新疆犊牛肺炎病原分析和临床防控

翁业斌，李建军，吴建勇，葛建军，金映红，王登峰*

（1.新疆呼图壁种牛场，新疆呼图壁831200；2新疆畜牧科学院兽医研究所（新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心），新疆 乌鲁木齐 830000）

新疆犊牛肺炎病原分析和临床防控

翁业斌1，李建军2，吴建勇2，葛建军1，金映红2，王登峰2*

（1.新疆呼图壁种牛场，新疆呼图壁831200；2新疆畜牧科学院兽医研究所（新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心），新疆 乌鲁木齐 830000）

10.16863/j.cnki.1003-6377.2017.04.012

为探索我区犊牛肺炎的流行原因、建立有效防控方法，本研究采用细菌学分离鉴定、药物敏感性试验、治疗案例和肺炎发展进程综合分析的方法对2010～2016年间14个奶牛场送检的57份肺炎病料进行研究，结果表明：化脓隐秘杆菌或荚膜A型巴氏杆菌单一病原的感染是导致新疆犊牛化脓性肺炎的主要原因，分离菌株对青霉素类、头孢类、氟喹诺酮类和氯霉素类抗菌药物（均敏感，据此，提出“及早发现，预防性治疗”的临床应对方案，使用阿莫西林、氟苯尼考和诺氟沙星等药物以肌内注射或口服的给药方式进行预防性治疗，经为期1年的临床应用，使犊牛肺炎的发病率显著下降，6个月龄内犊牛因肺炎造成的死亡、淘汰率被控制在5%以内，说明化脓隐秘杆菌、荚膜A型巴氏杆菌是引起新疆犊牛肺炎的主要病原，采取“及早发现，预防性治疗”的方案可显著降低犊牛肺炎造成的损失。

犊牛肺炎；化脓隐秘杆菌；荚膜A型巴氏杆菌；预防性治疗

犊牛肺炎是影响养牛业经济效益和健康发展的主要疾病。在新疆北疆多爆发于11月份至次年4月份出生的犊牛[1]。在设施优良的规模化养殖场中，该病仍可导致5%～15%的犊牛死亡，5%～10%的犊牛淘汰；部分牛场中用于该病治疗的费用约占牛场兽药总支出的40%以上[2]。引起犊牛肺炎的病原复杂多样，报道较多的有牛传染性鼻气管炎病毒，呼吸道合胞体病毒，副流感病毒III型，牛病毒性腹泻病毒以及牛支原体、殊异支原体，尿支原体等，但研究证实，细菌是犊牛肺炎致死的主要原因，这些细菌包括多杀巴氏杆菌、隐秘化脓杆菌、肺炎链球菌、铜绿假单胞菌、嗜血杆菌等[3,4]。此外，这些病原感染的发生与饲养管理和气候剧烈变化等应激因素密切相关，这些因素主要包括：（1）单个犊牛群个体数量过多、圈舍拥挤；（2）饲养环境低温高湿或高温低湿；（3）初乳饲喂量不足和断奶日龄过早等，即使在硬件设施优良、管理规范的规模化牛场也存在较高的发生率，是危及3月龄以内犊牛的主要疾病[4,5,6]。

为了解新疆主要牛场犊牛肺炎病例中细菌性病原种类并建立防治方法，本文对2010-2016年间新疆不同地区14个奶牛场送检的57份犊牛肺炎病料进行细菌分离鉴定，确定化脓隐秘杆菌和荚膜A型巴氏杆菌是其主要病原，并对这些病原进行了体外抗生素（改成抗菌药物，以下同）敏感性测试。根据检测结果和我区犊牛肺炎的发病情况提出了防治对策，供我区牛场临床兽医参考。

1 发病情况

新疆犊牛肺炎主要发生在规模化奶牛养殖场，其中11月份至次年4月份是主要的发病期；千头以上规模化奶牛养殖场从业人员普遍反映：10%～30%的3月龄以内犊牛经过一次或多次的治疗，且经过两次以上治疗（期间间隔大于10 d）的犊牛在其后3个月内的死亡和淘汰率（淘汰原因主要为生长不达标）大于80%。

