干细胞移植联合活血生肌汤治疗糖尿病足伴下肢慢性缺血的疗效

郭梅珍 李高申

(黄河科技学院，河南 郑州 450063)

干细胞移植联合活血生肌汤治疗糖尿病足伴下肢慢性缺血的疗效

郭梅珍 李高申

(黄河科技学院，河南 郑州 450063)

目的 探讨干细胞移植联合活血生肌汤治疗糖尿病足(DF)伴下肢慢性缺血的疗效。方法 90例DF伴下肢慢性缺血患者随机分成常规组(常规治疗组)、干细胞组(干细胞移植+常规治疗)和综合组(干细胞移植+活血生肌汤+常规治疗)各30例，均治疗12 w。比较治疗前后各组的间接性跛行评分、皮肤温度、裸臂指数(ABI)、疼痛评分、糖化血红蛋白(HbA1c)水平以及溃疡面积和深度变化情况，并观察各组疗效情况。结果 与治疗前相比，干细胞组和综合组治疗后间接性跛行评分、疼痛评分均显著降低，ABI、皮肤温度均显著增加(P<0.05)。治疗后间接性跛行评分、疼痛评分常规组>干细胞组>综合组，两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)，而ABI、皮肤温度均常规组<干细胞组<综合组，两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。3组HbA1c比较无统计学差异(P>0.05)。治疗后干细胞、综合组溃疡面积和深度均降低，且常规组>干细胞组>综合组，两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后干细胞组、综合组的总有效率均明显优于常规组(P<0.05)。结论 干细胞移植技术是治疗DF伴下肢慢性缺血的有效方法，与中药合用可以提高干细胞移植技术的疗效。

干细胞移植；活血生肌汤；糖尿病足；下肢慢性缺血

糖尿病(DM)并发症中发病率最高的一种是糖尿病足(DF)〔1〕。DF是目前造成患者下肢截肢最常见的潜在因素之一，已经有约1/4的非创伤性下肢截肢由DM引起，且其中85%是由DF引起〔2〕。治疗DF的传统方法是药物加手术治疗。然而，对于一些动脉闭塞引起的DF患者，药物不能解决疾病的根本问题。此外，这些患者的下肢病变是弥漫性的血管狭窄，单一的血管介入治疗和血管重建术并不能有效地解决这些问题〔3〕。干细胞可以在缺血缺氧环境下诱导分化为血管内皮细胞，促进肢体心血管生成并改善血供，从而治疗肢体的缺血症状〔4〕。现代中医治疗DF主要从清热解毒，活血化瘀、祛腐生肌，温通经脉、益气活血等角度进行医治〔5〕。本研究将干细胞移植技术和活血生肌汤作为联合治疗DF手段，探讨此联合方法的疗效。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2013年6月至2016年3月在附属医院门诊治疗的 90例DF患者。其中男42例，女48例，年龄45～75〔平均(66.79±6.23)〕岁。纳入标准：(1)所有患者的诊断需符合WHO(1999)制定的标准〔6〕。(2)患者均出现不同程度的肢端坏疽和下肢慢性缺血性溃疡，并伴有间歇性跛行和静息痛。(3)术前数字减影血管造影检查证实在患者的外周血管中存在闭塞性损伤。排除标准：有严重心、脑、肺、肾等器官衰竭和不可耐受干细胞移植手术的患者。将90例患者随机分成：常规组(常规治疗)、干细胞组(干细胞移植+常规治疗)、综合组(干细胞移植+活血生肌汤+常规治疗)各30例。3组性别、年龄、体重指数(BMI)、DM病程，比较差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。所有患者自愿加入试验研究并签署知情同意书，同时经过我院伦理委员会的批准。见表1。

表1 3组基本资料比较

1.2 治疗方法 常规组均进行常规的DM治疗：包括降糖药胰岛素治疗，注意合理饮食以及规律运动。干细胞组行自体骨髓血干细胞移植+常规组相同的常规治疗。骨髓干细胞移植：患者自身骨髓血提取和采集后，分离骨髓单个核细胞。患者在严格无菌条件下麻醉成功后，在下肢缺血的部位进行多点注射骨髓干细胞。注射完毕患者进行消毒后送回病房。综合组行自体骨髓血干细胞移植+常规组相同的常规治疗+口服活血生肌汤治疗。活血生肌汤的方剂如下：生黄芪30 g，党参17 g，丹参13 g，赤芍18 g，川芎10 g，红花8 g，乳香25 g，生地黄8 g，大黄8 g，黄柏5 g。300 ml/剂，1剂/d，温水送服。3组均治疗12 w后，观察疗效。

