血清sHLA—G动态变化在先兆流产结局中的研究

夏小艳+周小明

摘 要：目的：通过定量测定正常妊娠者、先兆流产继续妊娠者及流产者体内血清sHLA-G水平，探讨其动态变化与妊娠结局的关系。方法：选取2015年7月至12月就诊于长沙市妇幼保健院并要求保胎的先兆流产患者根据保胎结局分为继续妊娠组和流产组，同期在我院定期常规产检的正常妊娠孕妇为对照组，采用ELISA法于妊娠第5-10周每周一次定量检测50例正常妊娠孕妇及140例先兆流产并要求保胎治疗孕妇体内血清sHLA-G变化值。结果：随着孕周的进展，三组血清sHLA-G均呈下降趋势，但流产组血清sHLA-G基础值偏低，且下降速度较快，对照组、继续妊娠组及流产组血清sHLA-G在孕5周时分别为（84.32±7.02）U/ml、（82.36±6.65）U/ml、（52.77±5.23）U/ml，到孕10周时则分别下降为（60.47±5.31）U/ml、（58.71±5.02）U/ml、（9.73±2.82）U/ml，同一孕周水平，三组之间的sHLA-G水平差异均有统计学意义（P<0.05）；对照组与继续妊娠组患者体内血清sHLA-G水平差异无统计学意义（P>0.05），流产组与继续妊娠组患者体内血清sHLA-G水平差异显著。结论：sHLA-G基础值偏低及降低速度过快可能会导致原因不明性流产的发生。

关键词：先兆流产；sHLA-G；结局预测

中图分类号：R714 文献标识码：A 文章编号：1671-2064（2017）12-0188-03

Abstract：Objective： To investigate the relationship between serum levels of sHLA-G and its According to the outcome of pregnancy， the patients were divided into two groups dynamic changes and pregnancy outcom through quantitative determination.Methods：patients with threatened abortion and tocolytic treatment in changsha maternal and child health care hospital from july 2015 to december as Pregnancy group and abortion group according to pregnancy outcome. normal pregnant women as control group. Quantitative detected the serum sHLA-G of 50 cases of normal pregnant women and 140 cases of threatened abortion that asked tocolytic therapy by enzyme linked immunosorbent assay（ELISA）. Results：With the development of gestational weeks， the serum sHLA-G levels of the three groups showed a downward trend， but the serum sHLA-G value was lower in abortion group， and the rate of decline was faster.At 5 weeks of gestation，The Control group， pregnancy group and abortion group serum sHLA-G were （84.32+7.02）U/ml ，（82.36 +6.65）U/ml （52.77+5.23） respectively，when 10weeks of gestation，they decreased to （60.47±5.31）U/ml、（58.71±5.02）U/ml、（9.73±2.82）U/ml respectively.The levels of sHLA-G were statistically significant at the same gestational week between the three groups（P<0.05），there was no significant difference in serum sHLA-G between the control group and the patients with threatened abortion （P>0.05），it is opposite between abortion group and continued pregnancy group. Conclusion：Low base value and slow down too fast of sHLA-G may cause unexplained abortion

Key words：Threatened abortion；sHLA-G；outcome prediction

先兆流產（threatened abortion）是孕期常见的临床病症之一，据统计，流产的发生率在10-15%[1]。临床上在早期妊娠阶段识别影响妊娠结局的相关因子并预测其发展为不良妊娠的风险，可减少许多不必要的保胎治疗，对保胎治疗有重大意义。本研究选取2015年7月至12月就诊于长沙市妇幼保健院并要求保胎的先兆流产患者140例为实验对象，其中保胎治疗后继续妊娠的106例为继续妊娠组，流产的34例为流产组，选取同期在我院定期常规产检的50例正常妊娠孕妇为对照组，并尝试动态检测血清sHLA-G变化来探讨其在对先兆流产结局中的预测价值。

