血浆Ghrelin水平与2型糖尿病的关系

胡志娟 史亚男 王利军 刘 琼 陈 杏

(河北省人民医院肾内科，河北 石家庄 050051)

血浆Ghrelin水平与2型糖尿病的关系

胡志娟 史亚男 王利军 刘 琼 陈 杏

(河北省人民医院肾内科，河北 石家庄 050051)

目的 观察2型糖尿病(T2DM)及2型糖尿病肾病(DN)患者血浆Ghrelin水平，探讨其与糖、脂代谢、白蛋白尿及肾功能的关系。方法 检测30例正常对照及110例T2DM患者空腹血浆Ghrelin水平及血糖、血脂、血压、血肌酐、24 h尿白蛋白等。结果 T2DM患者的空腹血浆Ghrelin水平明显低于正常对照组(P<0.01)。T2DM血压正常组、血脂正常组、体质量偏低组及体质量正常组患者较正常对照组空腹血浆Ghrelin水平分别降低29%、28%、30%及35%(P<0.01)；T2DM高血压组、高血脂组及超重组患者空腹血浆Ghrelin水平较正常对照组降低更为明显，分别为42%、40%及38%(P<0.01)。T2DM高血压组、高血脂组及超重组患者较T2DM血压正常组、血脂正常及体质量偏低和正常组患者空腹血浆Ghrelin水平有所降低，但无显著差异(P>0.05)。T2DM正常MAU组、MAU组及明显白蛋白尿组患者较正常对照组空腹血浆Ghrelin水平分别降低30%、33%、35%(P<0.01)；T2DM白蛋白尿且血清肌酐>1.5 mg/dl未进入肾脏替代治疗组患者较正常对照组空腹血浆Ghrelin水平升高19%(P<0.05)，且较其他各组均明显升高(P<0.01)。T2DM正常MAU组与MAU组及白蛋白尿组患者，随白蛋白尿的增多，空腹血浆Ghrelin水平均有所降低，但三者之间无显著差异(P>0.05)。空腹血浆Ghrelin与体重指数(BMI，r=-0.309，P<0.01)、HbA1c(r=-0.264，P<0.01)、收缩压(r=-0.535，P<0.01)、舒张压(r=-0.604，P<0.01)呈负相关；与血清肌酐水平呈正相关(r=0.330，P<0.01)。多元逐步线性回归结果显示血清肌酐(β=0.326，P=0.000 9)、BMI(β=-0.265，P<0.000 1)及HbA1c(β=-0.231，P<0.000 1)共同决定空腹血浆Ghrelin。结论 T2DM患者空腹血浆Ghrelin水平明显低于正常对照组；T2DM伴有高血压、高血脂、超重及白蛋白尿时空腹血浆Ghrelin水平更低；肾功能异常的T2DM患者血浆Ghrelin水平明显升高。血清肌酐、BMI及HbA1c共同决定空腹血浆Ghrelin。

2型糖尿病；糖尿病肾病；Ghrelin；尿微量白蛋白

Ghrelin是生长激素促分泌物质受体(GHS-R)的内源性配体，它是酰化的含有28个氨基酸的多肽，最早由Kojima等〔1〕从大鼠胃黏膜细胞分离、纯化而得，其受体主要在下丘脑和垂体表达，也在胃肠道、甲状腺、胰腺、心肌和肾脏等外周组织表达〔2〕。研究显示，Ghrelin存在于许多正常的机体组织中，除了能促进生长激素(GH)的释放、参与机体能量代谢外，还有很多其他的生物学作用，并在人类多种疾病或病理状态中发挥重要的作用。本研究观察了2型糖尿病(T2DM)及2型糖尿病肾病(DN)患者血浆Ghrelin水平，探讨其与糖、脂代谢、白蛋白尿及肾功能的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 30例正常对照选自河北省人民医院健康体检者，男15例，女15例，平均年龄(56.3±2.2)岁。既往无糖尿病或其他代谢性疾病病史，无肥胖、高血压、心脑血管病及肾病史。110例符合1999年WHO推荐的糖尿病诊断标准的T2DM患者选自河北省人民医院，排除泌尿系感染及其他肾脏疾病，排除原发视网膜病变。通过病史、体检、心电图等辅助检查排除其他并发症。在1个月内未发生糖尿病酮症酸中毒，近期未使用对肾脏有损害的药物。糖尿病患者均未进入肾脏替代治疗。