出现典型临床症状的犊牛主要集中在15～50日龄，前驱期（5～20日龄）多表现出鼻镜干燥、脏、流卡他性或脓性鼻液等。

2 临床症状

发病期犊牛表现为体温升高（40℃～41℃），咳嗽并伴有疼痛表现，鼻腔流黏液及脓性分泌物，呼吸急促，精神沉郁；反复发病牛除表现肺炎的典型症状外，还出现生长缓慢、双侧眼球高度突出；在剧烈活动、天气炎热或天气突变时迅速发病，个别牛反复出现瘤胃臌气。

3 病理剖检

对死亡或淘汰犊牛进行剖检，可见肺脏呈现出典型化脓性肺炎，肺脏组织遍布大小不等的化脓灶（米粒至鸽子蛋大小），珍珠大小的化脓灶居多，切开后流出大量灰白色脓汁，肺脏实变、暗红色、质地硬；部分病例肺与胸膜粘连，胸腔内有大量渗出液。

4 病原分析

4.1 病原分离鉴定

对14个养殖场送检的的57份患病犊牛肺病变组织（化脓灶）样本进行细菌培养、分离，初步发现3种疑似致病菌，经16S rDNA分子鉴定[7]确定37株化脓隐秘杆菌（Trueperella pyogenes）、23株巴氏杆菌（Pasteurella multocida）和4株铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）；巴氏杆菌经PCR分型确定均为荚膜A型[8]。本文所述的14个牛场病料均分离出化脓隐秘杆菌和荚膜A型巴氏杆菌，4个牛场中分离出铜绿假单胞菌。化脓隐秘杆菌、荚膜A型巴氏杆菌和铜绿假单胞菌的分离率分别为64.9%（37/54）、40.4%（23/54）和7.0%（4/54）。细菌分离检测发现，多数病料属单一种类的细菌感染，少量样本（共4份）中出现化脓隐秘杆菌或荚膜A型巴氏杆菌与铜绿假单胞菌的混合感染，仅两例病料中同时分离出化脓隐秘杆菌和荚膜A型巴氏杆菌（见表1），表明化脓隐秘杆菌和荚膜A型巴氏杆菌为主要致病菌。

此外，根据送检病料犊牛日龄划分，所有病料分别来自15～30 d（注意阿拉伯数字后的天是否用d，小时用h表示，诸如此类的写法问题）、30～60 d和大于60 d三个犊牛日龄区间段，化脓隐秘杆菌在三个日龄区间的检出率均大于63.3%，15～30 d日龄检出率为80%；A型巴氏杆菌在三个日龄区间内发病牛的检出率为40%（见表1），进一步表明化脓隐秘杆菌或荚膜A型巴氏杆菌单一病原导致肺炎的发生。

表1 化脓性肺炎病料中细菌的分离情况

4.2 体外药物敏感性测试

参考CLSI发布的“抗菌药物敏感性测试的操作标准（M100-S25）”[9]中肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae）的药敏试验方法和解释标准，对鉴定的37株化脓隐秘杆菌和23株荚膜A型巴氏杆菌进行抗菌药物敏感性测试和分析。化脓隐秘杆菌对阿莫西林（青霉素类）、头孢曲松钠（头孢类）、氧氟沙星（氟喹诺酮类）和氯霉素（氯霉素类）等抗菌药物敏感，对红霉素（大环内酯类）和克林霉素（林可胺类）部分敏感，对复方新诺明（磺胺类）和四环素（四环素类）耐药；A型巴氏杆菌对所测试的药物均敏感（表2）。

