山西木耳蘑学名考证*

郭 尚，徐莉娜，张生万，李艳婷，周 林，刘晓钢

（1．山西省农业科学院食用菌研究所，山西 太原 030031；2．山西大学生命科学学院，山西 太原 030006；3．山西农业大学，山西 晋中 030801）

山西木耳蘑学名考证*

郭 尚1，徐莉娜2，张生万2，李艳婷1，周 林1，刘晓钢3

（1．山西省农业科学院食用菌研究所，山西 太原 030031；2．山西大学生命科学学院，山西 太原 030006；3．山西农业大学，山西 晋中 030801）

“木耳蘑”是一种比较好吃的野生子囊菌，在新疆南部和山西北部颇为著名，味道鲜美，质地细腻，在可食的子囊菌中属上乘之品，但因其学名比较混乱，给同类研究带来诸多不便。采用形态分类学和分子生物学相结合的方法对其进行分类学鉴定，证明“木耳蘑”的学名是棱柄马鞍菌（Helvella lacunosa）。

山西省；子囊菌；木耳蘑；棱柄马鞍菌

“木耳蘑”是新疆南部和山西北部常见的野生食用菌，味道鲜美，因菌盖与木耳相似而得名[1]。目前该菌尚处于野生状态。根据其形态特征初步鉴定为棱柄马鞍菌（Helvella lacunosa）。木耳蘑在世界各地均有分布，每年8月中下旬至9月上旬单生、散生或群生于腐殖落叶层[2]。因木耳蘑迄今为止未被驯化成功，随着人们对具有特殊香味和鲜味木耳蘑的逐步认识，市场需求量日益增加，价格大幅升高，致使农民野外采集度增高，导致木耳蘑野生数量急剧减少，这种状况严重威胁木耳蘑物种的存亡。

近年来国内有部分研究单位对木耳蘑进行分类鉴定研究。因其外部形态特征和皱马鞍菌相似，而被鉴定为皱白马鞍菌或棱柄白马鞍菌。图力古尔在编撰《中过毒蘑菇名录》的过程中，将Helvella crisp（Scop．）Fr．的学名由棱柄马鞍菌订正为皱柄白马鞍菌[3]；图力古尔教授的学生康国平把Helvella crisp（Bull&Herb）Fr．鉴定为棱柄马鞍菌[4]；李玉教授的学生陈越渠把Helvella crisp（Bull&Herb）Fr．鉴定为棱柄白马鞍菌，把Helvella lacunosa Afzel．鉴定为棱柄马鞍菌[5]；戴玉成等把Helvella crisp（Scop．）Fr．鉴定为皱马鞍菌[6]，把Helvella lacunosa Afzel．鉴定为棱柄马鞍菌[7]，至今木耳蘑有相当多的名称，较为混乱，因此有必要对其名称进行考证。

近年笔者和马鞍菌课题组成员对采自山西省境内的马鞍菌属样品进行了生态环境因子调查，观察子实体形态以及孢子的微观形态，并通过分子生物学方法对子实体DNA进行ITS测序，采用形态学与分子学相结合的方法对木耳蘑进行菌种鉴定。

1 材料与方法

1.1 材料来源

形态学鉴定和分子测序所用材料均采自于山西省芦芽山，标本保存于山西省农业科学院食用菌研究所菌种库（编号：SYJ-X2016-1）。

1.2 显微观察

显微结构观察方法参照文献[8]。

1.3 分子生物学鉴定

1．3．1 引物设计

ITS1（5’-TCC GTA GGT GAA CCT GCGG-3’），ITS4（5’-TCC TCC GCT TAT TGA TAT GC-3’）。

1．3．2DNA提取

提取方法参照参考文献[8]。

1．3．3 PCR扩增

在PCR扩增仪上进行PCR反应。

1．3．4 PCR产物的回收

PCR产物用AxyPrep DNA凝胶回收试剂盒回收，具体操作按试剂盒说明书进行。

1．3．5 序列测定

取各个菌种纯化后的PCR产物，使用测序仪ABI3730-XL进行DNA测序。

1．3．6 序列分析

用NCBI Blast程序将拼接后的序列文件与NCBI ribosomal RNA sequence（Bacteria and Archaea） 数据库中的数据进行比对，得到与待测菌种序列相似性最大的菌种信息，即为鉴定结果。

2 结果与分析

2.1 形态学特征

子实体形态见图1。

图1 子实体形态Fig．1 Fruiting body morphology

子囊果较小。菌盖直径1 cm～4．8 cm，褐色或深褐色，形似马鞍，表面平整或凸凹不平，布细小绒毛，边缘弯曲呈波状，菌盖无菌褶或菌孔，菌肉薄，黑色，与木耳相似。菌盖边缘不与菌柄相连，菌柄灰白至灰色，长1．5 cm～8．8 cm，粗0．4 cm～1 cm，棒状，下部膨大，具纵向沟槽。气味和味道较强。

子囊果 (200～280)μm×(14～21)μm，长棒状至长圆柱形，顶端钝圆，内含8个子囊孢子，单行排列，无色透明。子囊孢子 (15～22)μm×(10～13) μm，长橄榄形、椭圆形至宽卵形，光滑，无色至浅黄色。

