落新妇组培快繁技术研究

2017-07-19詹佳鲍跃群唐飞邬枭楠

现代农业科技 2016年16期

詹佳++鲍跃群++唐飞++邬枭楠

摘要以落新妇种子作为外植体进行组培快繁，结果表明：以嫩叶形成愈伤组织诱导芽的方式，实现丛生芽的再生。适宜诱导分化的培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+ 2，4-D 0.1 mg/L，最适增殖的培养基MS+6-BA 0.5 mg/L+2，4-D 0.1 mg/L，形成的植株转接到1/2MS+NAA 0.5 mg/L，生根率达90%以上。

关键词落新妇；组织培养；快繁技术

中图分类号 S567.23 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2016）16-0063-02

Abstract Taking Astilbe chinensis seeds as explants in tissue culture and rapid propagation，the results showed that the leaves formed callus induction of bud and adventitious bud regeneration.MS+6-BA 0.5 mg/L+2，4-D 0.1 mg/L were the most suitable medium for inducing differentiation，the most suitable medium for MS+BA 0.5 mg/L+2，4-D 0.1 mg/L，the plant was transferred to 1/2MS+NAA0.5mg/L，and the rooting rate reached more than 90%.

Key words Astilbe chinensis；tissue culture；rapid propagation

落新妇（Astilbe chinensis），又名红升麻、虎麻、金猫儿、金毛等，为落新妇科落新妇属多年生宿根草本植物[1]，具有较好的药用价值，还可栽培观赏、点缀盆景。由于其发芽率低，发芽缓慢，出芽不整齐，加上自然资源越来越少，难以满足需求[2]。该文研究落新妇组培快繁技术，现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 试验材料

采用引种驯化成功的落新妇种子作外植体，再以此培育的无菌落新妇植物的叶片进行组培试验。

1.2 试验方法

1.2.1 外植体消毒。将落新妇种子处理后，在培养的培养中，10 d后观察不同培养基中种子的污染情况。把无病虫害的落新妇种子在20 ℃左右温水浸泡30 min，浸泡洗洁精30 min（同时流水处理）[1]，在操作台紫外灯处理30 min，无菌条件下用75%酒精溶液浸泡10 s，无菌水冲洗1～2 s，再用0.1%升汞溶液消毒5.5 min，取出用无菌水冲洗2～3次，用消毒滤纸吸干后切块，均匀撒种于培养基上，污染率最低。

1.2.2 外植体培养。把种子放在培养基上25 d后，将长成的小苗进行转接、扩繁。

1.2.3 培养基及培养条件。以MS作为初代培养、增殖培养和生根培养的基本培养基，然后在培养基中加入蔗糖30 g/L和琼脂7.2 g/L。培養温度（25±2）℃，光照强度3000 lx，光照时间12 h/d，pH值均为5.8。

1.2.4 初代培养。以MS为基本培养基，附加不同浓度的6-BA（0.5、1.0、2.0 mg/L）、2，4-D（0.1、0.2 mg/L）进行组合，每种培养基接种30个外植体。

1.2.5 增殖培养。在增殖培养基上接种诱导出来的芽，附加不同浓度的6-BA（0.3、0.5、0.7、1.0 mg/L），2，4-D 0.1 mg/L，每种培养基分别接种30瓶，观察记录增殖效果。

1.2.6 生根培养。在1/2MS培养基上分别添加不同浓度的NAA（0.1、0.5 mg/L）与2，4-D（0.1、0.5 mg/L）进行诱导生根，并在生根过程中进行比较，观察试管苗生根情况。

2 结果与分析

2.1 不同消毒方式对外植体的影响

在落新妇种子处理后10 d后观察不同培养基中种子的污染情况。从表1可以看出，把无病虫害的落新妇种子在20 ℃左右温水浸泡30 min，浸泡洗洁精30 min（同时流水处理），在操作台紫外灯处理30 min，用75%酒精溶液浸泡10 s，0.1%升汞溶液处理5.5 s的处理污染率最低，仅为14.28%[3]。

2.2 不同激素配比对芽诱导的影响

在落新妇叶片芽诱导过程中，叶片均可在15 d左右形成愈伤组织从而诱导出芽。从表2可以看出，A3培养基（MS+6-BA 0.5 mg/L+2，4-D 0.1 mg/L）芽诱导率明显高于其他，且芽生长健壮、叶色绿。

2.3 芽的增殖

从表3可以看出，当6-BA分别为0.3～1.0 mg/L时，添加0.1 mg/L的2，4-D，芽均能增殖，增殖倍数在4.5倍以上。从芽苗的增殖倍数、苗的长势等综合因素考虑，最终试验得出最适增殖培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+2，4-D 0.1 mg/L（图1）。

2.4 生根培养

将1～3 cm高的落新妇试管苗接种于添加0.1、0.5 mg/L的NAA或0.1、0.5 mg/L的2，4-D的1/2 MS培养基中，15 d开始生根，25 d进行观察。从表4可以看出，0.5 mg/L的NAA较低浓度（0.1 mg/L）的效果好，能缩短试管苗生根时间，根粗壮。而0.1、0.5 mg/L的2，4-D生长的根系一般（图2）。

2.5 试管苗移栽

为了提高移栽成活率，应将试管苗放在自然光下炼苗 2～3 d，洗净小苗的根部，移栽在腐殖土的苗床上，注意遮荫保温，成活率一般可达到80%以上。

3 结论与讨论

落新妇以嫩叶形成愈伤组织诱导芽的方式，实现丛生芽的再生。适宜诱导分化的培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+2，4-D 0.1mg/L，最适增殖的培养基MS+6-BA 0.5 mg/L+2，4-D 0.1 mg/L，形成的植株转接到1/2MS+NAA 0.5 mg/L，生根率达90%以上[9-15]。

4 参考文献

[1] 庞长民，王庆，刘安成，等.不同处理对落新妇种子室内萌发的影响[J].西南大学学报（自然科学版），2009，31（2）：70-73.

[2] 曾春凤，郭艳敏，刘泽勇，等.宿根花卉新秀——落新妇的栽培及应用[J].河北林业科技，2006（4）：54.

[3] 胡凯，张立军，白雪梅，等.植物组织培养污染原因分析及外植体的消毒[J].安徽农业科学，2007，35（3）：680-681.

[4] 陈娟，潘开文，毕世荣，等.生姜茎尖组织培养和污染率控制的研究[J].长江蔬菜，2007（1）：38-40.

[5] 谭文澄.观赏植物组织培养技术[M].北京：中国林业出版社，2001.

[6] 周俊辉，李宏彬，杨耀强，等.植物组织培养中污染的鉴定与防止初步研究[J].微生物学杂志，2002，22（2）：53-55.

[7] 焦立为，黄克梅，焦立群.植物组织培养前用臭氧对外植体进行消毒灭菌的效果初探[J].植物生理學通讯，2005，38（5）：466.

[8] 俞继英，王春，陈任文展，等.红叶石楠的组培快繁技术[J].林业科技开发，2005，19（2）：45-46.

[9] 刘香玲，王玉珍，罗景兰.水稻成熟胚愈伤组织的诱导和分化因素的研究[J].山东农业科学，2005（5）：7-9.

[10] 谭文澄.观赏植物组织培养技术[M].北京：中国林业出版社，2001.

[11] 任敬民，陈跃进，郭丽明.台湾青枣组织培养的消毒方法[J].湖北农业科学，2004（1）：65-68.