1.2 观察项目及方法 测量血压、身高、体重，并计算体重指数(BMI)，将T2DM患者按照1997年WHO肥胖的诊断标准分为体质量偏低组(BMI<18.5 kg/m2)，正常组(18.5 kg/m2≤BMI<24.9 kg/m2)及超重组(BMI>25 kg/m2)；甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、血清肌酐(Scr)的测定在Beckman全自动生化分析仪上完成；空腹血浆葡萄糖(FPG)的测定采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法，上海生物制品研究所提供试剂；24 h尿微量白蛋白(MAU)测定采用酶联免疫吸附法(ELISA)，上海生物制品研究所提供试剂，根据24 h MAU将T2DM患者分为4组：1组，正常MAU组(MAU<30 mg/d)；2组，MAU组(MAU 30～300 mg/d)；3组，明显白蛋白尿组(MAU>300 mg/d)；4组，MAU>300 mg/d且血清肌酐>1.5 mg/dl未进入肾脏替代治疗者；糖化血红蛋白(HbA1c)的测定采用高效液性色谱法，在ADAMS HA-8160全自动糖化血红蛋白分析仪上完成；血浆Ghrelin测定用放射免疫法(RIA)，由美国Phoenix Pharm提供药盒统一测定，批内变异<5%。取受试者静脉血，空腹静脉血均为禁食12 h后清晨8：00采血，EDTA及抑肽酶抗凝，分离血浆-70℃冻存。

1.3 统计学方法 采用SPSS14.0统计软件进行t检验，χ2检验。多组间差异比较采用单因素方差分析，两两比较采用q检验；两因素相关性分析采用直线相关分析；应用多元逐步回归模型预测一个因变量和多个自变量之间的依存关系。

2 结 果

2.1 正常对照组和T2DM组观察指标比较 T2DM组BMI、收缩压、舒张压、TC、TG、FPG、HbA1c、Scr、24 h MAU水平均明显高于正常对照组(P<0.01)；T2DM组空腹血浆Ghrelin水平明显低于正常对照组(P<0.01)。见表1。

表1 正常对照组和T2DM组基线数据的比较±s)

2.2 T2DM高血压组及血压正常组与正常对照组空腹血浆Ghrelin比较 将T2DM患者按照有无高血压分为血压正常组及高血压组。与正常对照组比较，T2DM血压正常组患者较正常对照组空腹血浆Ghrelin水平降低29%(P<0.01)；T2DM高血压组患者空腹血浆Ghrelin水平降低更为明显，为42%(P<0.01)。T2DM高血压组患者较T2DM血压正常组患者空腹血浆Ghrelin水平有所降低，但无显著差异(P>0.05)。见表2。

表2 T2DM高血压组及血压正常组与正常对照组空腹血浆Ghrelin比较

与正常对照组比较:1)P<0.01；与T2DM血压正常组比较:2)P<0.01

2.3 T2DM高血脂组及血脂正常组与正常对照组空腹血浆Ghrelin比较 将T2DM患者按照有无高脂血症(TC>5.2 mmol/L，TG>1.7 mmol/L)分为血脂正常组及高血脂组。与正常对照组比较，T2DM血脂正常组患者空腹血浆Ghrelin水平降低28%(P<0.01)；T2DM高血脂组患者空腹血浆Ghrelin水平降低更为明显，为40%(P<0.01)。T2DM高血脂组患者较T2DM血脂正常组患者空腹血浆Ghrelin水平有所降低，但无显著差异(P>0.05)。见表3。

