改良负压吸引器连接管在辅助生殖技术取卵术中的应用

黄秀丽 甄锦壮 林 冰

改良负压吸引器连接管在辅助生殖技术取卵术中的应用

黄秀丽 甄锦壮 林 冰

目的：探讨改良负压吸引器连接管在不孕症患者接受辅助生殖技术治疗后行取卵手术中的应用效果。方法:随机选择2016年1月～2017年1月在我院生殖中心行体外受精-胚胎移植的不孕症患者82例, 将其随机分为对照组40例和观察组42例，对照组患者在行体外受精-胚胎移植技术治疗取卵时穿刺卵泡抽吸卵泡液进行采集卵细胞操作过程中，以消毒硅化胶管及玻璃接头为负压泵连接管连接取卵针与负压吸引器，观察组患者在行体外受精-胚胎移植技术治疗取卵时穿刺卵泡抽吸卵泡液进行采集卵细胞操作过程中，以经改良后的输液器软管连接取卵针与负压吸引器，比较两组的穿刺卵泡数、卵子数、获卵率、受精率、可利用胚胎数。结果:观察组患者获卵率高于对照组(P<0.05)，两组的卵泡数、卵子数、受精率、可利用胚胎数差异无统计学意义(P>0.05)。结论:采用改良输液器软管连接采集卵泡可提高获卵率，增加卵子数量，从而提高患者可利用胚胎数量。

不孕症；辅助生殖技术；改良负压吸引管

现代人由于各种原因推迟妊娠计划导致不孕不育的发病率呈现逐年增高的趋势[1]，高龄是发生不孕不育的原因之一，另外不孕不育还受环境、自身压力、药物滥用等因素的影响，发病率也呈逐年上升趋势，借助辅助生殖技术特别是体外受精治疗的不孕患者也越来越多。目前人类ART主要包括宫内受精、体外受精-胚胎移植、人工授精、卵子体外成熟、卵胞浆单精子注射、卵子、精子以及胚胎冻融技术、移植前遗传学诊断等[2]。患者的治疗目的就是获得临床妊娠、生育健康后代，要达到这一目的的前提是获得优质的卵子，提高受精率，最终获得更多的优质胚胎，但在临床的用药、取卵手术、胚胎培养-移植等多个环节都可能影响到卵子、胚胎的质量，其中取卵术是体外受精-胚胎移植技术治疗中在体外操作的第一步，取卵时所用到的设备是由取卵针、负压吸引器及两者间的负压泵连接管、一次性无菌试管组成，手术时保持管道的通道及负压的稳定性至关重要。在本研究中，我们通过对在取卵手术中取卵针与负压吸引器之间使用不同连接管连接，比较两组患者的穿刺卵泡数、卵子数、获卵率、受精率、可利用胚胎数，探讨如何使用合适的负压吸引器连接管以改善临床预期效果。现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 随机选择2016年1月～2017年1月在我院生殖中心行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的不孕症患者82例, 年龄≤35岁，获卵数4～20个。将患者随机等分为对照组40例和观察组42例，对照组平均年龄(30.2±2.9)岁；观察组平均年龄(29.9±3.2)岁。两组患者病因、年龄、体重、不孕年限、Gn用量及天数等一般临床资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法 对不孕患者进入周期治疗后，进行常规的术前宣教、指导饮食、按医嘱合理使用促排卵药物，定期进行B超监测卵泡发育情况，并定期抽血检测性激素水平，及时调整患者的用药剂量。当优势卵泡长到17～20 mm≥3个时，根据医嘱予阴道冲洗，20∶00～23∶00肌内注射HCG 4000～10 000 U，并于注射药物35～39 h后在静脉麻醉下经阴道B超引导下行取卵术。手术前1 d晚上嘱患者22∶00后开始禁食禁饮至取卵手术结束。手术日生殖中心护士对夫妻双方进行身份审核(双方身份证及结婚证、指纹),予以佩带手腕带、留置静脉留置针、用温生理盐水1000～1500 ml冲洗阴道，嘱患者排空膀胱，取截石位，为患者联接好心电监护仪，予面罩低流量吸氧，四肢系好约束带。术者再为患者行阴道冲洗1次，穿上灭菌手术衣及无菌手套后予常规铺巾；护士术前开启B超机并调至阴道超声界面，调出穿刺线；恒温试管架开启电源进行预热，护士穿戴灭菌手术衣及手套后，给恒温试管架铺无菌孔巾，将一次性无菌试管放到恒温试管架上进行预热，借助负压泵连接管将负压瓶、BD无菌试管、取卵针连接完毕后启动负压吸引器，用取卵针试吸3 ml的培养液进行冲洗取卵针通路并调试负压(负压维持在100～120 mmHg)；阴道B超探头套上订做的无菌无油取卵专用避孕套，联接线套上灭菌的布套，以防术中污染手术区域，将穿刺架接到B超探头上，借助阴道B超找准穿刺点，取卵针经过穿刺架刺入卵泡内并启动负压抽吸，将卵泡液吸入连接好的一次性无菌14 ml试管内，并迅速传给实验室人员进行观察捡卵、培养。术中护士必须密切观察负压吸引器与取卵针、无菌试管联接的是否紧密，负压是否在正常范围内；同时严防盛装卵泡液的试管装的卵泡液过满而发生卵泡液溢出或返流到负压泵联接管内而影响获卵数。术中应密切观察患者的生命体征，配合麻醉师做好患者的体位管理，以防术中乱动。术后医师予阴道填塞纱条，以压迫穿刺点防止发生穿刺点渗血。术毕用车床运送患者到休息室休息，途中车床必须上好防护栏以防患者跌倒。在休息室卧床休息1～2 h并实时进行生命体征的监测，告知患者取卵术后的注意事项，如出现轻微下腹不适或拔除阴道纱条后出现少许阴道出血是属于正常现象；当出现阴道出血增多、下腹剧烈疼痛、排出的尿液呈血性尿时，必须及时找医师看诊；获卵数多者存在发生OHSS的风险，刘风华等[3]认为注意休息(但避免绝对卧床)，进易消化饮食，避免剧烈活动或性生活以预防黄体破裂或卵巢蒂扭转。取卵的同时护士安排患者丈夫取精，如有取精困难的可在女方取卵前一段时间先行取精并及时冷冻，为了在取卵日不能成功进行取精时备用。对照组是以消毒硅化胶管及玻璃接头为负压泵连接管连接取卵针、无菌试管及负压吸引器；观察组是以一次性输液器经改良成负压泵连接管，把一次性输液器药物过滤器拧开后与取卵针活塞接口连接并接上无菌试管，留取足够长的一部分软管用消毒剪将输液管的剩余部分剪掉，然后接上负压瓶。分别将两组患者获取的卵子进行常规体外受精培养，记录穿刺卵泡数、卵子数、获卵率、受精率、可利用胚胎数。

