放射免疫分析法对原发性肝癌的早期诊断及价值

郑文博 毛中鹏



放射免疫分析法对原发性肝癌的早期诊断及价值

郑文博 毛中鹏

目的 探讨放射免疫法(RIA)在原发性肝癌早期诊断中的应用价值及可行性。方法 应用放射免疫法，检测239例肝病患者血清中甲胎蛋白异质体(AFP-L3)比值，以AFP-L3/AFP≥10%为阳性指标，并跟踪研究其病程发展，比较后期癌症确诊率。结果 放射免疫诊断法敏感度为99.12%，特异度为72.72%，阳性预测值为98.69%，阴性预测值为80.00%。与金标准相比在敏感度、特异度、阳性预测值等方面无显著性差异(P>0.05)，但两者的阴性预测值具有显著性统计学差异(P<0.05)。结论 本研究建立的原发性肝癌早期诊断方法特异性强、可信度高且操作方便，在原发性肝癌早期筛查应用中具有较高的可行性及应用价值。

原发性肝癌 放射免疫分析法 早期诊断 甲胎蛋白异质体

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:1129～1131)

原发性肝癌病情进展快、死亡率高，是最常见的恶性肿瘤之一[1]。但肝癌早期症状和体征不明显，经病理学和影像学难以确诊，临床确诊大多已晚期，治疗效果差。研究发现原发性肝癌的早期诊断、及时治疗能显著提高患者生存率[2-3]，是目前改善治疗效果的最佳途径，因此有效的早期肿瘤筛查和预警具有十分重要的意义。本研究以特异性强、灵敏度高的放射免疫法[4-5]为基本方法，以诊断价值更高的甲胎蛋白异质体[6-9]为检测指标，跟踪研究患者病程发展，探讨此法在原发性肝癌早期诊断或筛查中的可行性及应用价值。

1 资料与方法

1.1 资料

收集2013年9月到2015年7月到我院就诊的慢性肝病患者239例(失访患者并未统计在内)，包括肝硬化，病毒性肝炎、尚无法确诊的疑似肝癌病例及其它慢性肝病患者，肝病病史均五年以上，其中男性174例，女性65例，年龄25～65岁。所有肝病患者均经3位以上临床医师检查确诊,诊断符合第四届全国肝癌学术会议修订的原发性肝癌诊断标准[2，10]。排除合并其它肿瘤患者、妊娠期妇女及已确诊的肝癌患者。

1.2 仪器及试剂

GC-1200γ放射免疫计数器(上海五久自动化设备有限公司)，AFP放射免疫试剂盒(北京北方生物技术研究所)，人小扁豆素结合型甲胎蛋白异质体ELISA试剂盒(上海瓦兰生物科技公司)。

1.3 方法

1.3.1 阳性指标 甲胎蛋白是目前常用的原发性肝癌血清标志物，包括AFP-L1、AFP-L2、AFP-L3三种类型，但AFP-L1和AFP-L2在良性肝病和妊娠期妇女体内也会升高而出现假阳性，而AFP-L3为肝癌细胞所特有[12]，AFP-L3作为肿瘤标志物具有更高的特异性,[6，12-14]。美国FDA已批准将AFP-L3/AFP≥10%作为肝癌诊断指标[6]，故本研究以AFP-L3/AFP≥10%为阳性指标进行早期诊断可行性研究。

1.3.2 跟踪研究方案 清晨采集患者空腹静脉血液(EDTA抗凝)，-20 ℃保存，经冷冻离心分离血清，检测血清中的AFP以及AFP-L3含量，计算AFP-L3在AFP中的比例。 跟踪研究两组患者病程发展，10个月后结合病理学(组织活检)和影像学(B超、CT)检查[2，10]统计原发性肝癌确诊例数，经统计学分析，比较两组原发性肿瘤确诊率，并将放射免疫法诊断结果与金标准(病理学诊断标准：肝占位病灶或者肝外转移灶活体组织检查或手术切除组织标本，经病理组织学和(或)细胞学检查诊断为HCC，此为金标准)诊断结果进行对比分析，判断此法在原发性肝癌早期筛查中的可信度及价值。

1.4 统计学分析

2 结果

所有患者分别采用放射免疫诊断与金标准诊断，对两种检测结果对比发现，放射免疫诊断法敏感度为99.12%，特异度为72.72%，阳性预测值为98.69%，阴性预测值为80.00%。金标准诊断的敏感度为100.00%，特异度为66.67%，阳性预测值为99.57%，阴性预测值为100.00%。两种方法在敏感度、特异度、阳性预测值等方面比较无显著性差异(P>0.05)，但两者的阴性预测值具有显著性统计学差异(P<0.05)，见表1。

