畜禽产品中肠出血性大肠杆菌O157：H7的检测

2017-08-09黄梅清蔡羲郑敏吴南洋

福建畜牧兽医 2017年4期

关键词：增菌肉汤屠宰场

黄梅清蔡羲郑敏吴南洋＊

（1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所福州350013；2.福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心福州350013）

畜禽产品中肠出血性大肠杆菌O157：H7的检测

黄梅清1，2蔡羲1，2郑敏1，2吴南洋1，2＊

（1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所福州350013；2.福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心福州350013）

为了解大肠杆菌O157：H7在畜禽产品中的带菌情况，采集2个屠宰场、福州市部分超市及农贸市场上的畜禽产品（猪肉、禽肉、蛋、内脏）631份。采集的样品经改良EC新生霉素增菌肉汤增菌后，增菌液用快速检测试纸条和酶联免疫反应测试盒进行检测；菌液涂抹于山梨醇麦康凯琼脂平板和大肠杆菌O157显色培养基平板，选取可疑菌落用乳胶凝集试剂盒进行检测，结果均未检出大肠杆菌O157:H7。

大肠杆菌O157：H7动物产品检测分析

大肠杆菌O157：H7是肠出血性大肠杆菌（Enterohem-orrhagic Escherichia coli，EHEHC）的一个主要菌型，是一种新型肠道致病菌[1]。大肠杆菌O157：H7是目前世界公认的引起食源性疾病的重要致病菌和人兽共患病病原微生物，主要通过食物及饮食、肉及肉制品传播。由于O157：H7大肠杆菌寄生在牛、猪、鸡等动物肠道内，因此，随粪便排出体外后引起周围环境及食物的污染。为了调查福州和漳州地区部分屠宰场、超市及农贸市场上畜禽产品（猪肉、禽肉、蛋、内脏）O157：H7的污染情况，共采集631份样品并进行检测，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 菌株大肠杆菌O157标准菌（菌种编号：NCTC12900），6株大肠杆菌菌株保存于本实验室。

1.2 试剂大肠杆菌O157：H7酶联免疫反应测试盒、快速检测试纸条购自美国REAGEN，大肠杆菌O157：H7乳胶凝集试剂盒购自英国Microgen。改良EC新生霉素增菌肉汤、山梨醇麦康凯琼脂平板、大肠杆菌O157显色培养基平板均购自广东环凯微生物科技有限公司。

1.3 仪器上海精宏隔水式恒温培养箱（型号GNP-9080），上海一恒恒温培养摇床（型号THZ-300）。

1.4 样品采集从屠宰场、超市、农贸市场等地方采集631份样品，包括383份猪肉及猪内脏样品、128份鸭肉及鸭内脏样品、120份蛋样品。采样地点及数量如下：从福州永辉超市、农贸市场采集样品270份（120份猪肉样、30份鸭肉样、120个蛋样）；从福州生猪屠宰场采集样品106份（猪胴体体表棉拭子70份、内脏表面棉拭子16份、肉样20份）；从漳州生猪屠宰场（漳州祥泰食品有限公司）采集样品157份（猪胴体体表棉拭子85份、肉样72份）；从漳州昌盛食品有限公司采集肉鸭体表及内脏棉拭子98份。

1.5 样品的处理无菌操作取样品25 g加入225 mL改良EC新生霉素增菌肉汤中（采集的体表棉拭子直接放入改良EC新生霉素增菌肉汤中进行增菌），37℃培养20 h。取增菌后的肉汤划线于山梨醇麦康凯琼脂平板和大肠杆菌O157显色培养基平板。

1.6 检测方法将订购的试剂盒对目前分离保存的6株大肠杆菌及O157：H7标准菌株按照试剂盒的说明书进行检测。

2 结果与分析

2.1 检测方法将订购的试剂盒对实验室分离保存的6株大肠杆菌及O157：H7标准菌株进行检测，用乳胶凝集试剂盒对可疑菌落进行检测，用快速检测试纸条和酶联免疫反应测试盒对临床肉、蛋样进行检测。各检测试剂盒的检测特点与检测结果见表1。由表1可见，本次调查选用的检测方法与试剂是可靠的。