表3 T2DM高血脂组及血脂正常组与正常对照组空腹血浆Ghrelin比较

与正常对照组比较:1)P<0.01；与T2DM血脂正常组比较：2)P<0.01

2.4 T2DM超重组、体质量正常组及体质量偏低组与正常对照组空腹血浆Ghrelin比较 与正常对照组比较，T2DM体质量偏低组患者较正常对照组空腹血浆Ghrelin水平降低30%(P<0.05)；T2DM体质量正常组较正常对照组空腹血浆Ghrelin水平降低35%(P<0.01)；T2DM超重组较正常对照组空腹血浆Ghrelin水平降低38%(P<0.01)；T2DM超重组较T2DM体质量正常组及偏低组空腹血浆Ghrelin水平有所降低，但三者之间无显著差异(P>0.05)。见表4。

表4 T2DM不同体重组与正常对照组空腹血浆Ghrelin比较

与正常对照组比较：1)P<0.05,2)P<0.01

2.5 T2DM不同白蛋白尿水平与正常对照组空腹血浆Ghrelin比较 与正常对照组〔(108.12±38.35)pg/ml〕比较，1组患者较正常对照组空腹血浆Ghrelin水平降低30%〔(78.33±41.13)pg/ml,P<0.01〕；2组患者较正常对照组空腹血浆Ghrelin水平降低33%〔(72.43±37.54)pg/ml,P<0.01〕；3组患者较正常对照组空腹血浆Ghrelin水平降低35%〔(69.96±42.21)pg/ml,P<0.01〕；4组患者较正常对照组空腹血浆Ghrelin水平升高19%〔(132.76±43.08)pg/ml,P<0.05〕。1组与2组及3组患者，随白蛋白尿的增多，空腹血浆Ghrelin水平均有所降低，但三者之间无显著差异(P>0.05)。4组患者的空腹血清Ghrelin水平较1～3组均明显升高(P<0.01)。

2.6 空腹血浆Ghrelin与T2DM代谢指标的相关性分析 空腹血浆Ghrelin与BMI(r=-0.309，P<0.01)、HbA1c(r=-0.264，P<0.01)、收缩压(r=-0.535，P<0.01)、舒张压(r=-0.604，P<0.01)呈负相关；与Scr水平呈正相关(r=0.330，P<0.01)。与年龄(r=0.112)、性别(r=0.107)、病程(r=0.115)、TC(r=0.105)、TG(r=0.106)、FPG(r=0.115)均无显著相关性(均P>0.05)。

2.7 多元逐步回归分析T2DM患者空腹血浆Ghrelin与代谢指标的相关性 以空腹血浆Ghrelin为因变量，年龄、性别、BMI、血压、血脂、FPG、HbA1c、MAU为自变量进行多元逐步线性回归，结果显示Scr(β=0.326，P=0.000 9)、BMI(β=-0.265，P<0.000 1)及HbA1c(β=-0.231，P<0.000 1)共同决定空腹血浆Ghrelin。