表1 两种方法诊断原发性肝癌结果比较/例

3 讨论

肝癌是指发生于肝脏的癌症，如果是肝脏内细胞所引发的癌症则称之为“原发性肝癌”；由机体其他器官的癌症转移到肝脏而形成的肝脏恶性肿瘤，称之为“继发性肝癌”。各种中胚叶肿瘤浸润到肝脏通常称为肉瘤肝脏浸润，不包括在继发性肝癌之中。原发性肝癌根据组织学分类可分为“肝细胞型”、“胆管细胞型”和“混合型”。原发性肝癌中有85.5%属于肝细胞癌。早起症状和体征不明显或缺乏特异性，有的起因时表现肝区胀痛，也有的表现急腹痛。或以转移灶症状为最早表现。诊断除根据临床表现外，尚需依靠肝功能试验、特殊的酶学检查等，除活组织检查外，以甲胎蛋白诊断准确率最高。采用手术治疗和中西医结合治疗，肝癌的存活率近年来有所提高。世界各地肝癌发病率以非洲撒哈拉沙漠以南和亚洲沿海地区发病率最高，欧、美则较低。该病恶性度高、病情进展快，患者早起一般无不适，一旦出现症状就诊往往已属于中晚期，因而治疗难度较大切疗效较差，一般发病后的生存时间仅为6个月，人称“癌中之王”。

在世界任何地区都同样发现，任何原因导致的慢性肝病都可能在肝癌发生和发展过程中起着重要的作用。流行病学和实验研究均表明病毒性肝炎与原发性肝癌的发生有着特定的关系，目前比较明确的与肝癌有关系的病毒性肝炎有乙型、丙型和丁型3种。其中以乙型肝炎与肝癌关系最为密切，近年HBsAg阴性肝癌数增加与丙型肝炎有关，而前苏联则以丁型为多[15]。我国肝癌患者中约90%有乙型肝炎病毒(HBV)感染背景。其他危险因素包括酒精性肝硬化、肝腺瘤、长期摄入黄曲霉素、其他类型的慢性活动性肝炎、Wilson病、酪氨酸血症和糖原累积病。肝癌发病率高，早期诊断发现肝癌可以提高患者的5a存活率[16]。

甲胎蛋白(AFP)定量测定为肝癌早期诊断的主要方法。良性的肝部病变发生时，坏死的肝细胞再产生AFP，其糖链结构与恶性的肝脏病变所产生的AFP具有差异，而甲胎蛋白异质体(AFP-L3)则是肝癌细胞所特有的。本文利用放射免疫法检测肝病患者血清中甲胎蛋白异质体(AFP-L3)比值，进而以AFP-L3/AFP≥10%为阳性指标，并跟踪研究其病程发展，研究表明，放射免疫诊断法敏感度为99.12%，特异度为72.72%，阳性预测值为98.69%，与原发性肝癌诊断的金标准相比无显著性差异，说明以放射免疫法为基础方法，以AFP-L3/AFP≥10%为阳性指标早期诊断原发性肝癌具有极高的诊断价值，能够在早期肿瘤筛查和肝癌预警中将发挥巨大优势。竞争性放射分析基于在用同位素标记的物质和与该物质有特异结合能力的结合体的结合反应中加入同种非标记物质,则发生竞争结合作用,进而通过这种竞争结合来测定非标记物质的含量。当特异结合体为抗体时,该测定方法则叫做放射免疫分析法(RIA) 。放射免疫法将经放射性标记的抗原和未经放射性标记的抗原同时结合特异性抗体，使其发生可逆的竞争性反应，进而对抗原与抗体的基本情况进行检测。

放射免疫法具有特异性强、灵敏度高的优点，且多在医院常规使用，普及性较强，以此为基础建立的早期诊断方法易于推广，具有更高的实用性。

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(编辑：吴小红)

Early Diagnosis of Radioimmunoassay for Primary Liver Cancer and Its Value

ZHENGWenbo.XinxiangMedicalUniversity,Xinxiang,453003

Objective To investigate the value and feasibility of radioimmunoassay (RIA) in the diagnosis of primary hepatic carcinoma by radioimmunoassay.Methods 239 cases of hepatopathy patient serum alpha fetoprotein in heterogeneous protein (AFP-L3) ratio,to AFP-L3/AFP was more than or equal to 10% for positive indicators,and tracking the course of the development of,compared to later stages of cancer diagnosis rate.Analysis this method in the early identification of primary hepatocellular carcinoma in the price value.Results Diagnostics sensitivity,specificity,positive predictive value and negative predictive value of RIA relatively were 99.12%,72.72%,98.69% and 80.00%.Comparing with the gold standard,it had no significant difference (P>0.05) in the sensitivity,specificity,positive predictive value,but had significant difference in the negative predictive value.Conclusion Early diagnosis of radioimmunoassay for primary hepatocellular carcinoma has strong specificity,high reliability and easy to operate,it has high feasibility and application value in primary liver cancer early screening applications.

Primary liver cancer;Radioimmunoassay;Early diagnosis;Alpha fetoprotein(AFP)

453003 河南新乡医学院(郑文博)；300162 武警后勤学院附属医院(毛中鹏)

毛中鹏

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.07.026

R735.7

A

1001-5930(2017)07-1129-03

2016-09-12

2017-05-24)