2.2 样品的检测采集的631份样品经改良EC新生霉素增菌肉汤增菌后，增菌液用快速检测试纸条进行检测，同时菌液涂抹于山梨醇麦康凯琼脂平板和大肠杆菌O157显色培养基，选取可疑菌落用乳胶凝集试剂盒进行检测，结果均未检出大肠杆菌O157:H7。

2.3 结果分析大肠杆菌O157：H7是重要的食源性病原微生物，感染后会严重危害人体健康，甚至危及生命。畜禽产品在屠宰加工、储存过程中都不同程度受到污染，在广东东莞畜禽肉制品（冻肉）中大肠杆菌O157：H7检出率，鸡肉为25.93%、猪肉为11.76%、鸭肉为30.95%、羊肉为15.38%、牛肉为12.5%，采自屠宰场的1 868份猪肝中，阳性检出率达23.61%[2]。青海省部分地区市售的352份羊肉、464份牛肉中各检出O157：H7阳性1份[3]，江苏省建湖地区50份肉制品中检出1份阳性[4]，还有许多其他地区检出阳性的报道。但是，也有阳性检出率为0的报道，2005年广东地区从各地屠宰场和肉菜市场采集的样品中未检测出大肠杆菌O157：H7[5]，可见大肠杆菌O157：H7检出与否与地区无关、与季节无关、与年份无关，主要与动物产品在屠宰、运输、储存过程中是否污染病原菌有关。本次试验未从采集的样本中检出阳性，表明福州地区屠宰场、超市、农贸市场及漳州地区屠宰场的卫生环境、屠宰运输过程较规范，动物产品并未污染大肠杆菌O157：H7。但是，由于该病原的高致病性，仍要加强畜禽产品加工、运输、销售过程的卫生监管以及加强对宿主动物粪便的无害化处理监管，防止带菌动物粪便污染以及动物产品与其他食物之间的交叉污染，减少由此引起的食源性疾病暴发。

[1]Riley L W,Remis R S,Helgerson S D,et al.Hemorrhagic colitis associated with a rare Escherichia coli serotype.[J]. New England Journal of Medicine,1983,308(12):681-685.

[2]洪伟彬,李永福,张险朋,等.广东东莞畜禽肉制品大肠杆菌O157:H7和沙门菌监测结果分析[J].中国兽医杂志,2013, 49(9):69-71.

[3]王晓红,应兰,李增魁.牛羊肉中肠出血性大肠杆菌O157∶H7的检测[J].安徽农业科学,2012,40(32):15719-15721.

[4]朱根忠,吴芹.江苏省建湖地区肠出血性大肠杆菌O157: H7监测分析[J].徐州医学院学报,2009,29(6):394-395.

[5]朱文冠,薛素强,胥楚雄,等.广东地区大肠杆菌O157∶H7的分离与鉴定[J].中国人兽共患病学报,2005,21(2):147-149.

Detection of Escherchia coli O157:H7 from animal products

Huang Meiqing1,2Zheng Min1,2Cai Xi1,2Wu Nanyang1,2*
（1.Institnte of Animal Husbandry and Veterinary Medicine,Fujian Academy of Agricultural Sciences,Fuzhou 350013; 2.Fujian Animal Diseases Control Technology Development Center,Fuzhou 350013）

To detect the Escherchia coli O157:H7 from animal products,six hundred and thirty-one animal products were collected from slaughterhouse,supermarket and farmers market in Fuzhou city.The collected samples were cultured in modified EC neonatal broth,at 37℃for 20 hours,and the enriched cultures were cultivated on Sorbitol Maconkey Agar Plate and Escherichia coli O157 chromogenic medium plate.The cultures were detected by rapid test strip and ELISA kits.Escherichia coli O157:H7 was not detected from those animal products.

Escherchia coli O157:H7 Animal products Detection Analysis