黄芩药材不同产地及不同炮制品的质量评价
2017-07-12谭安军
谭安军
(重庆市永川区中医院,重庆402160)
·实验研究·
黄芩药材不同产地及不同炮制品的质量评价
谭安军
(重庆市永川区中医院,重庆402160)
目的探讨不同产地的黄芩药材及炮制前后的质量差异。方法采用高效液相色谱法测定药材及炮制品中黄芩苷含量,按2015年版《中国药典(一部)》通则项下方法检测灰分及浸出物含量。结果来自不同产地的黄芩药材质量有一定差异,药材炮制前后黄芩苷、灰分、浸出物含量均发生明显变化;黄芩苷含量、醇浸出物含量在炮制过程中,依次按黄芩药材、酒黄芩、焦黄芩、黄芩炭降低;在炮制过程中,灰分含量依次按黄芩药材、酒黄芩、焦黄芩、黄芩炭升高。结论通过对不同产地黄芩药材及炮制品中相关检测指标的比较性研究,可为黄芩的质量研究、品质评价等提供参考。
黄芩;炮制;质量评价;黄芩苷
黄芩为唇形科植物黄芩Scutellaria baicalensisGeorgi的干燥根,味苦性寒,具有清热燥湿、泻火解毒功效[1]。其有效成分为黄芩苷、黄芩苷元、汉黄芩素、汉黄芩苷、G-谷甾醇等成分[2]。其抗菌谱较广,能抑制多种细菌、皮肤真菌、钩端螺旋体等,对青霉素等抗菌药物产生耐药性的金黄色葡萄球菌仍具有其抑制作用,黄芩还具有降血压、利尿、保肝、利胆、镇静、解除平滑肌痉挛、抗过敏等作用[3]。临床用黄芩治疗急性呼吸道感染、急性细菌性痢疾、传染性肝炎、肾盂肾炎、慢性气管炎等均有良好的疗效。黄芩苷为主要有效成分之一。黄芩提取物不但应用于天然植物药领域,还应用于人体及动物病防治、恶性疾病防治及化妆品等众多领域,其应用非常广泛,市场前景广阔。黄芩主产于河北、陕西、辽宁、内蒙古、山东、黑龙江等地,临床应用往往根据患者病情选用不同的药材,如黄芩酒制能引药上行,增强黄芩清上焦肺热的作用;炒炭后,则增强清热止血作用,常用于崩漏止血[4]。历代的黄芩炮制方法繁多,沿用至今的常用炮制品有生黄芩、酒黄芩和黄芩炭3种,为保证临床和生产用药需要,本试验中就不同产地黄芩药材及炮制品中相关检测指标进行比较,为黄芩的质量研究、品质评价等提供参考。现报道如下。
1 仪器与试药
1.1 仪器
LC-20A型高效液相色谱系统,包括SPD-20A检测器、LC-20A型高压恒流泵和LC Solution工作站(日本岛津公司);101型电热恒温干燥箱(北京科伟永鑫实验仪器设备厂);TG328B型分析天平(江苏常熟衡器厂);FW 100型高速万能粉碎机(北京中兴伟业仪器有限公司);标准药筛1~9号(上虞市大亨桥化验仪器厂);KQ-50DB型超声清洗器(江苏昆山超声仪器公司);TED型电热恒温水浴锅(天津市泰斯特仪器有限公司);RE52-99型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);SHZ-Ⅲ型循环水真空泵(巩义市英峪仪器厂)。
1.2 试药
黄芩苷对照品(批号为0751-9909,中国食品药品检定研究院);甲醇为色谱纯,其他试剂均为分析纯,水为超纯水。不同产地黄芩药材来源于河北承德、河北安国、河北易县、吉林长白山、内蒙古自治区乌兰浩特、陕西柞水、甘肃天祝、山东淄博、陕西洛南、四川雅安,均经重庆市中药研究院中药生药研究所赵素云研究员鉴定为唇形科植物黄芩Scutellatia baicalensisGeorgi的干燥根。
2 方法与结果
2.1 黄芩药材及炮制品制备[5]
2.1.1 黄芩及其炮制品制备
生黄芩:称取黄芩药材500 g,去除杂质,筛去灰屑,备用。
酒黄芩:称取生黄芩药材100 g,用10 mL黄酒拌匀,闷润至透,约6 h,置热锅内,用文火炒至深黄色时,取出摊开放凉,筛去灰屑,备用。
焦黄芩:称取生黄芩100 g,置热锅内用中火炒至焦黄色,取出摊开放凉,筛去灰屑,备用。
黄芩炭:称取生黄芩100 g,置热锅内,用武火炒至表面焦黑色,内部焦黄色时,喷淋清水少许,灭尽火星,取出,凉透,备用。
2.1.2 黄芩及其炮制品的粉碎
将生黄芩药材和炮制品烘干,粉碎,过60目筛,备用。
2.2 含量测定
2.2.1 色谱条件及系统适用性试验
色谱柱:Inertsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2);流速:1mL/min;柱温:30℃;检测波长:280 nm。黄芩苷色谱峰与相邻色谱峰分离度大于1.5。在此色谱条件下的色谱图见图1。
A.对照品溶液B.供试品溶液图1高效液相色谱图
2.2.2 溶液制备
对照品溶液:取在60℃减压干燥4 h的黄芩苷对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1mL含62μg的溶液,即得。
供试品溶液:称取黄芩粉末或炮制品0.3 g,置烧瓶中,加70%甲醇50mL,水浴回流3 h,趁热过滤,以适量70%甲醇洗涤容器和残渣2次,滤液全部并入100mL容量瓶中,以70%甲醇定容至100m L,作为贮备液,精密吸取1.0m L,置10m L容量瓶中,用70%甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,即得。
2.2.3 方法学考察