1 对象与方法

1.1 研究对象纳入及排除标准

1.1.1 纳入标准

①病史：停经5～8周；②症状：出现血性白带甚至阴道流血，数小时至数天后出现或不出现下腹痛等不适；③妇科体征：子宫颈口闭合、未见妊娠物排出，子宫大小与孕妇停经周数相符合；④辅助检查：B超示子宫内见孕囊，有胚芽或胚胎存在，有或无胎儿心脏搏动；⑤尿妊娠试验阳性。

1.1.2 排除标准

①双胎；②保胎治愈组患者孕12周内再次出现先兆流产症状或住院期间 6～10 孕周血sHLA-G值未连续监测者；③入院后未经治疗即明确诊断为难免流产、不全流产、完全流产、稽留流产者；④排除染色体异常及糖尿病、高血压等慢性疾病及免疫性、解剖及感染性因素。

1.2 研究对象

根据纳入及排除标准选取2015年6月-12月就诊于长沙市妇幼保健院并要求保胎治疗的先兆流产患者140例，根据妊娠结局分为继续妊娠组和流产组，继续妊娠组106例，年龄20-34岁，中位年龄23±4.2岁，孕5～8周，平均孕周6.3±1.4周；流产组34例，年龄21-35岁，中位年龄24±4.5岁，孕5～8周，平均孕周6.5±1.6周；选择同期在我院定期常规产检的50例正常妊娠孕妇为对照组，孕妇年龄在20-35岁之间，中位年龄为23±4.2岁，孕周为5-7周，平均孕周为6.3±1.5周。三组孕妇的自然资料经统计学比较差异无显著性（P>0.05）。

1.3 研究方法

1.3.1 仪器及监测方法

孕5-8周有先兆流产要求保胎治疗者，在治疗前及治疗期间每4天分别抽取1管静脉血4ml，4000r/min离心，留置血清，采用双抗体夹心ELISA法检测sHLA-G，试剂盒来自史瑞可公司，严格按照试剂盒说明书操作；采用酶标仪（美国550型BIO-RAD）测定吸光度，波长为450nm，所测得的为血清中总的sHLA-G水平。

1.3.2 保胎治疗方案

有先兆流产指征并要求保胎治疗的孕妇，HCG2000IU肌注，一日两次，黄体酮（H33020829）20mg肌注，一日一次，至阴道流血停止3d后为止。治疗前宣讲先兆流产的注意事项；治疗期间根据患者孕周情况B超动态监测胚胎发育情况，确诊为胚胎停育或流产者终止保胎治疗。

1.3.3 统计学方法

使用SPSS19.0统计软件，对计量资料采用均数±标准差表示；两样本均数比较采用t检验，多样本均数比较采用方差分析，P<0.05有统计学意义。

2 结果

三组血清sHLA-G水平（见表1、图1）。三组的sHLA-G水平均随着孕周的进展呈下降趋势，对照组、继续妊娠组sHLA-G基础值较流产组高。同孕周时，对照组与先兆流产继续妊娠组患者体内血清sHLA-G水平差异无统计学意义（P>0.05），流产组与继续妊娠组患者体内血清sHLA-G水平差异显著，有统计学意义（P<0.05）；三组患者同孕周时，sHLA-G的95%参考值范围不同，且不存在交叉范围。

