结果

2.1 2组病例治疗后临床疗效比较

表1显示，治疗组疗效优于对照组，经检验，U=2.558，P=0.01<0.05，差异有统计学意义。

表1 2组病例临床疗效比较[例(%)]

注：2组病例治疗后临床疗效采用Ridit检验

2.2 2组治疗前后血清IL-2和IL-4含量比较

表2显示，治疗组与对照组治疗前IL-2与IL-4在比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。治疗后IL-2水平均小于治疗前(P<0.05)，治疗组下降水平优于对照组P<0.05。用药后IL-4水平相对于治疗前均有所增高且具有统计学意义(P<0.05)，与对照组治疗后血清中IL-4含量相比较，治疗组增高IL-4含量水平高于对照组P<0.05。

组 别例数IL-2(ng/l)IL-4(ng/l)治疗前治疗后治疗前治疗后治疗组30123.30±15.5753.90±3.02★△38.63±11.7383.27±10.96★△对照组30120.63±18.2860.80±9.88★35.03±11.9470.20±18.41★

注：与治疗前比较：★P<0.05，与对照组比较：△P<0.05

2.3 2组治疗前后血清IL-12和IL-10比较

表3显示，IL-12与IL-10在治疗前治疗组与对照组2组比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。治疗后IL-12水平均小于治疗前(P<0.05)，治疗组下降水平优于对照组(P<0.05)。用药后IL-10水平相对于治疗前均有所增高，且差异有统计学意义(P<0.05)，与对照组治疗后血清中IL-10含量比较，治疗组IL-10含量水平高于对照组(P<0.05)。

组 别例数IL-12(ng/l)IL-10(ng/l)治疗前治疗后治疗前治疗后治疗组30113.29±42.7157.27±15.32▲*115.23±48.64195.77±50.33▲*对照组30111.93±44.9692.37±19.66▲123.13±47.30145.77±31.55▲

注：与治疗前比较：▲P<0.05，与对照组比较：*P<0.05

3 讨论

随着现代医学的迅速发展，越来越多的研究发现，HA发病与免疫因素有着较为密切的关系。正常妊娠时母体的免疫系统通过复杂而精细的免疫机制调节而常常处于免疫耐受状态，胚胎才会被保护而不至于被母体的免疫系统所排斥。假若孕妇对胚胎半同种抗原识别能力和反应性降低，母体将无法产生适当的封闭抗体以及保护性抗体，则将会使胚胎遭受免疫攻击而流产。有学者[5]通过比较正常妊娠与HA孕妇发现，辅助性T细胞1型/2型(TH1/TH2型)细胞因子失衡决定妊娠结局。TH1细胞主要分泌IL-2、IL-12、干扰素7(IFN-7)、肿瘤坏死因子α、β (TNF-α、TNF-β)等，主要介导细胞免疫，表现为免疫杀伤作用，对滋养层细胞产生排斥反应引起流产；TH2细胞主要分泌IL-4、IL-10等，主要介导体液免疫并抑制细胞免疫，帮助同种异体胎儿不受母体排斥，表现为免疫保护作用。而IL-2和IL-4、IL-12和IL-10分别在介导TH1和TH2的分化中起主要作用。

目前众多研究表明，补肾健脾中药能调节内分泌免疫等多个系统功能，临床疗效较好，且对子代发育、智力、遗传无不良影响。但众多文献报道多为临床疗效总结[6-8]，较少从细胞分子生物学水平研究补肾健脾方药治疗本病的机制。笔者通过多年临床经验认为，本病的病因与正气虚弱有关，尤其与肾脾的关系最为密切，提出脾肾亏虚是本病的主要机理。肾气盛、脾气旺则胞宫有所养，冲任有所主；肾气衰、脾气虚则胎元不固。故安胎重在补肾以固胎元，是以固摄之法使之行使其封藏之功；健脾使气血化生充足，得以充养先天肾气，肾气足则冲任固，冲任固则胎儿无陨坠之虞。故治疗以补肾健脾立法以达到安胎的目的，总结出经验方育胎灵煎剂，以菟丝子、桑寄生作为君药，以达补肾安胎之功；以党参、白术、黄芪、山药、杜仲作为臣药，以奏健脾补肾之效；黄芩、砂仁、苏梗配合旱莲草、仙鹤草共为佐药，以清热和胃、滋阴止血、理气安胎；甘草清热解毒，调和诸药为使药。诸药合用，使肾气充则胎有所固，脾气健则胎有所养。经临床疗效比较，治疗组疗效优于对照组，差异有统计学意义。