线性关系考察:分别精密吸取对照品溶液2,4,8,10,16,20μL,按拟订色谱条件进样,测定黄芩苷峰面积。以黄芩苷进样量为横坐标(X,C),以相应峰面积为纵坐标(Y,A),绘制标准曲线,得回归方程A=2 385 708C-189 632.5,r=0.999 9(n=6)。结果表明,黄芩苷进样量在0.124~1.24μg范围内与峰面积线性关系良好。
精密度试验:精密吸取黄芩苷对照品溶液10μL,按拟订色谱条件连续进样6次,测定。结果黄芩苷峰面积的RSD为0.68%(n=6),表明仪器精密度良好。
稳定性试验:精密吸取供试品溶液10μL,按拟订色谱条件,分别于0,2,6,12,18,24 h时进样测定,计算黄芩苷峰面积。结果的RSD为0.80%(n=6),表明供试品溶液在24 h内基本稳定。
重复性试验:取同一批药材样品6份,依法制备供试品溶液,进样测定,记录黄芩苷峰面积,计算样品中黄芩苷含量。结果黄芩药材样品中黄芩苷含量为18.50%,RSD为1.12%(n=6),表明方法重复性良好。
加样回收试验:取已知含量的同批黄芩药材样品6份(黄芩苷含量为18.50%),精密称定,分别加入不同浓度的黄芩苷对照品溶液适量,依法制备供试品溶液,照拟订色谱条件进样测定,计算回收率。结果黄芩苷平均回收率为98.94%,RSD为1.28%(n=6)。
2.2.4 样品含量测定
取样品适量,依法制备供试品溶液,照拟订色谱条件进样测定,按外标法计算样品中黄芩苷含量。结果见表1。
2.3 总灰分测定
取不同产地的药材粉末2.5 g,按照2015年版《中国药典(一部)》通则2302中灰分测定法测定,结果见表2。2.4浸出物测定
取不同来源的药材粉末,过2号筛,精密称定2.0 g,按照2015年版《中国药典(一部)》通则2201中浸出物测定法项下的稀乙醇热浸法测定,结果见表3。
3 讨论
黄芩传统以应用野生品为主,随着多年的采挖和市场用量的加大,野生资源锐减,已难以满足市场需求。近年来,人工种植黄芩发展很快,黄芩栽培品逐年增加。由最初的种子繁殖到无性扦插繁殖技术的推广,造成药材质量出现了一定差异。本研究结果与文献[6-7]报道一致,表明药材产地来源对药材质量有影响。黄芩作为我国中医临床中的大宗品种之一,经多年的药材栽培抚育,产品品质有了极大提升,以黄芩苷、总灰分、醇浸出物为考察指标,按现行2015年版《中国药典(一部)》为标准,均符合规定。
表1 不同产地黄芩药材及不同炮制品黄芩苷含量测定结果(,%)
表1 不同产地黄芩药材及不同炮制品黄芩苷含量测定结果(,%)
注:A为黄芩药材,B为酒黄芩,C为焦黄芩,D为黄芩炭。下表同。
产地河北承德河北安国河北易县吉林长白山内蒙古自治区乌兰浩特陕西柞水陕西洛南山东淄博甘肃天祝四川雅安黄芩苷含量A 18.36±0.11 16.42±0.08 16.82±0.10 13.27±0.08 12.36±0.11 14.86±0.09 15.63±0.11 16.23±0.14 14.56±0.13 13.86±0.07 B C D 17.16±0.08 15.02±0.11 14.90±0.12 12.17±0.09 11.56±0.08 11.48±0.11 13.16±0.12 14.63±0.10 12.15±0.10 12.03±0.13 11.68±0.14 10.50±0.13 11.15±0.16 7.76±0.20 6.94±0.16 7.38±0.14 7.06±0.17 9.38±0.10 7.02±0.21 6.91±0.15 5.27±0.09 5.06±0.11 4.93±0.08 3.64±0.03 4.05±0.08 3.82±0.16 3.60±0.15 4.06±0.17 3.61±0.09 2.92±0.43
表2 不同产地黄芩药材及不同炮制品总灰分测定结果(%)
表2 不同产地黄芩药材及不同炮制品总灰分测定结果(%)
产地河北承德河北安国河北易县吉林长白山内蒙古自治区乌兰浩特陕西柞水陕西洛南山东淄博甘肃天祝四川雅安总灰分含量A 3.43±0.13 2.98±0.08 3.04±0.14 3.14±0.10 2.99±0.12 3.08±0.09 4.01±0.14 3.58±0.12 4.05±0.13 4.42±0.21 B C D 3.08±0.11 2.56±0.11 2.88±0.09 3.04±0.14 2.75±0.11 2.84±0.12 3.68±0.10 3.05±0.14 3.47±0.06 4.04±0.12 4.73±0.14 3.26±0.17 3.97±0.11 3.88±0.18 3.93±0.14 4.05±0.12 5.68±0.17 5.66±0.15 5.17±0.17 6.59±0.16 7.68±0.13 7.52±0.14 8.06±0.10 7.91±0.13 7.96±0.11 8.06±0.09 7.06±0.11 8.90±0.20 7.64±0.16 8.08±0.15
表3 不同产地黄芩药材及不同炮制品浸出物含量测定结果(,%)
表3 不同产地黄芩药材及不同炮制品浸出物含量测定结果(,%)