1.3 观察指标 (1)间接性跛行评分：患者在经历跛行前可行走的距离评分如下：0分，≥0.5 km，无疼痛；1分，0.4～0.499 km有疼痛；2分，0.3～0.399 km有疼痛；3分，0.1～0.299 km有疼痛；4分，休息和无法行走的疼痛，或步行距离<0.1 km。(2)皮肤温度测定：使用数字温度计(天津交通电子仪器实验工厂)在脚背的第三跖趾关节外皮肤上测量皮肤温度。所有患者须每天在相同时间测量和记录温度。(3)裸臂指数(ABI)测量：使用多普勒血流检测器(北京格林迪美科技公司)检测。(4)疼痛评分〔1〕：0分为无疼痛；1分为偶发疼痛；2分为轻度和可耐受的疼痛，不需要镇痛药；3分，中度疼痛需要口服止痛药；4分，严重的疼痛，不能通过一般镇痛药减轻，需要镇痛注射疗法。(5)糖化血红蛋白(HbA1c)：患者空腹10 h后，于次日清晨采静脉血4 ml，全血采用英国 Drew DS-5 糖化血红蛋白仪，进行离子交换层析检测。(6)溃疡面积溃疡深度：使用拍照的方法计算溃疡面积。釆用止血钳探入溃疡内部用标尺测量估算深度。

1.4 疗效评价 参照2002年版《中药新药临床指导原则》〔7〕中的疗效判定标准并结合DF的特点：(1)临床痊愈：溃疡愈合，局部症状消失或基本消失，证候积分减少在 90%～100%。(2) 显效：溃疡面积减少60%～90%，全身症状、局部症状、体征明显改善，证候积分减少60%～89%。(3)有效：溃疡面积减少30%～59%，证候积分减少30%～59%。(4)无效：溃疡面积减少<30%或溃疡面积、伤口分级加重，全身症状、局部症状、体征改善不明显或加重，证候积分减少<30%。总有效率=(临床痊愈+显效+有效)÷总例数×100%。

1.5 统计学方法 应用SPSS19.0软件进行χ2、t检验。

2 结 果

2.1 3组局部指标比较 治疗前，3组间接性跛行评分、ABI、皮肤温度、疼痛评分及HbA1c水平差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后干细胞组和综合组，间接性跛行评分、疼痛评分均降低，ABI、皮肤温度均增加(P<0.05)。治疗后间接性跛行评分、疼痛评分均常规组>干细胞组>综合组，两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)，而ABI、皮肤温度均常规组<干细胞组<综合组，两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。3组之间及组内治疗前后HbA1c比较无统计学差异(P>0.05)。见表2。

表2 3组DF患者局部指标比较

与治疗前比较：1)P<0.05；与常规组比较：2)P<0.05；与干细胞组比较：3)P<0.05，下表同

2.2 3组溃疡愈合情况比较 治疗前，3组溃疡面积和深度差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后干细胞、综合组溃疡面积和深度均显著降低(P<0.05)，且均常规组>干细胞组>综合组，两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 治疗前后3组溃疡面积和深度变化比较±s,n=30)

2.3 3组总有效率比较 治疗后干细胞组的总有效率为90.00%(临床痊愈10例，显效9例，有效8例，无效3例)，综合组的总有效率为93.33%(临床痊愈14例，显效7例，有效7例，无效2例)，均明显优于常规组的66.67%(临床痊愈4例，显效7例，有效9例，无效10例)(P<0.05)。

3 讨 论

DF是指由于DM血管病变和神经病变而使肢端缺血且失去感觉，足部受多种诱因引起溃烂，并且合并感染而造成难以愈合的一种DM并发症。DF并发感染，往往会加剧疾病进展和阻碍伤口愈合和恢复，影响病人的预后。