1.3 统计学处理 采用SPSS 11.0统计学软件，计量资料比较采用t检验，检验水准α=0.05。

2 结 果(表1)

表1 两组患者获卵数、受精率、可利用胚胎数等情况比较

3 讨 论

体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期通常进行人工超促排卵，其目的是为了刺激多个始基卵泡同步发育来获取较多优质卵细胞，以便获得优质胚胎来选择移植，最终提高临床妊娠率，然而精子与卵细胞结合形成受精卵、发育成胚胎的过程非常复杂，任何一个环节都会影响最终结果[4]。取卵术是体外受精-胚胎移植技术治疗中在体外操作的第一步，是在B超的引导下经阴道从卵巢组织中吸取成熟的卵母细胞，是卵母细胞离开人体到实验室培养箱培养的中间环节，由于手术时间长，卵母细胞容易受各种因素影响，可能改变卵母细胞生理功能，取卵过程除了受操作者熟练程度的影响外，还受整个取卵通道稳定性的影响。

取卵过程中是依靠负压泵的负压吸引作用吸取卵泡内的卵泡液，商品化负压泵连接管成本高，一般是采用硅化胶管及玻璃接头经高温或消毒剂浸泡消毒后重复使用。采用硅化胶管及玻璃接头经高温或消毒剂浸泡消毒后重复使用存在交叉污染和微生物污染的风险，使用次数越多就越容易发生，在取卵过程应严格防止发生卵泡液交叉污染，在Warda等[5]研究中显示体外受精过程中胚胎污染也可能来源于卵泡液,Martin等[6]研究报道曾发生过在取卵过程中由于卵泡液的返流导致污染。孙媛等[7]研究认为IVF-ET中胚胎污染的来源主要是精液、卵泡液以及IVF培养体系及环境，而正常卵泡液是无菌的。如果发生微生物污染，结果将是毁灭性的，甚至会引起实验室内的交叉污染，将导致患者的卵细胞、胚胎退化死亡，最终无法获得可利用胚胎，对患者的经济、身心造成严重的损害；相对而言输液器价格低廉，使用成本低，而且执行一人一管一抛弃的使用原则，从而杜绝了污染的源头，确保了取卵手术的安全性。