2.2 分子生物学鉴定

2．2．1 PCR产物凝胶电泳

ITS凝胶成像图见图2。

图2 ITS凝胶成像图Fig．2 Gel-imaging figure of ITS

2．2．2 ITS扩增片段序列

ITS扩增片段序列（登录号：KY865326） 长度为676个碱基。

2．2．3 数据库比对和系统进化树的建立

将测序获得的ITS序列与NCBI数据库收录序列进行比对分析，得到确定种名的近源种，建立系统进化树，见图3。

2．2．4 分类鉴定

实验结果显示，实验所选样本的宏观形态特征与棱柄马鞍菌（Helvella lacunosa）的形态特征符合[9]；显微结构方面，木耳蘑除了子囊大小与棱柄马鞍菌（Helvella lacunosa）有一定差距外，其它显微特征均一致；从分子生物学的角度来说，测序的结果在NCBI GenBank进行Blast比对，所测序列与棱柄马鞍菌 （H.lacunosa） 的 ITS序列 （GenBank ID: KC122820．1） 的query cover达到了90%，相似度达100%，分析木耳蘑属于马鞍菌属（Helvella L．）。综合宏观形态、微观结构和ITS序列，山西木耳蘑鉴定为棱柄马鞍菌，拉丁学名为Helvella lacunosa，中文异名为多洼马鞍菌。棱柄马鞍菌属于子囊菌门（Ascomy-cotina） 盘菌纲 （Pezizomycetes） 盘菌目（Pezizales） 马鞍菌科 （Helvellaceae） 马鞍菌属（Helvella）。

图3 基于ITS构建的系统发育树Fig．3 Phylogenetic tree using ITS date

3 结论

棱柄马鞍菌（H.lacunosa） 俗称羊肚蘑、木耳蘑，是山西北部常见的极为珍贵的野生食用菌，味道鲜美，营养丰富，深受当地人民的喜爱。分类学上属于子囊菌门（Ascomy-cotina） 盘菌纲（Pezizomycetes） 盘菌目（Pezizales） 马鞍菌科（Helvellaceae）马鞍菌属（Helvella）。菌盖马鞍形，黑褐色，瓣片不整齐，呈不规则卷曲状，与木耳相似。菌柄布沟壑，白色，薄，上小下大。每年4月～5月份于雨后在松树林地发生，此菌现仍处于野生状态，没有人工驯化栽培成功的报道。对于棱柄马鞍菌的生态环境截止目前没有研究报道，而且对于此菌是否为菌根菌也无定论。为此笔者以此菌为研究对象，从分子鉴定开始逐步进行研究，旨在为开发此菌和人工驯化栽培奠定理论基础。

[1]戴芳澜．中国真菌总汇[J]．北京：科学出版社，1979：155 -157．

[2]郑庆珠．亟待开发的一种美味子囊菌--棱柄马鞍菌的研究[J]．食用菌，1987（6）：1．

[3]图力古尔，包海鹰，李玉．中国毒蘑菇名录[J]．菌物学报，2014（3）：517-548．

[4]康国平．东北地区市场野生食用菌种类多样性及资源评价[D]．长春：吉林农业大学，2011．

[5]陈越渠．吉林老爷岭大型真菌多样性研究[D]．长春：吉林农业大学，2007．

[6]戴玉成，周丽伟，杨祝良，等．中国食用菌名录[J]．菌物学报，2010（1）：1-21．

[7]戴玉成，杨祝良．中国药用真菌名录及部分名称的修订[J]．菌物学报，2008（6）：801-824．

[8]王苗．中国多洼马鞍菌（Helvella lacunosa）复合群物种多样性研究[D]．昆明：昆明理工大学，2016．

[9]顾龙云，安旺盛，蒲训．皱马鞍菌子囊盘（菌盖）结构的光学显微镜和扫描电镜观察[J]．兰州大学学报，1994（1）：82-86．

《中国食用菌》声明

近期，有部分网站盗用《中国食用菌》期刊的名义，发布《中国食用菌》期刊论文，索要审稿费或者推荐作者改投他刊，《中国食用菌》特提醒广大作者和读者，目前《中国食用菌》网站正在建设中，投稿仍为邮箱投稿，投稿邮箱为zgsyj2005＠163．com，编辑部电话为0871-65151099，以避免上当受骗。

本刊受理稿件时不收取审稿费，只有论文被录用后才收取版面费。

中国食用菌杂志编辑部

2017年7月10日

Critical Comment on“Muer”Mushroom of Shanxi Province

GUO Shang1,XU Li-na2,ZHANG Sheng-wan2,LI Yan-ting1,ZHOU Lin1,LIU Xiao-gang3
(1．Shanxi Academy of Agricultural Sciences,Institute of Edible Fungi,Taiyuan 030031,China;2．College of Life Sciences, Shanxi University,Taiyuan 030006,China;3．Shanxi Agricultural University,Jinzhong 030801,China)

“Muer”mushroom is the local name given to a wild ascomycetes,it is deeply loved by local people in Southern Xinjiang and Northern Shanxi province for its taste and nutrition．However,the mushroom does not have a unified scientific name,which bring some inconvenience to the scholar who do the same research．Although the taxonomic status of this wild edible mushroom is unclear,we suggested that the correct scientific name for“Muer”mushroom is Helvella lacunose based on morphological characteristics and molecular sequences．

Shanxi province;ascomycetes;“Muer”mushroom;Helvella lacunosa

S646.9

A

1003-8310（2017）04-0015-03

10．13629/j．cnki．53-1054．2017．04．004

2015年新兴产业领军人才创业项目。

郭尚（1967-），男，博士，研究员，主要从事野生食用菌驯化栽培工作。E-mail:gs0351＠sohu．com

2017-05-11