本研究通过比较治疗前后患者细胞因子水平的变化，发现HA患者经育胎灵煎剂治疗后，IL-2、IL-12含量明显下降，治疗组下降水平优于对照组；而IL-4、IL-10含量明显上升，治疗组高于对照组。表明育胎灵煎剂通过补肾健脾、清热安胎达到调节母体免疫功能，抑制TH1型分化，同时诱导TH2型分化，促使TH1/TH2型细胞因子的平衡向TH2转换，增强母体对胚胎的免疫保护能力，提高母胎免疫耐受，从而起到维持妊娠的作用。该研究为中医药治疗习惯性流产的有效性提供了科学的理论依据，进一步验证和充实了中医妇科“肾主生殖”理论。

[1] 乐杰.妇产科学[M].7版.北京:人民卫生出版社,2008:83.

[2] 国家中医药管理局.中医病证诊断疗效标准[M].北京:中国医药科技出版社,2012:243.

[3] 张玉珍.中医妇科学[M].2版.北京:中国中医药出版社,2007:218.

[4] 郑筱萸.中药新药临床研究指导原则[M].北京:中国医药科技出版社,2002：253.

[5] M MAKHSEED,R RAGHUPATHY. Fazizih.Th1 and Th2cytokine profiles in ecurrent'aborters with successful pregnancy with subsequent abortions[J].Human Reproduetion,2001,16(10):2219-2226.

[6] 吴昕，周艳艳，申小静，等.小剂量阿司匹林联合固肾健脾法治疗不明原因习惯性流产[J].中国中医基础医学杂志，2009,15(9)：715.

[7] 谢京红，李海玉，张瑶，等.蔡连香治疗复发性流产的思路和经验[J].中国中医基础医学杂志，2014,20(12)：1647-1648.

[8] 文乐兮，尤昭玲.尤昭玲中医安胎思路的构想与实践[J].中国中医基础医学杂志，2015,21(4)：398-399.

The Effects of Cytokines in Patients with Habitual Abortion on Deficiency of Spleen and Kidney by Taken Yu-Tai-Ling Decoction

HU Xiao-hua, FENG Yu, CHEN Ying, WANG Ya-li, LI Yan-qing△

(HenanprovincialhospitalofTCM,Zhengzhou450002,China)

objective: Inquiry into the Yu-Tai-Ling decoction on immune function of spleen and kidney deficiency type patients with habitual abortion regulation. Method: Patients met the inclusion criteria of 60 cases, randomly divided into two groups of 30 cases of Yu-Tai-Ling decoction, 30 cases in the control group given pregnancy Kang oral liquid, before and after treatment with enzyme-linked immunosorbent assay method for detection of serum in the white cell between interleukin-2 (IL-2), and white cell between interleukin-4 (IL-4), and white cell between interleukin-12 (IL-12), and white cell between interleukin-10 (IL-10) level. Results: The treatment group and the control group compared with before treatment, no significant differences in comparability of treatment group compared with the control group after the treatment, treatment group than the control group, with significant differences. Conclusion: Yu-Tai-Ling decoction in regulating the mother, fetal immune function, improving maternal-fetal immuno-tolerance, which play a role in maintaining the pregnancy.

Recurrent abortion; Yu-Tai-Ling decoction; Cytokines; traditional Chinese medicine therapy

河南省科技厅科技攻关项目(112102310315 )

胡晓华(1956-)，女，河南范县人，主任医师，医学学士，从事生殖医学研究。

△通讯作者：李艳青(1973-)，女，河南南阳人，副主任医师，医学硕士，从事生殖内分泌研究，Tel:0371-60908737,E-mail:lyq3849@163.com。

R714.21

B

1006-3250(2017)04-0674-02

2016-08-24