硅化胶管及玻璃接头经过反复的消毒后可使软管塑料发生硬化、爆裂等损伤，在使用过程中可能出现取卵针、负压泵两者与连接管之间吻合不致密而发生漏气或玻璃接头发生破损后碎屑掉入到卵泡液内等现象，以致使取卵过程中负压不稳定，对卵泡吸引压力不均衡，手术操作者难以控制，如压力过高可使卵泡壁过早破裂，卵细胞受挤压变形而致细胞器官损伤甚至退化死亡，或因颗粒细胞脱落而出现较多的裸卵，卵丘复合物(Occs)中颗粒细胞是卵子体外成熟的重要支持细胞，当裸卵出现过多，影响卵子的体外成熟进程，不成熟卵子不能正常受精使受精率和可利用胚胎减少，导致临床妊娠率下降；取卵时压力过大还可能会导致卵子的孤雌激活，改变卵子的生理功能[8]；压力过小使卵泡不易从卵巢组织剥离而影响获卵，获卵率下降的同时也会使手术操作时间延长，增加了卵细胞在体外的操作时间，MII期卵子纺锤体对环境温度的改变非常敏感，温度降低将导致纺锤体消失，随着时间的延长，纺锤体复现同率明显减少[9]。体外操作因素的损伤随胚胎培养过程中体外操作次数的增加而对胚胎产生损害叠加效应，胚胎质量下降、可利用胚胎减少，最终也会使妊娠率下降。在本研究中，两组患者的穿刺卵泡数差异无统计学意义，观察组卵子数高于对照组，但差异无统计学意义(P>0.05)，而观察组获卵率显著高于对照组(P<0.05)，表明观察组的取卵设备稳定性高于对照组，相同条件下能获得更多成熟卵子；两组间受精率差异无统计学意义，表明两种负压管连接方式对卵子质量、生理功能影响相似，也可能与本研究对象、数量有关，但观察组获得的可利用胚胎数高于对照组，这是获得较多优质胚胎的前提，是最终影响妊娠结果的主要因素。

综上所述，我们认为输液器塑料质量稳定，改良后的输液器连接管存在的优势是：(1)连接管是一次性使用，使用成本低，能减少污染的风险。(2)不存在反复消毒所致的损坏，与取卵针、负压泵连接吻合良好，取卵过程中能使吸引压力保持稳定，手术医师操作时控制良好，对卵母细胞的影响可控，是卵母细胞质量的良好保证，可以获得更多的可利用胚胎，有助于提高妊娠率，改善治疗结局。但由于本研究的样本量较少，需在临床扩大样本，进一步探讨其在临床应用所存在的优势，以便推广使用。

[1] Martin JA，Hamilton BE，Sutton PD，et al.Births：final data for 2008[J].Natl Vital Stat Rep，2010(59):3-71.

[2] 周绍春，梁金仙.介绍一种负压吸引器连接管的放置方法[J].医学信息，2013,12(6)：480.

[3] 刘风华，杨业洲，张松英，等．辅助生殖技术并发症诊断及处理共识[J].生殖与避孕，2015,35(7):431-439.

[4] 孔祥敏，杨爱军，曹井贺，等.HCG/LH与获卵率对临床结局的影响[J].中国医药科学，2014，4(4):7-10.

[5] Warda H,Mamik MM,Ashraf M,et al.Interstitial ectopic pregnancy: conservative surgical management[J].JSLS,2014,18(2):197-203.

[6] Martin JA，Hamilton BE, Ventura S,et al.Birth:final data for 2011[J].Natl Vital Stat Rep,2013,62(1):1-70.

[7] 孙 媛,毛丽萍.负压吸引器连接管在吸痰器中的巧用[J].齐鲁护理杂志,2012,18(2):13.

[8] 张 杨，皮 洁.取卵时泵的负压对卵子及妊娠结局的影响[J].中国优生与遗传杂志，2016，24(9):118.

[9] Ata B,Seyhan A,Polat M,et al.Risk factors for ovarian hyperstimulation syndrome: relevance of the number of follicles, serum estradiol levels and the number of oocytes collected[J].Hum Reprod,2013,28(9):2595.

(本文编辑 崔兰英)

Application of connecting pipe of modified negative pressure suction device in oocyte retrieval of assisted reproductive technology

HUANG Xiu-li,ZHEN Jin-zhuang,LIN Bing

(Shunde District Maternity and Child Healthcare Hospital of Foshan,Foshan 528300)

Objective:To explore the effect of connecting pipe of modified negative pressure suction device in the oocyte retrieval of infertility patients after treatment of assisted reproductive technology.Methods:A total of 82 patients with infertility

in vitro fertilization-embryo transfer in reproductive center from January 2016 to January 2017 were randomly divided into control group with 40 cases and observation group with 42 cases. During oocyte retrieval of in vitro fertilization-embryo transfer, the control group used sterilized silicified rubber tube and glass joint to link oocyte needle and the negative pressure suction device during the collection of egg cells, while the observation group used the modified infusion hose to connect oocyte needle and the negative pressure suction device. The number of puncture follicles, number of eggs, egg rate, fertilization rate and the number of available embryos in the two groups were compared.Results:The ovulation rate of the observation group was higher than that of the control group (P<0.05). There was no significant difference in the number of follicles, number of eggs, fertilization rate and available embryo number between the two groups (P>0.05).Conclusion:The use of improved infusion device hose to collect follicles can increase the rate of ovulation and the number of eggs, thereby increasing the number of available embryos in patients.

Infertility；Assisted reproductive technology；Modified negative pressure suction tube

528300 佛山市 广东省佛山市顺德区妇幼保健院生殖科

黄秀丽:女，本科，主管护师

2017-05-08)

10.3969/j.issn.1672-9676.2017.13.028