3 讨 论

T2DM是多因素引起的代谢性疾病，肥胖是T2DM的重要危险因子。Ghrelin是胃肠道分泌的一种小分子活性肽，在能量代谢中发挥重要作用，与胰岛素分泌有密切关系，在糖尿病及其并发症的发病机制中可能起一定的作用。本研究表明，T2DM患者的BMI、收缩压、舒张压、TC、TG、FPG、HbA1c、Scr 、24 h MAU水平均明显高于正常对照组；T2DM患者的空腹血浆Ghrelin水平明显低于正常对照组。这与Poykko等〔3〕的研究发现一致。高血压是糖尿病心脑血管并发症的主要原因。有研究表明，Ghrelin有保护内皮细胞功能的作用。Ghrelin受体在人动脉粥样硬化的冠状动脉表达上调〔4〕，并且通过非生长激素依赖的机制，发挥改善血管内皮功能的作用〔5〕。人和动物实验证实，皮下或静脉注射Ghrelin能剂量依赖的降低平均动脉压〔6〕。Poykko等〔7〕报道 519例中年高血压患者饥饿时血浆中Ghrelin的浓度降低，其水平与收缩压及舒张压呈负相关。肥胖是T2DM患者心脑血管并发症的独立危险因素，有研究表明，在健康受试者及伴有和不伴有并发症的T2DM患者中，血浆Ghrelin浓度与BMI负相关〔8，9〕。DN与肾小球硬化为基本病理特征的病变，发病机制复杂，目前未完全阐明。Kuloglu等〔10〕用免疫组织化学的方法，观察了Ghrelin在链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肾脏的表达。将Wistar大鼠按时间点(2、4、6 w)处死后观察，结果发现正常对照组中Ghrelin在远曲小管表达，随时间延长表达无差别；在糖尿病大鼠中，Ghrelin在远曲小管及集合管均有表达，且随时间延长，表达强度增加，提示Ghrelin在DN发生的病理生理机制中可能起一定作用。Yoshimoto等〔11〕报道，血浆Ghrelin水平在轻至重度慢性肾衰竭的患者的血清肌酐呈正相关，与肌酐清除率呈负相关。在终末期肾脏病患者，一次血液透析可以使血浆Ghrelin水平下降50%。本文结果提示Ghrelin在能量代谢方面发挥重要作用，并且与胰岛素之间的相互调节和对胰岛素抵抗的影响也有不容忽视的作用。Ghrelin的基因突变也直接和间接地参与了糖尿病的发生发展。

1 Kojima M，Hosoda H，Date Y，etal.Ghrelin is a growth-hormone-releasing acylated peptide from stomach〔J〕.Nature，1999；402(6762)：656-60.

2 Howard AD，Feighner SD，Cully DF，etal.A receptor in pituitary and hypothalamus that functions in growth hormone release〔J〕.Science，1996；273(5277)：974-7.

3 Poykko S，Ukkola O，Kauma H，etal.Ghrelin Arg51Gln mutation is a risk factor for type 2 diabetes and hypertension in a random sample of middle-aged subjects〔J〕.Diabetologia，2003；46(4)：455-8.

4 Katugampola SD，Pallikaros Z，Davenport AP.〔125I-His(9)〕-Ghrelin，a novel radioligand for localizing GHS orphan receptors in human and rat tissue：up-regulation of receptors with atherosclerosis〔J〕.Br J Pharmacol，2001；134(1)：143-9.

5 Shimizu Y，Nagaya N，Teranishi Y，etal.Ghrelin improves endothelial dysfunction through growth hormone-independent mechanisms in rats〔J〕.Biochem Biophys Res Commun，2003；310(3)：830-5.

6 Nagaya N，Kojima M，Uematsu M，etal.Hemodynamic and hormonal effects of human ghrelin in healthy volunteers〔J〕.Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol，2001；280(5)：R1483-7.

7 Poykko SM，Kellokoski E，Horkko S，etal.Low plasma ghrelin is associated with insulin resistance，hypertension，and the prevalence of type 2 diabetes〔J〕.Diabetes，2003；52(10)：2546-53.

8 Tschop M，Weyer C，Tataranni PA，etal.Circulating ghrelin levels are decreased in human obesity〔J〕.Diabetes，2001；50(4)：707-9.

9 Shiiya T，Nakazato M，Mizusta M，etal.Plasma ghrelin levels in lean and obese humans and effect of glucose on ghrelin secretion〔J〕.J Clin Endocrinol Metab，2002；87(1)：240-4.

10 Kuloglu T，Dabak DO.Determination of ghrelin immunoreactivity in kidney tissues of diabetic rats〔J〕.Ren Fail，2009；31(7)：562-6.

11 Yoshimoto A，Mori K，Sugawara A，etal.Plasma ghrelin and desacyl ghrelin concentrations in renal failure〔J〕.J Am Soc Nephrol，2002；13(11)：2748-52.

〔2016-01-30修回〕

(编辑 苑云杰/曹梦园)

河北省引进留学人员资助项目(2016年)

胡志娟(1972-)，女，副主任医师，博士，硕士生导师，主要从事肾脏疾病的诊断和治疗研究。

R587.1

A

1005-9202(2017)13-3195-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.13.031