表2 新疆部分奶牛场分离的化脓隐秘杆菌和A型巴氏杆菌体外抗菌素敏感性

5 防治对策

在临床防治中，要求犊牛饲养人员配合兽医技术人员做到“及早发现，预防治疗”。对转入犊牛舍的新生牛，坚持早、晚饲喂前观察，对出现（1）萎顿、喜卧、饲喂时不兴奋；（2）鼻镜干；（3）有稀薄或黏白鼻液这三种症状中任何一种的犊牛均视为不健康，并对这类犊牛连续2～3 d肌内注射氟苯尼考或阿莫西林等抗生素；如果群体发病率超过30%（多于40头）建议使用阿莫西林、诺氟沙星等可溶性粉饮水3～5 d加以控制。通过在4个千头规模奶牛场为期1年的临床应用显示，20日龄后犊牛中，出现典型肺炎征状的犊牛发病率显著下降，6个月龄内犊牛因肺炎造成的死亡、淘汰率有效控制在5%以内。

6 讨论

2006 年开始，我国牛群出现了由荚膜A型巴氏杆菌引起的严重侵害奶牛以及肉牛呼吸系统的疾病[10]。牛群多在混群后或长途运输时发病；初期出现零星死亡，运输后半个月内病情进展较快，多为急性或亚急性病症并伴有大量死亡病例。病牛引入健康群后，以2～6月龄犊牛最易感，发病率高达30%；病亡解剖多以纤维素性或化脓性肺炎为主要病变。发生肺炎的牛生长发育迟缓，多数预后不良；临床表现以精神萎靡、食欲减退、咳嗽、流涕、体温升高（41℃以上）和消瘦为特征，主要病理解剖变化为肺组织广泛淤血和散在大小不一的脓肿结节，心包膜与胸膜粘连，纤维素性或化脓性纤维素性胸膜炎，肺小叶间隔水肿与化脓。据报道，从2008年至2010年，我国陆续有10个省市发生牛荚膜A型巴氏杆菌病疫情，并在其中7个省份成功分离到病原[5]。2015年，侯引绪等[11]报道2013年9月在北京某奶牛场的犊牛群中发生化脓隐秘杆菌引起的犊牛化脓性肺炎，症状与荚膜A型巴氏杆菌导致的临床症状基本一致，确定这两种细菌均为犊牛化脓性肺炎的致病菌，且临床上难以区分。

同时，荚膜A型巴氏杆菌和化脓隐秘杆菌均为牛上呼吸道正常定植菌群的成员，某些应激因素导致菌群紊乱，从而促使其大量繁殖而致病，引起化脓性肺炎以及胸膜炎等。当前，我国规模化牛场硬件设施和犊牛饲养管理水平显著提高，初乳饲喂量和断奶日龄充分优化，但是单个犊牛群个体数量过多、圈舍拥挤等仍不可避免；再遇上冬春季气温反复无常的变化，导致犊牛抵抗力降低，进而引起化脓隐秘杆菌、荚膜A型巴氏杆菌性犊牛肺炎的发生。

本文对2010-2016年间北疆地区14个规模化奶牛养殖场送检的57份犊牛肺炎病料进行细菌分离鉴定，发现所有的牛场均分离出化脓隐秘杆菌和荚膜A型巴氏杆菌，病料分离率分别为64.9%和40.4%，且多为单一病原感染，说明单一化脓隐秘杆菌和荚膜A型巴氏杆菌是我区犊牛肺炎的主要细菌性病原。

根据新疆牛场分离株的体外药物敏感性试验结果：荚膜A型巴氏杆菌对所测试的药物均敏感；化脓隐秘杆菌对阿莫西林（青霉素类）、头孢曲松钠（头孢类）、氧氟沙星（氟喹诺酮类）和氯霉素（氟苯尼考类）抗生素敏感，对红霉素（大环内酯类）和克林霉素（林可胺类）部分敏感，建议使用阿莫西林、氟苯尼考和诺氟沙星等药物以肌内注射的方式进行预防性治疗，针对规模化牛场的犊牛数量较多，如果群体发病率超过30%（多于40头）建议使用饮水中添加药物的方式加以控制，减少兽医人员的治疗压力，将较多精力集中在早、晚饲喂前的观察上，并提高抗菌用药医嘱的依从性。

本研究表明：应激条件下，化脓隐秘杆菌或荚膜A型巴氏杆菌单一病原感染下呼吸道是导致新疆地区犊牛化脓性肺炎的主要原因，坚持“及早发现，预防性治疗”的方法，使用阿莫西林、氟苯尼考和诺氟沙星等敏感药物以肌内注射或口服的方式进行预防性治疗可显著降低犊牛的死亡和淘汰率。

[1]马晓菁.致犊牛肺炎多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及部分生物学特性研究[D].石河子大学,2010.