产地河北承德河北安国河北易县吉林长白山内蒙古自治区乌兰浩特陕西柞水陕西洛南山东淄博甘肃天祝四川雅安浸出物含量A B C D 49.36±0.43 48.92±0.43 48.36±0.30 46.58±0.47 47.61±0.35 48.24±0.27 47.39±0.38 45.64±0.39 44.21±0.42 46.05±0.55 45.24±0.54 45.69±0.50 47.03±0.70 45.37±0.62 46.53±0.42 46.10±0.37 42.23±0.56 43.58±0.68 42.84±0.53 42.69±0.77 38.14±0.63 35.61±0.60 32.91±0.91 34.26±0.72 38.36±0.53 29.83±0.56 31.08±0.67 29.67±0.73 33.05±0.43 30.01±0.89 16.51±0.36 15.24±0.41 13.87±0.38 12.67±0.50 11.71±0.27 10.59±0.30 11.05±0.33 10.57±0.29 11.24±0.27 10.76±0.26
黄芩含有多种黄酮成分,如黄芩苷、黄芩索、汉黄芩什、汉黄芩素等20种,其中黄芩苷是主要成分,具有抗菌、消炎和降转氨酶的作用。炮制过程中采用蒸、炒、酒炒或炒炭等热加工处理方法,以抑制减少酶解,最大限度地保持有效成分[8-10],这也是炮制是否成功的难点。药材经火制、水浸加辅料等处理方法,有效成分或被溶出,或被水解或转化为新的成分,或消除或降低毒性。炮制前后,黄芩苷、总灰分、醇浸出物等的变化揭示了炮制的变化规律,对黄芩药材的临床应用具有一定借鉴作用。炮制目的是或缓和寒或增加药力,这与其性味归经和临床目的相关[11-14]。黄芩炮制前后,其化学成分发生明显变化,这将为中药炮制找到科学的依据,更好地指导临床用药。炮制中,采用机械处理,提高生产效率,但关键点的把握、药材炮制程度仍待提高,要求广大中药工作者投入更多的精力和时间,学习和继承传统技术。
由表1至表3可见,生黄芩药材中黄芩苷含量最高,在炮制过程中,黄芩苷、总灰分、醇浸出物等各项指标均发生了明显变化,与文献[15-16]报道基本一致。黄芩苷含量、醇浸出物含量在炮制过程中,按黄芩药材、酒黄芩、焦黄芩、黄芩炭依次降低;灰分含量在炮制过程中,按黄芩药材、酒黄芩、焦黄芩、黄芩炭依次升高。
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Quality Evaluation of Scutellaria Baicalensis from Different Habitats and Processed Products
Tan Anjun
(Yongchuan District Hospital of Traditional Chinese Medicine,Chongqing,China 402160)
Ob jective To compare the quality of Scutellaria Baicalensis from different habitats and processed products.M ethods The content of baicalin in herbs and processed products was determined by HPLC.Meanwhile,the contents of ash and extraction were determined by the general rules of Chinese Pharmacopoeia 2015 Edition.Resu lts The quality of Scutellaria Baicalensis had significant difference between different habitats.Compared with pre-processing,the content of baicalin,ash and extraction had significant difference.The contents of baicalin and alcohol extract in the processing process were decreased followed by Scutellaria Baicalensis,W ine Scutellaria Baicalensis,Coke Scutellaria Baicalensis,Charred Scutellaria Baicalensis in the course of processing,but the ash contents were increased in this order.Conclusion To evaluate the quality of Scutellaria Baicalensis from different habitats,which can provide the basis on the quality control.
Scutellaria Baicalensis;processing drugs;estimation of quality;baicalin
R288;R282.71
A
1006-4931(2017)09-0016-04
2017-01-15;
2017-02-01)
10.3969/j.issn.1006-4931.2017.09.005
谭安军(1976-),男,大学本科,副主任中药师,研究方向为医院药事管理及中药材质量控制,(电话)023-49808055(电子信箱)363259683@qq.com。