DF的治疗关键在于改善足部血液循环，控制与内皮祖细胞功能障碍相关的感染情况及减少相应组织缺血并促使新血管的形成〔8〕。干细胞移植治疗技术是一种新的治疗DF的方法，并且正在逐渐应用至临床。一些患者已经从这种技术中受益，得到了良好的治疗效果且没有严重的并发症和副作用〔9〕。经证实，自体干细胞移植和外周血干细胞移植在治疗DF并伴有严重下肢慢性缺血时，与传统治疗手段相比，在血管重建、治疗局部缺血现象及保留完整肢体方面都有较高的疗效〔10〕。本研究选用的是自体骨髓干细胞移植技术，现今中医认为治疗DF归纳起来为：清热解毒，活血化瘀、祛腐生肌，温通经脉、益气活血等〔11〕。有研究报道，中药组方可以作为替代传统治疗DF的方法，其可通过减少组织中氧化应激反应，减少一氧化氮(NO)生产，促进血管生成因子合成从而使下肢缺血部位血管形成从而促使伤口愈合〔12〕。

本研究结果提示自体骨髓血干细胞移植联合口服活血生肌汤治疗对DF伴下肢慢性缺血患者临床症状改善明显，这可能是由于活血生肌汤中的多味中药成分有助于干细胞移植后的血管再生成的过程，发挥活血化瘀、益气活血的作用，增强干细胞移植的疗效。且自体骨髓血干细胞移植联合口服活血生肌汤治疗有利于DF伴下肢慢性缺血患者恢复。这可能是由于活血生肌汤里的多种中药有祛腐生肌作用，与干细胞移植技术协同增加疗效。另外本研究结果提示自体骨髓血干细胞移植联合口服活血生肌汤治疗有提高疗效的趋势。

1 Hingorani A,LaMuraglia GM,Henke P,etal.The management of diabetic foot:a clinical practice guideline by the society for vascular surgery in collaboration with the American Podiatric Medical Association and the Society for Vascular Medicine〔J〕.J Vasc Surg,2016;63(2 Suppl):3S-21S.

2 Martins-Mendes D,Monteiro-Soares M,Boyko EJ,etal.The independent contribution of diabetic foot ulcer on lower extremity amputation and mortality risk〔J〕.J Diabe Compl,2014;28(5):632-8.

3 张艳霞,付成华.中西医综合护理干预在早期糖尿病足治疗中的应用〔J〕.湖北中医药大学学报,2014;16(2):101-2.

4 Dubsky M,JirkovskáA,Bem R,etal.Comparison of the effect of stem cell therapy and percutaneous transluminal angioplasty on diabetic foot disease in patients with critical limb ischemia〔J〕.Cytotherapy,2014;16(12):1733-8.

5 卢世明,魏 进,韩玉亭，等.中西医结合疗法治疗糖尿病足30例疗效观察〔J〕.山东医药,2014;54(26):104-5.

6 王玉珍,许樟荣.糖尿病足病的诊断与治疗进展〔J〕.实用老年医学,2013;27(4):276-9.

7 李攻戍.从技术评价角度对合理应用《中药新药临床研究指导原则》的几点思考〔J〕.中药新药与临床药理,2008;19(4):319-21.

8 Heublein H,Bader A,Giri S.Preclinical and clinical evidence for stem cell therapies as treatment for diabetic wounds〔J〕.Drug Discov Today,2015;20(6):703-17.

10 Dubsky M,Jirkovska A,Bem R,etal.Both autologous bone marrow mononuclear cell and peripheral blood progenitor cell therapies similarly improve ischaemia in patients with diabetic foot in comparison with control treatment〔J〕.Diabetes Metab Res Rev,2013;29(5):369-76.

11 杨志光.复元活血汤联合生肌玉红膏治疗糖尿病足的临床观察〔J〕.陕西中医,2015;36(9):1176-7.

12 陆建荣,盛骥锋,盛继新,等.中西医综合治疗糖尿病足30例临床观察〔J〕.江苏中医药,2011;43(3):48-9.

〔2017-01-19修回〕

(编辑 袁左鸣/滕欣航)

河南省科技攻关重点项目(No.152102310170)

李高申(1971-)，男，硕士，教授，主要从事中医药教学与研究。

郭梅珍(1971-)，女，硕士，副教授，主要从事中医药教学与研究。

R587.1

A

1005-9202(2017)13-3198-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.13.032