[2]石剑华,谢新成,孙素珍.犊牛肺炎高发且难以控制的因素分析及预防措施[J].当代畜禽养殖业,2012，(04)：35～36.

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[6]刘瑞生,滕占权,赵宵萌,等.犊牛肺炎高发且难以控制的因素分析及预防措施[J].中国畜牧兽医文摘, 2017，(01)：118.

[7]朱诗应,戚中田.16S rDNA扩增及测序在细菌鉴定与分类中的应用[J].微生物与感染,2013，(02)：104～109.

[8]马文戈,于力.牛源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定[J].中国预防兽医学报,2008，(10)：747-750.

[9]The Clinical and Laboratory Standards Institute(CLSI).Performance standards for antimicrobial susceptibility testing,25th informational supplement[M].CLSI document M100-S25.PA USA：Wayne,2015：88-92.

[10]姜志刚,常继涛,王芳,等.我国牛群中荚膜A型巴氏杆菌肺炎的发生和研究进展[C].中国江苏徐州：动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会,2013：4.

[11]侯引绪,李永清,姜小平,等.犊牛化脓性隐秘杆菌病临床防控研究[J].中国奶牛,2015，(08)：30-32.

Pathogenic Analysis and Clinical Prevention and Control of Calf Pneumonia in Xinjiang

WENG Ye-bin,LI Jian jun2,WU Jian-yong2，GE Jian-jun1,JIN Yin hong2,WANG Deng-feng2*
（1.Xinjiang Hutubi Breeding Cattle Farm，Hutubi Xinjiang 831200，China；2.Institute of veterinary medicine（Animal Clinical Research Center），Xinjiang Academy of Animal Science，Urumqi 830000，China)

In order to identify the cause of the epidemic of calf pneumonia,so to establish effective prevention and control methods,the bacterial isolation and identification of 57 pneumonia cases from 14 dairy cattle farms in 2010-2016 was carried out,and drug susceptibility testing of the isolates were carried out, furthermore,treatment case analysis and pneumonia development process analysis were considered.The results showed that the outbreak of single pathogen of Trueperella pyogenes or Pasteurella multocida types A was the main cause of purulent pneumonia of calves in Xinjiang,all isolates were sensitive to the penicillin, cephalosporins,fluoroquinolones and florfenicol,the"early detection and preventive treatment"of the clinical response was proposed and applied,and preventive drugs,such as amoxicillin,florfenicol and norfloxacin, were administered by intramuscular injection or oral administration（,after a period of 1 years of clinical application,the incidence of calf pneumonia was significantly decreased,and the mortality and elimination rate of calves caused by pneumonia within 6 months were effectively controlled within 5%.This study suggests Trueperella pyogenes or Pasteurella multocida types A was the main cause of purulent pneumonia of calves in Xinjiang and"early detection and preventive treatment"can significantly reduce the economic losses caused by calf pneumonia.

Calf pneumonia；Trueperella pyogenes；Pasteurella multocida types A；Preventive treatment

S856.3

A

1003-6377（2017）04-0060-05

自治区青年科技创新人才培养工程（qn2015yx037）

并列第一作者：翁业斌（1977-），男，大专，兽医师，从事奶牛疾病诊治工作。E-mail：1159844616@qq.com李建军（1962-），女，大专，高级实验师，从事兽医实验室分析工作。E-mail：1048347357@qq.com

王登峰（1982-），男，临床兽医学博士，副研究员，从事草食家畜常见病研究工作。E-mail：395045819@qq.com

2017-04-03，

2017-04-16