从图1可以看出，对照组与继续妊娠组血清sHLA-G水平相对比较接近，处于相对较高水平，而流产组血清sHLA-G水平较低，且下降速度较快（见图1）。

3 讨论

HLA-G是非经典的MHC-Ib类分子，可由胚胎及胸腺细胞产生，最早发现于绒毛膜外的细胞滋养层[2]。sHLA-G由滋养细胞分泌，主要起母胎免疫耐受作用，保护妊娠顺利进行。通过检测移植后胚胎培养液中sHLA-G的表达水平，发现妊娠组胚胎培养液中sHLA-G的表达水平显著高于非妊娠组（P<0.05），并认为，胚胎培养液中sHLA-G的表达水平可作为预测胚胎质量及妊娠结局的参考指标之一[3-4]。研究认为血清中sHLA-G水平的表达与早期流产的发生、发展及原因不明习惯性流产密切相关[5-7]。研究显示采用sHLA-G主动免疫治疗复发性流产者可以提高治疗有效性[8-9]。本研究采用定量法对比检测同孕周正常妊娠、先兆流产继续妊娠及流产组患者体内血清sHLA-G水平发现，孕5周时，对照组、继续妊娠组及流产组sHLA-G分别为84.32U/ml、82.36U/ml、52.77U/ml，到孕10周时分别下降至60.47U/ml、58.71U/ml、9.73U/ml，可以看出，对照组与继续妊娠组的sHLA-G很接近（P>0.05），而邓顺生[5]的研究中对照组、先兆流产组、稽留流产组的sHLA-G分别为59.35U/ml，34.45U/ml，26.78U/ml，先兆流产组与对照组差异明显（P<0.05），这可能与在邓顺生的研究中，并没有动态监测sHLA-G变化，且先兆流产组经过保胎治疗后最终发生流产者并没有剔除该组，导致先兆流产组平均sHLA-G水平较对照组明显降低。白剑[10]等通过检测血清sHLA-G与孕酮水平预测先兆流产结局发现，正常对照组、先兆流产组和难免流产组之间sHLA-G差异均有统计学意义，三组sHLA-G分别为24.3ug/ml、22.1ug/ml、12.4ug/ml，对照组与先兆流产组的sHLA-G差异明显，而本研究中，继续妊娠组和正常对照组间sHLA-G差异无统计学意义，两个研究的结果存在差异，可能与选择的样本量及研究沒有动态监测有关。

综合以上结果，sHLA-G水平在三组患者间有差异，但其在对照组与继续妊娠组之间差异无统计学意义，流产组患者血清sHLA-G下降速度较对照组及继续妊娠组明显增快，这提示血清sHLA-G基础值低且下降速度过快，导致保护胎儿免受母体免疫系统的攻击能力下降，可能是发生流产的原因之一。在相同孕周时，三组间的95%参考值差异明显，不存在重叠范围，对波动范围小、较稳定，这就提示是否可以通过建立不同孕周体内血清sHLA-G标准范围作为预测先兆流产患者保胎治疗结局预测的指标，从而避免过度医疗。然而在整个妊娠期，孕妇体内血清sHLA-G水平是呈下降趋势，对于妇产科临床工作者来讲，缺乏对患者病情交代的依据。因此，用血清sHLA-G作为单一的指标预测先兆流产保胎治疗结局有一定的局限性。建议结合其他生化指标，将有利于提高预测的准确性。

参考文献

[1]曹泽毅.中华妇产科学（临床版）.北京：人民卫生出版社，2013：311.

[2]Kovats S，Main EK，Librach C，et al.A classⅠantigen， HLA-G， expressed in human trophoblasts[J].Sence，1990，248（4952）：220-223.

[3]樊桂玲，王莉，王春艳，等.胚胎培养液中sHLA-G的表达及其对IVF-ET妊娠结局的影响[J].中国妇幼保健，2014，29：4629-4631.

[4]吕晶，周从容.可溶性人类白细胞抗原G与胚胎发育关系的初步研究[J].生殖与避孕，2014，34（9）：706-712.

[5]邓顺生.血清sHLA-G水平和绒毛中HO-1蛋白的表达与早期流产的相关性研究[J].浙江医学，2013，35（21）：1908-1910.

[6]康小玲，郜红艺，吴坤河，等.HLA-G表达差异与原因不明习惯性流产的关系[J].中国妇幼保健，2013，28（19）：3142·3143.

[7]Cecati M， Giannubilo SR， Emanuelli M， Tranquilli AL，Saccucci F. HLA- G and pregnancy adverse outcomes[J]. Med Hypotheses 2011；76：782-786.

[8]张若鹏，李正伟，许益娟，等.主动免疫治疗复发性流产 66 例疗效观察[J].云南医药，2014，35（4）：447-448.

[9]张若鹏，张丽蓉，朱莉，等.sHLA-G主动免疫治疗复发性流产的大鼠实验研究[J].云南医药，2016，37（1）：76-77.

[10]白剑，陈文，苗兰英，等.血清可溶性人类白细胞抗原G与孕酮联合检测预测先兆流产妊娠结局的临床价值[J].临床误诊误治，2016，29（8）：102-104.